调节性T细胞通过多种介质抑制致病性T细胞的激活和随后的效应功能，在机体免疫耐受机制中发挥关键作用，参与了多种自身免疫病的发生发展。叉头框蛋白P3（Foxp3）特异性表达于调节性T细胞，并可以维持调节性T细胞的增殖分化及其抑制功能，Foxp3 +调节性T细胞是目前已知的主导免疫耐受的淋巴细胞，研究发现多种药物可提高体内调节性T细胞水平，促进免疫耐受，最终抑制自身免疫。

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)调控Kruppel因子5(Klf5)在预防移植静脉术后狭窄的作用及机制。方法:建立新西兰大白兔(海军军医大学动物实验中心提供)静脉动脉化动物模型，按完全随机分为造模组(A、B、C组分别为饲养2、4、8周)和ATRA组(D、E、F组分别为饲养2、4、8周，鼻饲ATRA10 mg/d)、空白对照组(G组)，各6只。分别获取移植静脉标本，行苏木精-伊红染色及免疫组化检验。建立人脐静脉平滑肌细胞(SMC)KLF5过表达细胞模型，以ATRA干预，划痕实验、细胞增殖实验(CCK-8)明确SMC增殖及迁移情况；免疫共沉淀明确ATRA对Klf5-RARa结合的阻断作用。两组间计量资料采用两独立样本 t检验，多组间计量资料采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验方法。 结果:各组管径：A组(107.58±18.11) μm，B组(144.65±26.10) μm，C组(160.28±28.06) μm，D组(78.42±9.00) μm，E组(102.75±16.47) μm，F组(117.47±38.06) μm，G组(35.73±6.04) μm。组间比较，建模组各组(A、B、C各组)明显高于空白对照组(G组)( t＝5.81、8.81、10.08， P<0.01)，同期建模组各组明显高于ATRA组( t＝2.06、2.96、3.03， P<0.05)。以染色指数法计算免疫组化结果，建模各组细胞核增殖抗原(Ki-67，2周3.07±0.64，4周3.67±0.81，8周1.93±0.41)表达明显高于对照组( t＝6.93、9.37、4.16， P<0.01)，也高于同期ATRA组(2周2.87±0.52，4周3.60±1.21，8周2.10±0.24， t＝4.91、6.66、2.14， P<0.05)。实验组Klf5表达(2周4.43±0.70，4周5.67±1.18，8周3.03±0.98)明显高于对照组( t＝7.27、9.09、3.83， P<0.01)，建模组与ATRA组间KLF5(2周4.43±0.70，4周5.67±1.18，8周3.03±0.98)表达差异无统计学意义( t＝0.49、0.17、0.42， P>0.05)。CCK-8实验：72 h Klf5组吸光度( A)值(1.54±0.20)高于其余3组( t＝5.62、5.84、8.31， P<0.01)，Klf5+ATRA组(1.02±0.14)高于ARTA组(0.80±0.07， t＝2.47， P<0.05)，对照组(1.04±0.13)高于ATRA组( t＝2.70， P<0.05)。划痕实验：以迁移前后划痕距离的比值，klf5组0.098±0.006，对照组0.404±0.009，ATRA组0.597±0.014，Klf5+ATRA 0.265±0.012，组间比较ATRA组高于其余3组( t＝4.81、6.12、8.41， P<0.01)，Klf5组低于其余3组( t＝-8.37、-10.16、-12.25， P值均<0.01)。免疫共沉淀发现Klf5-RARa可以结合形成复合物，以不同浓度ATRA电泳 A值进行统计分析，50 μmol/ml组 A值(1.38±0.15)及70 μmol/ml组 A值(1.19±0.12)明显低于其余各组(对照组1.88±0.16、10 μmol/ml组1.81±0.10、30 μmol/ml组1.76±0.13， t＝-5.60、-5.10、-4.80、-7.10、-6.80、-6.40， P<0.01)。 结论:ATRA可以通过对KLF5-RARa结合的阻断作用来抑制平滑肌细胞增殖及迁移，进而预防静脉移植术后血管狭窄。

