患儿女，8岁，因"间断性餐后呕吐2年，腹痛伴恶心、呕吐3 d"入院。患儿既往中度贫血2年，口服铁剂治疗。入院查体：左上腹可触及一大小约10 cm×5 cm包块，质软，无压痛。实验室检查未见异常，血红蛋白浓度128 g/L。全腹增强CT检查：胃窦部胃壁明显不规则增厚，并累及十二指肠，内壁不光整，浆膜面毛糙，呈不均匀强化(图1)，提示胃窦占位(淋巴瘤可能)并累及十二指肠。电子胃镜检查：胃窦变形，前壁邻近胃角见巨大黏膜下隆起，表面光滑，前壁、小弯黏膜粗糙糜烂及不规则溃疡形成(图2)，胃窦病变向下延伸至十二指肠降部上段，幽门变形，开放差，提示胃窦部病变性质待定(淋巴瘤？)。胃镜活检：黏膜组织重度慢性炎，部分区域黏膜坏死并炎性肉芽组织增生，符合溃疡形成。腹部超声检查：上腹部见巨大混合回声肿块，与胃窦部关系密切，压迫胃小弯处，范围12.9 cm×10.9 cm×6.6 cm，边界尚清，形态不规则，实性部分呈多结节样，未见钙化，肿块内见液性无回声区，呈多囊样改变，透声差，幽门可见开放，十二指肠未见扩张。彩色多普勒血流显像：肿块内可见少量血流信号(图3)；肝、脾未见异常，门静脉因肿块遮挡显示不清。提示上腹部巨大混合性肿块，考虑肿瘤性病变，来源于胃窦可能性大。向患儿监护人告知超声引导下组织学穿刺方案，经其同意行穿刺前超声造影检查，并签署知情同意书，对儿童超声造影应用伦理备案。超声造影检查：经肘静脉注射SonoVue造影剂(Bracco公司)2 ml后立即注射5 ml生理盐水冲洗，肿块2 s开始增强，12 s达峰，后可见缓慢消退，观察至60 s病灶仍可见增强(图4)，呈"快进慢出"样表现。超声引导下经皮胃肿物粗针穿刺：患儿取平卧位，超声引导下选择合适进针路径，避开未增强区域，以18G活检针分别于肿物上缘、中部取材2次，取出组织2条，送病理检查。

四川中医药区域伦理审查委员会已运行6年余.从区域伦理委员会建设经验分享与问题思考的角度出发,介绍了该区域伦理委员会的建设背景、组织框架、人员构成及运行模式,分享了该区域伦理审查委员会的建设成果,梳理了实际运行中出现的问题,并结合现行政策法规进行了原因分析,对区域伦理委员会的下一步发展提出了建议.提出解决好区域伦理委员会的定位、责任、审查程序和职责内容等问题是实现区域伦理委员会可持续发展的关键.

背景:动物实验显示人脐带间充质干细胞移植具有显著的神经保护作用,其移植途径包括经静脉、动脉、腰穿、脑立体定向移植和侧脑室移植多种,均存在不足.目的:探讨通过鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的可行性和有效性.方法:取90只7 d龄SD大鼠(汕头大学医学院实验动物中心提供),随机分3组,每组30只:假手术组分离左颈总动脉后缝合皮肤;模型组采用结扎切断左颈总动脉联合缺氧仓的方法中制备缺氧缺血性脑损伤模型;实验组采用同样方法制备缺氧缺血性脑损伤模型,同时鼻腔滴入绿色荧光蛋白标记的人脐带间充质干细胞.建模后3 d取脑组织,进行尼氏染色、TUNEL染色及免疫荧光染色;建模后14,29 d,水迷宫实验检测大鼠记忆、学习能力,14 d水迷宫实验完成后行脑组织TUNEL染色.动物实验经深圳大学医学部实验动物伦理委员会批准(伦理批准号:2016-121).结果与结论:①尼氏染色:模型组大脑皮质及海马CA1区神经元排列均不规则,尼氏小体数量少;实验组大鼠大脑皮质及海马CA1区神经元排列较模型组规则,尼氏小体数量较多;②TUNEL染色:建模后3,14 d,模型组凋亡细胞数多于假手术组(P<0.05),实验组凋亡细胞数少于模型组(P<0.05);③免疫荧光染色:实验组脑组织中可见绿色标记的人脐带间充质干细胞,主要分布于损伤侧海马及大脑皮质区域,非损伤侧脑组织偶可见绿色标记细胞,未见绿色荧光与GFAP或NSE染色双阳性细胞;④实验组建模后14,29 d的平均逃逸潜伏期均低于模型组(P<0.05);⑤结果表明:经鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤,可减少神经细胞凋亡,改善大鼠记忆学习能力.

