经皮冠状动脉介入治疗(PCI)是冠状动脉粥样硬化的常用治疗手段.支架内再狭窄(ISR)是植入支架后较为高发的并发症.微RNA(microRNA,miRNA)可以作为再狭窄诊断和治疗的生物标志物和靶标,预防或减少再狭窄的发生.本文综述了ISR的病理生理机制,介绍了几种miRNA在ISR的功能和调节过程,阐释了其在调控血管平滑肌细胞(VSMC)和内皮细胞(EC)的表型、增殖和迁移中的作用.为针对miRNA的ISR的治疗和预防策略提出临床参考,从而指导治疗方案.

目的:探讨miRNA-205在慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）患者血管钙化中的作用及诊断价值。方法:该研究分为体外细胞实验和回顾性队列研究。采用大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行体外实验，茜素红染色法、钙含量检测血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的钙化情况，碱性磷酸酶检测试剂盒测定碱性磷酸酶活性，Western印迹检测VSMCs成骨转录因子Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及平滑肌22α蛋白（smooth muscle 22α，SM-22α）的蛋白表达水平，实时荧光定量PCR检测VSMCs中miRNA-205和Runx2的表达含量。双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-205与Runx2的靶向关系。回顾性选择2020年6月至2021年1月河北医科大学第四医院肾内科的CKD 3～5期非透析患者，并按照冠状动脉钙化积分（coronary artery calcium score，CACs）将患者分为无钙化组（CACs=0）、轻中度钙化组（0400）。采用Spearman相关分析法评价血清miRNA-205、Runx2与CKD患者血管钙化的相关性，Logistic回归模型及受试者工作特征曲线分析miRNA-205预测CKD患者血管钙化的价值。结果:（1）与对照组相比，高磷组VSMCs钙结节较多，钙含量、碱性磷酸酶活性、Runx2蛋白表达均显著较高，α-SMA、SM-22α蛋白及miRNA-205表达水平均较低（均 P<0.05）。过表达miRNA-205时，VSMCs钙化减轻，α-SMA和SM22α蛋白表达水平均升高，Runx2蛋白表达水平降低（均 P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果显示，miRNA-205-5p过表达后野生型Runx2 3’端非编码区质粒荧光素酶活性降低。（2）纳入CKD患者80例，年龄（57.50±14.93）岁，其中男性49例（61.3%）。无钙化组（ n=26）、轻中度钙化组（ n=30）和重度钙化组（ n=24）患者miRNA-205和Runx2表达水平比较结果显示，钙化程度越高，miRNA-205表达水平越低，Runx2 mRNA表达水平越高（均 P<0.05）。血清miRNA-205与CACs呈负相关（ r=-0.50， P<0.01），Runx2与CACs呈正相关（ r=0.55， P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，miRNA-205（ OR=0.451，95% CI 0.122～0.873）是CKD患者发生血管钙化的独立影响因素。miRNA-205和miRNA-205联合Runx2预测血管钙化的受试者工作特征曲线下面积分别为0.796（95% CI 0.697～0.859）和0.924（95% CI 0.866～0.982）。 结论:miRNA-205通过靶向Runx2负向调控VSMCs成骨样表型转化进而抑制血管钙化，有望成为早期诊断CKD患者血管钙化的生物标志物。