目的:观察复方黄黛片联合全反式维甲酸用于治疗急性早幼粒细胞白血病的临床疗效。方法:选择2013年2月至2015年2月于湖州市第一人民医院治疗的急性早幼粒细胞白血病患者120例为研究对象，按照随机数字表法分为研究组（60例）和对照组（60例）。对照组患者予以全反式维甲酸、巯嘌呤联合甲氨蝶呤治疗，研究组患者予以全反式维甲酸联合复方黄黛片治疗，记录患者血红蛋白（Hb）开始回升时间、血小板（PLT）开始回升时间和首次完全缓解时间；统计随访5年内患者病情复发及死亡情况，观察患者治疗期间药物不良反应发生情况。结果:研究组患者Hb开始回升时间、PLT开始回升时间和首次完全缓解时间［（19.56±2.61）d、（20.42±2.73）d、（1.74±0.45）个月］均显著短于对照组［（28.42±3.85）d、（30.63±4.02）d、（3.31±0.69）个月］（ t=10.328、9.746、8.521，均 P<0.001）；研究组患者随访1年内和5年内复发率（11.37%和21.67%）显著低于对照组（28.33%和41.67%）（χ 2=5.208、5.546， P=0.022、0.019），且研究组患者随访5年内病死率（8.33%）显著低于对照组（25.00%）（χ 2=6.000， P=0.014）；研究组患者各类药物不良反应总发生率（28.33%）与对照组（26.67%）差异无统计学意义（χ 2=0.042， P=0.838）。 结论:复方黄黛片联合全反式维甲酸可有效缩短急性早幼粒细胞白血病病情缓解周期，降低患者复发率和病死率，且安全性较高。

目的:探讨以髓细胞肉瘤（MS）为首发表现伴获得性21三体急性早幼粒细胞白血病（APL）患者的预后。方法:回顾性分析2017年4月17日江苏省靖江市人民医院收治的1例以MS为首发表现伴获得性21三体APL患者的临床表现、遗传学检查、组织病理及治疗过程，并进行文献复习。结果:该患者为首例报道以MS为首发表现伴获得性21三体APL，骨髓形态缺乏Auer小体，经全反式维甲酸（ATRA）及三氧化二砷（As 2O 3）联合化疗后达完全缓解，复查染色体核型恢复正常。但临床随访过程中出现新的染色体改变，但APL提示仍处于缓解中。 结论:以MS为首发表现伴获得性21三体APL非常罕见，获得性21三体可能参与发病，是否会提高复发还有待进一步研究。

免疫性血小板减少症是以孤立性血小板减少为特征的常见出血性疾病，部分患者病程持续超过12个月，发展为慢性免疫性血小板减少症( chronic immune thrombocytopenia，CITP)。CITP病因复杂。传统的一线治疗对CITP患者疗效有限，研究中的二线治疗(血小板生成素及其受体激动剂、利妥昔单抗和脾切除术)、免疫抑制剂、全反式维甲酸、阿托伐他汀和造血干细胞移植为CITP的治疗提供了新的思路。该文就近年来CITP的治疗进展进行综述，希望有助于制定CITP的个体化治疗方案。