背景:前期研究制备的β-磷酸三钙/α-半水硫酸钙复合人工骨材料,具有良好的力学强度与体外降解性能.目的:观察β-磷酸三钙/α-半水硫酸钙复合人工骨在兔胸椎多节段后外侧植骨融合模型中的新骨生成及降解效能.方法:取36只雄性新西兰大白兔(解放军总医院医学实验动物中心提供),去除T4-T8椎体棘上、下关节突关节、双侧椎板和横突皮质,右侧植入β-磷酸三钙/α-半水硫酸钙复合人工骨(实验组),左侧植入自体骨(对照组).处死动物前的第13,3天静脉注射盐酸四环素作荧光标记.术后4,8,12周末取出整段胸椎,进行四环素荧光标记新骨生成形态学观察、钼靶软X射线影像形态学观察与组织学观察.实验经解放军总医院实验动物伦理委员会批准(批准号:201511007).结果与结论:①随着时间的延长,两组植骨材料的新骨矿化沉积率逐渐下降,术后4周末时新生骨矿化沉积最快,实验组术后不同时间点的植骨区新骨矿化沉积率稍慢于对照组,但组间差异无显著性意义(P>0.05);②钼靶软X射线显示,术后4周末,可见到完整的人工骨外形轮廓及人工骨与骨组织之间清晰的界限;术后8周末,人工骨材料的轮廓已经模糊,新生骨长入人工骨材料内部;术后12周末,大部分人工骨已被新生骨爬行替代,仅在植骨区域中心见到少量人工骨残余物质;③Giemsa染色显示,随着时间的延长,实验组复合人工骨逐渐降解并被新骨包绕,至术后12周末已完全降解为细小的碎块状结构;④结果表明,β-磷酸三钙/α-半水硫酸钙复合人工骨用于兔脊柱多节段椎板间融合,具有良好的成骨性能与降解性能.

背景:前期实验构建了羟基磷灰石/β-磷酸三钙/壳聚糖/甲基纤维素三维复合支架材料,发现其具有良好的理化性能和生物相容性.目的:评估可注射性羟基磷灰石/β-磷酸三钙/壳聚糖/甲基纤维素支架复合骨髓间充质干细胞用于兔上颌窦提升的成骨效果.方法:取24只新西兰大白兔(新疆医科大学动物实验中心提供),每只兔均制作4处上颌窦提升区域,其中3处分别植入可注射性羟基磷灰石/β-磷酸三钙/壳聚糖/甲基纤维素支架与骨髓间充质干细胞复合物(实验组)、可注射性羟基磷灰石/β-磷酸三钙/壳聚糖/甲基纤维素支架(对照组1)、羟基磷灰石/β-磷酸三钙骨粉(对照组2),最后一处不植入任何材料,作为空白对照.术后4,8,12周,取上颌窦提升区域标本,分别进行锥形束CT扫描、苏木精-伊红染色与免疫组织学化染色观察.实验经新疆医科大学第一附属医院实验动物伦理委员会审议批准(批准编号IACUC20170706-02).结果与结论:①锥形束CT显示,空白对照组始终无新骨生成,其余3组术后8周时可见新骨生成,且以实验组成骨效果最明显;术后12周时,实验组、对照组1、对照组2成骨效果进一步增强,3组间差异不明显;②苏木精-伊红染色显示,实验组术后8,12周的成骨效果优于对照组1、对照组2(P<0.05);③免疫组织化学染色显示,实验组术后8周的成骨指标骨形态发生蛋白2、血管内皮生长因子表达均强于对照组1、对照组2(P<0.05);术后12周时,3组间两指标表达差异不明显(P>0.05);④结果表明,羟基磷灰石/β-磷酸三钙/壳聚糖/甲基纤维素可注射组织工程骨可促进上颌窦提升区域的骨形成.