目的:探讨N 6-甲基腺嘌呤（N 6-methyladenosine，m 6A）甲基转移酶3（methyltransferase- like 3，METTL3）调控凋亡相关蛋白在慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）血管钙化中的作用机制。 方法:（1）临床试验：实时荧光定量PCR法检测维持性血液透析（maintenance hemodialysis，MHD）患者血清METTL3 mRNA水平。（2）细胞实验：Western印迹法检测高磷刺激的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中METTL3蛋白表达，免疫荧光双染法观察METTL3与Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）的分布。构建METTL3过表达和敲低质粒，分别转染VSMCs，茜素红染色检测钙化情况，Western印迹法检测成骨标志物Runx2、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein-2，BMP-2）、Ⅰ型胶原（collagen Ⅰ）和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达。（3）动物实验：30只SD大鼠被随机分为对照组、CKD血管钙化组、S-腺苷高半胱氨酸（S-adenosylhomocysteine，SAH）干预组，硝酸银染色评估胸主动脉钙化情况，免疫组化及Western印迹法检测Runx2、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:（1）MHD血管钙化患者血清中METTL3 mRNA水平明显低于无钙化患者（ P<0.05），且与冠状动脉钙化积分呈负相关（ r=-0.65， P<0.001）。（2）高磷刺激的VSMCs中METTL3蛋白表达降低，并呈现时间依赖性。免疫荧光双染发现METTL3与Runx2共表达于细胞核。在高磷处理的VSMCs中过表达METTL3后Runx2、BMP-2、Collagen I表达明显降低，并伴有钙化结节减少，且凋亡蛋白Bax/Bcl-2比值降低（均 P<0.05）。反之，敲低METTL3通过诱导凋亡加重VSMCs钙化。（3）进一步在体内模型中给予METTL3抑制剂SAH，发现抑制METTL3表达可显著增加大鼠胸主动脉钙化，且Bax/Bcl-2比值、Runx2表达上调。 结论:MHD血管钙化患者血清METTL3水平降低，体内外实验证实METTL3可通过介导凋亡相关蛋白Bax /Bcl-2抑制CKD血管钙化。

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)调控Kruppel因子5(Klf5)在预防移植静脉术后狭窄的作用及机制。方法:建立新西兰大白兔(海军军医大学动物实验中心提供)静脉动脉化动物模型，按完全随机分为造模组(A、B、C组分别为饲养2、4、8周)和ATRA组(D、E、F组分别为饲养2、4、8周，鼻饲ATRA10 mg/d)、空白对照组(G组)，各6只。分别获取移植静脉标本，行苏木精-伊红染色及免疫组化检验。建立人脐静脉平滑肌细胞(SMC)KLF5过表达细胞模型，以ATRA干预，划痕实验、细胞增殖实验(CCK-8)明确SMC增殖及迁移情况；免疫共沉淀明确ATRA对Klf5-RARa结合的阻断作用。两组间计量资料采用两独立样本 t检验，多组间计量资料采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验方法。 结果:各组管径：A组(107.58±18.11) μm，B组(144.65±26.10) μm，C组(160.28±28.06) μm，D组(78.42±9.00) μm，E组(102.75±16.47) μm，F组(117.47±38.06) μm，G组(35.73±6.04) μm。组间比较，建模组各组(A、B、C各组)明显高于空白对照组(G组)( t＝5.81、8.81、10.08， P<0.01)，同期建模组各组明显高于ATRA组( t＝2.06、2.96、3.03， P<0.05)。以染色指数法计算免疫组化结果，建模各组细胞核增殖抗原(Ki-67，2周3.07±0.64，4周3.67±0.81，8周1.93±0.41)表达明显高于对照组( t＝6.93、9.37、4.16， P<0.01)，也高于同期ATRA组(2周2.87±0.52，4周3.60±1.21，8周2.10±0.24， t＝4.91、6.66、2.14， P<0.05)。实验组Klf5表达(2周4.43±0.70，4周5.67±1.18，8周3.03±0.98)明显高于对照组( t＝7.27、9.09、3.83， P<0.01)，建模组与ATRA组间KLF5(2周4.43±0.70，4周5.67±1.18，8周3.03±0.98)表达差异无统计学意义( t＝0.49、0.17、0.42， P>0.05)。CCK-8实验：72 h Klf5组吸光度( A)值(1.54±0.20)高于其余3组( t＝5.62、5.84、8.31， P<0.01)，Klf5+ATRA组(1.02±0.14)高于ARTA组(0.80±0.07， t＝2.47， P<0.05)，对照组(1.04±0.13)高于ATRA组( t＝2.70， P<0.05)。划痕实验：以迁移前后划痕距离的比值，klf5组0.098±0.006，对照组0.404±0.009，ATRA组0.597±0.014，Klf5+ATRA 0.265±0.012，组间比较ATRA组高于其余3组( t＝4.81、6.12、8.41， P<0.01)，Klf5组低于其余3组( t＝-8.37、-10.16、-12.25， P值均<0.01)。免疫共沉淀发现Klf5-RARa可以结合形成复合物，以不同浓度ATRA电泳 A值进行统计分析，50 μmol/ml组 A值(1.38±0.15)及70 μmol/ml组 A值(1.19±0.12)明显低于其余各组(对照组1.88±0.16、10 μmol/ml组1.81±0.10、30 μmol/ml组1.76±0.13， t＝-5.60、-5.10、-4.80、-7.10、-6.80、-6.40， P<0.01)。 结论:ATRA可以通过对KLF5-RARa结合的阻断作用来抑制平滑肌细胞增殖及迁移，进而预防静脉移植术后血管狭窄。