目的:探索RA患者外周血肽基脯氨酰顺反异构酶1（Pin1）活性的表达和辅助性T细胞（Th）17/调节性T细胞的数值及相关性，并分析全反式维甲酸（ATRA）对其的作用和影响。方法:①对比RA患者治疗前后及健康对照组3组间Pin1表达、及Th17、调节性T细胞绝对计数的差异，采用Kruskal-Wallis秩和检验进行分析；②分析RA初治组患者Pin1表达与其一般资料、活动性指标（如ESR、CRP及DAS28评分），以及Th17、调节性T细胞及部分细胞因子的相关性，采用皮尔逊、Spearman相关检验；③分析RA患者加用小剂量全反式维甲酸（10 mg，每周2次）与羟氯喹等传统免疫抑制剂分别治疗3个月后的外周血Pin1表达及Th17/调节性T细胞的差异，2组间对比采用Mann-Whitney U检验，以 P<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:① RA初治组的外周血Pin1活性[13.62（9.16，19.42）]高于健康对照组[8.97（7.62，11.45）]（ Z=42.82， P<0.05），且Th17[18.28（12.76，24.08）]高于健康对照组[6.04（4.96，7.73）， Z=48.83， P<0.05]，而调节性T细胞[11.06（5.31，21.87）低于健康对照组[40.41（24.33，48.52）， Z=42.21， P<0.05]；② RA初治组外周血Pin1活性与CRP、受累关节的个数、DAS28评分、IL-6及TNF-α呈正相关且差异具有统计学意义（ r=0.396， P<0.05； r=0.683， P<0.05； r=0.466， P<0.05； r=0.315， P<0.05； r=0.416， P<0.05），而与调节性T细胞值呈负相关（ r=-0.502， P<0.05）；③与RA初治组比较，RA用药组Pin1活性[6.94（5.96，8.77）]和Th17[7.38（3.85，11.21）]均有所下降，而调节性T细胞[40.41（17.77，33.47）， Z=42.82， P<0.05]较前上升；④与传统药物组相比，维甲酸组的调节性T细胞[28.9（21.73，37.36）]较高，差异具有统计学意义（ Z=-2.683， P<0.05），Pin1活性[6.23（5.58，8.75）]有明显下降趋势，但差异无统计学意义（ Z=-1.622， P=0.104）。 结论:RA患者外周血Pin1过表达，Th17增高而调节性T细胞降低，加用ATRA联合其他传统药物治疗可以降低Pin1活性，促进调节性T细胞生长，在一定程度上能更有效改善RA患者疾病活动。