背景:研究证实,Wnt/β-catenin信号通路在系统性硬化症的发生发展中起着重要作用,然而有关抑制Wnt/β-catenin抑制患者皮损信号是否改善硬皮病的报道较少.目的:探究抑制Wnt/β-catenin信号通路对硬皮病小鼠皮肤组织纤维化及上皮间质转化的影响.方法:选取雌性BALB/c小鼠24只,购自长沙市天勤生物技术有限公司.实验方案经南华大学动物实验伦理委员会批准.随机将24只BALB/c小鼠均分为3组:对照组背部皮下注射生理盐水;模型组和干预组采用背部注射博来霉素500 mg/L建立硬皮病小鼠模型;干预组同时腹腔注射5 mg/kg的IGC-001(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂),1次/d,连续注射4周.麻醉后取各组小鼠背部注射区皮肤,采用苏木精-伊红和Masson染色,观察皮损组织病理学变化、胶原纤维分布和真皮厚度;采用水解法检测皮损组织羟脯氨酸含量;Western blot检测皮损组织中β-链蛋白(β-catenin)、Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、上皮性钙黏附蛋白、波形蛋白和神经性钙黏附蛋白的表达.结果与结论:①博来霉素连续皮下注射4周后,模型组大鼠注射区域真皮层明显增厚、胶原纤维明显增多;干预组真皮层较模型组明显变薄,胶原纤维明显减少;②与对照组比较,模型组皮损组织中羟脯氨酸含量及Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、神经性钙黏蛋白和β-链蛋白表达量显著增加(均P<0.05),上皮性钙黏附蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,干预组皮损组织中羟脯氨酸含量及Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和神经性钙黏蛋白表达量显著降低(均P<0.05),上皮性钙黏附蛋白表达显著增加(P<0.05),β-链蛋白表达无显著性变化(P>0.05);③结果说明,抑制Wnt/β-catenin信号通路可抑制硬皮病小鼠皮肤组织纤维化,其机制可能与抑制皮肤组织上皮间质转化有关.

背景:在正畸治疗过程中,很多学者认为间断力相比持续力能获得同等甚至更大的牙移动疗效,并可减少牙根吸收等不良反应的发生,然而上述结论多来自体外细胞实验或临床个案观察,尚缺少设计科学合理、规模较大的动物实验.目的:分析持续应力或两种模式间断应力载荷对正畸微种植体骨整合及生物稳定性的影响.方法:取48只Beagle犬(四川大学实验动物中心提供),在下颌骨两侧第一磨牙和第二前磨牙的根间区域各植入1枚微种植体(每只犬共植入4枚微种植体),随机分4组:持续组每个加载周期连续加载应力,间断A组在每个加载周期的最后3 d中断应力,间断B组在每个加载周期的最后7 d中断应力,以未加力组为对照.应力加载方法与周期:通过结扎丝在同侧2个微种植体安装镍钛螺旋拉簧,实施加载力;设置1个加载周期为2周,共加载4个周期.加载2,4,6,8周后,获取各组下颌骨组织,进行显微CT、组织学观察和力学拉拔测试.实验方案经过四川大学实验动物伦理委员会批准.结果与结论:①未加力组加载不同时间点的峰值拉拔力均高于持续组(P<0.05),间断B组加载2,4,6周后的峰值拉拔力均高于持续组(P<0.05),间断A组加载2周后的峰值拉拔力均高于持续组(P<0.05);②显微CT显示相同加载时间点下,未加力组骨整合、骨体积分数、相交表面均高于持续组(P<0.05);间断B组加载2,4,6,8周后的骨整合、骨体积分数高于持续组(P<0.05),加载2,4,6周后的相交表面高于持续组(P<0.05);间断A组加载2,4周后的骨整合高于持续组(P<0.05),加载2,4,6周后的骨体积分数高于持续组(P<0.05),加载2周的相交表面高于持续组(P<0.05);③加载8周后,各组均可见骨重塑现象,骨重塑由好到差的排序依次为:未加力组、间断B组、间断A组、持续组;④结果表明,间断应力相比持续应力加载更有利于微种植体获得良好的稳定性,且7 d/7 d间断加载周期较11 d/3 d方案更能促进骨-微种植体结合.