目前，冠状动脉旁路移植术仍是治疗冠心病(尤其是严重冠状动脉多支狭窄病变)的首选治疗方法之一。可用于CABG术的旁路移植血管选择多样，其中大隐静脉因获取难度低、长度足够、对获取位置肢体血供影响小的特点，成为术中最常用的旁路移植血管。然而，相对于动脉旁路移植血管，大隐静脉远期通畅率低，存在更多致管腔狭窄因素。内膜损伤、急性血栓形成和平滑肌细胞增生是早期血管再狭窄的风险因素，也为远期狭窄奠定了基础。本文对CABG术后大隐静脉再狭窄早期机制、预测及预防的最新研究进展作简要综述。

目的:探讨miR-133a-3p修饰的人源脐带血间充质干细胞（ucMSC）衍生的外泌体对急性心肌梗死（AMI）后大鼠心肌修复的作用。方法:体外扩增培养ucMSC，将携带miR-133a-3p的慢病毒载体及阴性对照载体分别转染至ucMSC，分别提取其分泌的外泌体，命名为miR-133a-3p-Exo及miR-NC-Exo。采用冠状动脉左前降支结扎术构建大鼠AMI模型，分别于梗死区边缘原位注射miR-133a-3p-Exo或miR-NC-Exo进行干预。干预后28 d，采用超声心动图检测大鼠心功能；采用Masson染色检测大鼠梗死后心肌纤维化面积；采用TUNEL染色评估梗死后大鼠心肌凋亡情况；采用免疫荧光染色评估梗死后大鼠血管新生情况。结果:与miR-NC-Exo组相比，miR-133a-3p-Exo组在AMI后28 d左心室射血分数较高［（64.2%±8.9%）比（47.4%±9.8%）， P<0.05］，心肌纤维化面积［（18.0%±1.5%）比（31.2%±7.3%）， P<0.01］和凋亡率［（15.1%±4.4%）比（25.6%±3.6%）， P<0.05］较低；梗死边缘区血小板-内皮黏附因子（CD31）及平滑肌肌动蛋白（α-SMA）阳性血管的数量均较多［CD31：（13.9±2.0）条比（2.9±0.9）条，α-SMA：（11.0±1.6）条比（3.5±0.9）条， P均<0.000 1］。 结论:miR-133a-3p修饰的ucMSC分泌的外泌体可有效抑制梗死后心肌凋亡、促进梗死后血管新生，从而改善AMI后大鼠的心功能。

血管钙化广泛存在于心血管疾病、糖尿病等疾病中，是导致心血管并发症的重要因素。随着钙化评估和诊断技术的发展，钙化过程为主动炎症过程的观点逐渐被接受，而调控冠状动脉钙化（CAC）的信号通路也被进一步探索。CAC的评估技术在不断革新，以期更清晰地显示斑块结构，评估斑块的钙化程度及预测术后并发症的风险。该文主要对CAC的分子调控机制及相关评估技术的研究进展作一综述，旨在结合目前的检测技术更好地识别病变，全面了解CAC的发生发展过程。

腱糖蛋白C是一种细胞外基质糖蛋白，在胚胎发育早期短暂表达，广泛参与细胞的增殖、分化以及组织修复等过程。腱糖蛋白C的表达受到机械应力、多种信号通路及转录因子的调控，并通过诱导血管平滑肌增殖、介导炎症细胞浸润等机制促进心血管疾病的发生和发展，与疾病的活动程度、危险度分层和预后密切相关。该文综述了腱糖蛋白C在心脏、主动脉与冠状动脉发育中的表达模式，以及其在儿童急性心肌炎、扩张型心肌病、风湿性心脏病、马方综合征、川崎病及肺动脉高压等儿童心血管疾病的临床诊治与预后预测中的应用价值。