目的:探究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4，NOX4)通过调控细胞增殖对小鼠神经管缺损(neural tube defects，NTDs)形成的作用。方法:选用体重18~20 g的健康C57BL/6J小鼠，雌鼠30只，雄鼠15只，雌雄小鼠按2∶1比例于晚上合笼、过夜，次日清晨观察小鼠阴道栓，有明显阴道栓确认已交配，当日记为孕0.5 d(E0.5)。选取明确受孕的18只小鼠，按随机数字表法随机分为小鼠NTDs组(9只)和对照组(9只)。孕8.5 d(E8.5)时，将小鼠NTDs组利用全反式维甲酸(all trans retinoid acid，ATRA)按70 mg/kg的浓度灌胃处理，对照组采用橄榄油灌胃处理。在孕9.5 d(E9.5)收集胎鼠。体式显微镜下观察胚胎神经管发育情况并拍照记录形态。通过免疫荧光染色法观察神经管形态，蛋白质印迹法(Western blot)检测NOX4和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)在神经管的表达情况。构建NOX4过表达质粒(oe-NOX4)和对照(NC)以及NOX4沉默质粒(sh-NOX4 2 #、sh-NOX4 3 #)和对照(sh-NC)，分别转染至C17.2细胞系中，通过Western blot检测NOX4及增殖相关蛋白PCNA的表达情况；通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8，CCK8)检测转染质粒24 h、48 h、72 h、96 h后细胞生长情况，进一步明确NOX4对细胞增殖的调控作用。 结果:体式显微镜下观察E9.5胎鼠神经管发育情况，NTDs组存在明显神经管畸形。免疫荧光染色结果也显示NTDs组存在明显的神经管闭合不全，对照组神经管发育正常，且NTDs组神经管中NOX4表达略高于对照组，而PCNA的表达低于对照组。Western blot结果显示，NTDs组胚胎中NOX4表达(6.24±2.70)高于对照组(1.00±0.51)，PCNA的表达(0.75±0.09)低于对照组(1.00±0.12)，两组间的差异有统计学意义( P<0.05)。在C17.2神经干细胞中转染NOX4过表达质粒(oe-NOX4)和沉默质粒(sh-NOX4 2 #、sh-NOX4 3 #)，利用Western blot检测NOX4表达水平的变化，结果显示，转染oe-NOX4质粒后，NOX4的表达(1.26±0.13)显著高于转染NC组(1.00±0.02)，而转染oe-NOX4质粒后增殖相关蛋白PCNA的表达(0.71±0.10)较NC组(1.00±0.12)显著降低，差异有统计学意义( P<0.05)；相反，转染sh-NOX4 2 #、sh-NOX4 3 #质粒后，NOX4的表达为(0.85±0.06)、(0.71±0.06)，显著低于转染sh-NC质粒组(1.00±0.04)，PCNA的表达(1.61±0.17)、(1.43±0.17)较sh-NC组(1.00±0.17)明显增加，差异有统计学意义( P<0.05)。利用CCK8实验探究NOX4对细胞增殖能力的影响，结果提示，过表达NOX4，24 h后与NC组相比，吸光度为(0.48±0.01)比(0.48±0.02)，48 h为(0.82±0.04)比(1.12±0.03)，72 h为(1.07±0.10)比(2.10±0.10)，96 h为(2.53±0.20)比(3.01±0.43)，细胞增殖能力呈下降趋势，差异有统计学意义( P<0.05)；而与sh-NC相比，当转染sh-NOX4 2 #、sh-NOX4 3 #，24 h吸光度分别为(0.32±0.02)、(0.31±0.02)、(0.30±0.01)，48 h为(0.77±0.02)、(0.64±0.04)、(0.37±0.04)，72 h为(1.94±0.05)、( 1.69±0.03)、(1.24±0.08)，96 h为(2.33±0.11)、( 2.11±0.05)、(2.01±0.01)，细胞增殖能力有显著提高，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:NTDs中异常高表达的NOX4能够通过降低增殖相关蛋白PCNA的表达，抑制细胞增殖，导致小鼠神经管闭合异常。

目的:以内质网应激(ERS)为切入点，深入研究全反式维甲酸(ATRA)调控FLT3-ITD突变蛋白表达下降，导致FLT3-ITD突变阳性白血病细胞凋亡的分子机制。方法:ATRA处理FLT3-ITD突变阳性白血病细胞株(MV4-11和MOLM13)，流式细胞术检测细胞凋亡，实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测细胞ERS相关和(或)自噬相关基因及蛋白的表达。结果:低剂量ATRA可提高FLT3-ITD突变阳性白血病细胞的ERS水平；ATRA作用于ERS相关的PERK/eif2ɑ信号通路，使FLT3-ITD突变阳性细胞的ERS水平持续升高，CHOP基因表达上调；FLT3-ITD突变阳性细胞经ATRA处理后，FLT3-ITD蛋白表达水平降低；细胞内与ERS有关的并且主要的两个蛋白降解途径中，与内质网关联降解(ERAD)相关的蛋白ATF6表达无明显变化，而与内质网激活自噬(ERAA)相关的自噬相关蛋白Atg5和Atg7表达明显升高。结论:ATRA通过激活PERK/eif2ɑ信号通路持续上调FLT3-ITD突变阳性细胞的ERS水平，通过ERAA途径自噬降解FLT3-ITD蛋白，促进白血病细胞凋亡。研究结果为临床应用ATRA治疗难治性FLT3-ITD突变阳性白血病提供了初步实验依据。