目的 探讨原发性肝癌(肝癌)患者肝移植术后腹部肝外转移的常规超声及超声造影表现.方法 回顾性分析2008年12月至2018年12月中山大学附属第三医院收治的50例肝癌肝移植术后腹部肝外转移患者临床资料.其中男49例,女1例;平均年龄(51±9)岁.原发病:肝细胞癌49例,胆管细胞癌1例.患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定.采用常规超声和(或)超声造影进行肝移植术后复查,总结肝癌肝移植术后腹部肝外转移灶的常规超声和超声造影声像学特点.结果 超声首次检出时间为17 d～50个月,中位时间7个月.超声首次检出时转移灶直径为0.7～11.1 cm,中位直径2.6 cm.多发性转移灶45例,伴肝内转移35例.转移部位:第一肝门区淋巴结30例,肠系膜淋巴结20例.转移灶形态规则,与周边组织分界清晰36例;病灶之间有融合12例.病灶内部表现为均匀低回声47例,不规则液化坏死区域3例,均无明显钙化.彩色多普勒超声检查病灶内部有彩色血流信号15例.16例同时进行了超声造影检查,病灶不均匀增强13例,其中周边厚环状增强7例,不规则增强5例,不规则带状增强1例.结论 超声检查对肝癌肝移植术后腹部肝外转移可以有效检出,转移灶大部分表现为多发、边界清晰、均匀的低回声团,仅有小部分病灶内可探及彩色血流信号.

背景:纳米羟基磷灰石/胶原复合材料可促进下颌骨缺损的修复,但其作用机制尚不明确.目的:探讨纳米羟基磷灰石/胶原复合材料对家猪下颌骨缺损中血管内皮生长因子的影响.方法:取家猪60只(河北医科大学第一医院医学动物实验中心提供),随机分3组,每组20只:假手术组不做任何处理;模型对照组建立10 mm×5 mm×1 mm下颌骨缺损模型;观察组建立10 mm×5 mm×1 mm下颌骨缺损模型,将纳米羟基磷灰石/胶原复合材料植入骨缺损处.术后12周,取下颌骨缺损部位,分别进行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、X射线检查.实验获得河北医科大学第一医院伦理委员会批准.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,观察组材料中心区部分材料降解,大量代谢旺盛的细胞分散在材料空洞中,周围可见大量骨小梁;模型对照组缺损区域被纤维肉芽组织覆盖,未见明显成骨发生;假手术组下颌骨部位组织排列整齐;观察组新生骨小梁面积大于模型对照组(P<0.05);②X射线显示,模型对照组可见明显缺损部位;观察组缺损面积明显小于模型对照组;③免疫组织化学染色显示,观察组血管内皮生长因子表达高于模型对照组(P<0.05);④结果表明,纳米羟基磷灰石/胶原复合材料可促进猪下颌骨缺损的愈合,提高血管内皮生长因子水平.

背景:经软脊膜下注射腺相关病毒的方法可将病毒局限于以注射点为中心的较小范围内,全身毒副作用小,节省病毒的用量,但目前尚无将此方法应用于脊髓损伤大鼠的相关报道,对损伤部位星形胶质细胞和神经细胞的转染情况尚不明确.目的:探讨通过软脊膜下注射2型腺相关病毒对脊髓损伤部位的星形胶质细胞和神经细胞的转染效果及手术过程的技术要点.方法:实验方案经吉林大学动物实验伦理委员会批准.24只Wistar大鼠随机分为2组:腺相关病毒组和模型组,均使用钳夹法构建脊髓损伤模型.腺相关病毒组经软脊膜下注射60μL病毒溶液;模型组经软脊膜下注射等量5％右旋糖酐溶液.于术后7,14和21 d取脊髓标本,进行免疫荧光染色,观察星形胶质细胞分布情况和2型腺相关病毒转染情况.结果与结论:①经软脊膜下注射病毒后,病毒溶液最终均匀分布于损伤部位上下约1 cm的范围内;②术后7,14 d仅有微量绿色荧光蛋白在脊髓损伤区域表达,直至术后21 d,在脊髓损伤空洞周围可见有大量反应性星形胶质细胞,其在脊髓空洞周边部表达最为强烈,出现明显的胶质界膜;同时发现,2型腺相关病毒可稳定转染星形胶质细胞和神经细胞,其中星形胶质细胞集中分布于脊髓空洞周边部,而神经细胞散在分布于病毒转染范围内,注射范围以外正常组织仅见微量2型腺相关病毒转染;③该方法具有能将病毒局限于损伤部位,可靶向性转染星形胶质细胞和神经细胞,具有注射量病毒量低,全身毒副作用小,成本节约等优点.