目的:研究致敏性CD4 + T细胞在心肌梗死（心梗）后心肌重构中的作用。 方法:①体外实验：提取原代小鼠脾脏CD4 + T细胞，用CD3/CD28抗体处理48 h后，超高速离心并提取细胞上清液中的外泌体。将致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体与心肌成纤维细胞共同孵育48 h，利用细胞增殖及细胞毒性检测实验（CCK-8）、Transwell实验及免疫荧光实验检测致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体对心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化的影响。②体内实验：利用随机数字表法将40只雄性C57小鼠分成对照组（Ctrl组）、假手术组（Sham组）、心梗组（MI组）、外泌体处理组（MI+Exo组），每组10只。采用结扎冠状动脉左前降支复制小鼠心梗模型。MI+Exo组于制模后尾静注射外泌体40 μg/d。术后4周，用心脏超声、定量聚合酶链反应（qPCR）评估致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体对小鼠心功能状态及心脏纤维化程度的影响。 结果:①体外实验：致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体可以显著增加心肌成纤维细胞增殖、迁移及分化能力〔细胞增殖（ A值）：0.31±0.01比0.21±0.01，迁移能力（个/MP）：79.20±3.34比48.80±2.13，分化能力（α-平滑肌肌动蛋白，α-SMA；荧光强度）：1.56±0.03比1.00±0.02，均 P<0.05〕。②体内实验：致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体可加速心梗后心功能的恶化，表现为：与MI组比较，MI+Exo组左室射血分数（LVEF）及短轴收缩率（FS）显著下降〔LVEF：0.185±0.008比0.257±0.022，FS：（9.72±1.72）%比（14.08±1.08）%，均 P<0.05〕，左室舒张期末内径（LVEDD）及左室收缩期末内径（LVESD）显著增加〔LVEDD（mm）：5.43±0.29比4.62±0.35，LVESD（mm）：4.94±0.12比3.69±0.29，均 P<0.05〕。另外，qPCR结果显示，致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体具有促进心梗后心肌纤维化的发生，表现为：MI+Exo组α-SMA、胶原（Col1a1、Col3a1）的mRNA表达显著高于MI组〔α-SMA（2 -ΔΔCT）：4.72±0.89比3.58±0.78，Col1a1（2 -ΔΔCT）：6.59±0.56比4.23±0.42，Col3a1（2 -ΔΔCT）：13.40±1.03比4.96±0.36，均 P<0.05〕。 结论:致敏性CD4 + T细胞来源的外泌体具有显著加速心梗后心肌病理性重构的作用。

目的:探讨静脉曲张的组织学和细胞学改变以及c-fos上调与血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转换的关系。方法:2019年1月至6月纳入复旦大学附属华东医院31例静脉曲张患者(曲张静脉组)和12例冠状动脉搭桥术的患者(正常静脉组)纳入研究，采集大隐静脉进行实验。实时定量聚合酶链反应、免疫组织化学方法检测c-fos的表达。原代培养VSMCs采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和划痕法检测VSMCs的增殖和迁移能力。采用SPSS 22.0软件进行 χ2检验或 t检验。 结果:曲张组静脉管腔扩张，管壁增厚，细胞排列紊乱。与对照组比较，曲张组c-fos和骨桥蛋白(OPN)的mRNA水平明显升高( t＝4.872、6.221， P<0.05)，且c-fos表达与OPN/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMΑ)呈正相关( R2＝0.509， P<0.01)。来自曲张组的VSMCs增殖(0.851±0.048比1.493±0.064， t＝13.990， P<0.05)和迁移(0.403±0.032比0.708±0.033， t＝9.335， P<0.05)能力显著增强。此外，曲张组VSMCs的c-fos蛋白表达显著上调( t＝17.270， P<0.05)，伴随着α-SMA的降低( t＝3.329， P<0.05)和OPN的增加( t＝5.990， P<0.05)。 结论:病变标本中c-fos的表达水平上调，同时表型标志物(OPN/α-SMA)也发生改变。曲张组原代培养的VSMCs具有增强的增殖和迁移能力。c-fos的上调可能在VSMCs表型转换中起作用，进而参与静脉曲张的发病机制。