目的:建立可诱导表达骨形态发生蛋白质4(bone morphogenetic protein 4，BMP4)的正常来源及隐睾特异性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，iPSCs)，比较两者体外定向分化的差异，为研究部分隐睾患儿成年后不育的原因提供具有人类遗传背景的体外研究模型。方法:①建立可诱导表达BMP4的正常来源及隐睾特异性iPSCs，将正常来源iPSCs作为对照组，隐睾特异性iPSCs作为隐睾组；利用多西环素(doxycycline，Dox)进行诱导，筛选出BMP4表达量最高的细胞株；②将外源性添加BMP4的正常来源iPSCs作为外源性添加BMP4组(外源组)，将Dox内源诱导BMP4表达的正常来源iPSCs作为Dox内源诱导BMP4表达组(内源组)，此两组共同作为实验组；在细胞形态和基因表达水平比较实验组两组间BMP4因子诱导效果的差异；③通过Dox诱导BMP4的表达、双氢睾酮(dihydrotestosterone，DHT)、全反式维甲酸(all trans retinoid acid，ATRA)组成的三步法诱导分化方案，逐步诱导人的正常来源及隐睾特异性iPSCs向生精细胞方向分化，在基因及蛋白水平进行检测，比较两株细胞在分化过程中的差异。结果:①经Dox诱导后，在正常来源及隐睾特异性iPSCs两株细胞中均可检测到BMP4表达明显升高、同时多能性基因OCT4的表达均呈明显下降趋势，与d0相比差异具有统计学意义，其中对照组的3#细胞株与隐睾组的5#细胞株在Dox诱导后BMP4表达量最高；②与外源组相比，内源组的细胞株形态变化更为均一、同步，BMP4的基因表达量更高，两组间的差异具有统计学意义；③在向生精细胞诱导分化过程中，对照组及隐睾组细胞的DAZL和PRDM1的表达量在两组之间的差异均无统计学意义；隐睾组的VASA、SYCP3、ACROSIN和TEKT1的表达量于诱导d14和d21时均明显低于对照组，两组之间的差异具有统计学意义。免疫染色结果显示：DAZL的阳性率在对照组和隐睾组细胞间的差异无统计学意义；隐睾组的VASA和SYCP3的阳性率于诱导d14和d21时均明显低于对照组，ACROSIN的阳性率于诱导d21时明显低于对照组，差异均具有统计学意义。结论:本研究为部分隐睾患儿成年后不育的原因提供了具有人类遗传背景的体外研究模型，为未来的进一步研究奠定了良好基础。

目的:探讨不同治疗方案治疗初诊急性早幼粒细胞白血病（APL）的临床效果和治疗费用。方法:回顾性分析2011年1月至2020年12月靖江市人民医院收治的37例初诊APL患者资料，患者接受不同治疗方案进行诱导治疗及完全缓解（CR）后巩固治疗，其中11例接受全反式维甲酸（ATRA）联合蒽环类药物诱导化疗，缓解后以ATRA联合化疗方案巩固（ATRA+化疗组）；13例接受ATRA联合三氧化二砷（ATO）+蒽环类药物诱导化疗，缓解后以ATRA联合化疗方案巩固（ATRA+ATO+化疗组）；13例接受ATRA联合ATO双诱导治疗，缓解后以ATRA联合ATO巩固（ATRA+ATO双诱导组）。分析3组初诊APL患者的临床疗效和治疗费用。结果:ATRA+化疗组、ATRA+ATO+化疗组和ATRA+ATO双诱导组中获得CR患者分别有10、12、12例，差异无统计学意义（ P>0.05）。3组间血液学、心脏、消化道不良反应和感染发生差异均无统计学意义（均 P>0.05）。ATRA+化疗组、ATRA+ATO+化疗组、ATRA+ATO双诱导组诱导治疗费用分别为（73 755±4 820）元、（74 101±5 097）元、（52 944±4 099）元，巩固治疗费用分别为（26 366±2 497）元、（25 801±2 528）元、（19 674±1 940）元，治疗时间分别为（41±4）d、（39±4）d、（34±3）d，差异均有统计学意义（ F值分别为84.77、31.90、9.62，均 P<0.001）。 结论:ATRA联合ATO进行诱导及巩固的无化疗治疗方案治疗初诊APL患者，在临床疗效无明显差异的情况下，具有成本效益高的优势。