目的:探讨参芪蛭龙汤对膜性肾病小鼠肾小球足细胞凋亡的影响.方法:制备阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA),复制膜性肾病小鼠模型.将40 只模型小鼠随机分为模型组、参芪蛭龙汤高、低剂量组和雷公藤多苷片组,另取10 只正常小鼠作为正常组.连续给药4 周后,处死小鼠,HE、Masson、PAS染色观察肾组织病理变化;RT-PCR检测肾组织Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2)、Bax(/BCL2-相关 X蛋白)、Caspase-3(半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶 3)mRNA表达变化;Western blot检测肾组织Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达变化.结果:HE染色发现,与模型组比较,参芪蛭龙汤高剂量组肾小球体积减小,仅有炎性细胞浸润减少;Masson染色可见,与模型组比较,各给药组可见肾小球体积减小,基底膜增厚及组织纤维化减轻;PAS染色可见,各给药组基底膜病变较模型组显著减轻,参芪蛭龙汤高剂量组并未出现明显基底膜增厚等改变.RT-PCR结果显示,与模型组比较,参芪蛭龙汤各组小鼠肾组织Bax、Caspase-3 mRNA表达减少(P＜0.01),Bcl-2 mRNA表达增加(P＜0.01);Western blot结果发现,与模型组比较,参芪蛭龙汤高剂量组小鼠肾组织 Bax、Caspase-3 蛋白表达减少(P＜0.01),Bcl-2 蛋白表达增加(P＜0.01).结论:参芪蛭龙汤能够改善膜性肾病小鼠肾组织病变,抑制肾小球足细胞凋亡.

目的:探讨参芪蛭龙汤对膜性肾病大鼠血清中IL-2、IL-6和TNF-α含量的影响.方法:用尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白(C-BSA)的方法建立膜性肾病大鼠模型.将30只模型大鼠随机分为模型组(等量蒸馏水)、参芪蛭龙汤低剂量组(4 g生药/d)和参芪蛭龙汤高剂量组(4 g生药/d).另取10只正常大鼠作为正常对照组(等量蒸馏水).每天灌胃给药1次,连续给药4周后,腹主动脉取血,观察大鼠血清中IL-2、IL-6和TNF-α含量变化情况;取胸腺和脾脏组织称重,计算内脏指数;透射电子显微镜观察各组大鼠肾脏组织超微结构变化.结果:与模型组比较,参芪蛭龙汤低剂量组大鼠胸腺指数、脾脏指数和血清TNF-α含量呈下降趋势(P>0.05);血清IL-2含量显著升高(P<0.05);血清IL-6含量未见明显变化(P>0.05).参芪蛭龙汤高剂量组大鼠胸腺指数、脾脏指数和血清TNF-α含量显著降低(P<0.05);血清IL-2含量显著升高(P<0.01);血清IL-6含量未见明显变化(P>0.05).与模型组比较,参芪蛭龙汤低剂量组和高剂量组大鼠肾脏组织中肾小球基底膜厚度变薄,电子致密物沉积明显减少.结论:参芪蛭龙汤对膜性肾病大鼠的治疗作用与调节血清中IL-2、TNF-α含量、降低免疫器官重量及指数、改善肾小球超微结构变化有关.

目的:观察参芪蛭龙汤对阳离子牛血清白蛋白致大鼠膜性肾病的药效学作用.方法:40只大鼠,随机分成空白组、模型组、中药低剂量组和高剂量组,每组10只.制作阳离子牛血清白蛋白致大鼠膜性肾病模型6周,连续造模2周后,每日灌胃给药,给药4周后结束灌胃,取材前先留取24 h尿,之后用5％水合氯醛腹腔注射麻醉,腹主动脉取血,观察大鼠血常规、血流变、凝血四项、血糖、血脂、肾功、肝功,尿蛋白的变化.结果:与空白组比较,模型组TP、ALB含量显著下降(P<0.01);尿蛋白定量、TC、TG、HDL-C、PTL、FIB含量明显升高(P<0.01,P<0.05);LDL-C含量未见明显变化(P>0.05).与模型组比较,中药低剂量组TP、ALB、GLU含量呈上升趋势(P>0.05);尿蛋白定量、TG、FIB含量呈下降趋势(P>0.05);TC、PTL含量显著下降(P<0.05);HDL-C和LDL-C含量未见明显变化(P>0.05).与模型组比较,中药高剂量组TP、ALB、GLU含量显著上升(P<0.05);尿蛋白定量、TC、TG、PTL、FIB含量显著下降(P<0.05,P<0.01);HDL-C和LDL-C含量未见明显变化(P>0.05).结论:参芪蛭龙汤具有降低尿蛋白、升高血清总蛋白和白蛋白的作用;改善膜性肾病大鼠高脂高凝状态,升高血糖,无明显肝肾毒副作用.

目的:探讨参芪蛭龙汤联合雷公藤多苷片对膜性肾病(MN)模型大鼠的保护作用及可能机制.方法:采用皮下注射结合尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白+不完全费氏佐剂乳化液的方法复制MN大鼠模型,造模周期为6周.于造模第3周,根据24 h尿蛋白定量(UTP)和体质量将造模大鼠随机分为模型对照组,参芪蛭龙汤低、高剂量组(4、8 g/kg,按生药总量计),雷公藤多苷片组(9 mg/kg)以及参芪蛭龙汤低、高剂量+雷公藤多苷片组(剂量与各单药组相同),每组10只;另取10只未造模的大鼠作为空白对照组.空白对照组大鼠灌胃等体积水,各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续4周.于末次给药前1天,检测各组大鼠24 h UTP;于末次给药后1 h,检测各组大鼠血常规指标[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)计数]、肝功能指标[总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)]、血脂指标[胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]以及葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)含量;采用醋酸铀-柠檬酸铅染色法观察大鼠肾脏超微结构;采用免疫组织化学法检测大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、乙酰肝素酶1(HPA-1)蛋白的表达情况.结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠肾组织中肾小球足突广泛融合或消失,可见微绒毛形成、基底膜重度增厚,上皮下可见大量电子致密物沉积,TGF-β1、HPA-1阳性细胞明显增多;其24 h UTP,PLT计数,TC、TG、HDL-C含量以及TGF-β1、HPA-1阳性细胞百分比均显著升高,RBC计数和TP、ALB含量均显著降低(P<0.05或P<0.01).与模型对照组比较,各给药组上述超微结构变化均有不同程度的改善,TGF-β1、HPA-1阳性细胞均有所减少;其24 h UTP和TGF-β1阳性细胞百分比(参芪蛭龙汤低剂量组除外)、WBC计数(参芪蛭龙汤单用及联用组除外)、PLT计数和TC含量(雷公藤多苷片组除外)、TG含量(参芪蛭龙汤低剂量单用以及与雷公藤多苷片联用组除外)、HPA-1阳性细胞百分比均显示降低,且参芪蛭龙汤高剂量+雷公藤多苷片组TGF-β1阳性细胞百分比以及参芪蛭龙汤低、高剂量+雷公藤多苷片组HPA-1阳性细胞百分比均显著低于雷公藤多苷片组;RBC计数和GLU含量(参芪蛭龙汤低剂量组和雷公藤多苷片组除外)、TP和ALB含量(参芪蛭龙汤低剂量组除外)均显著升高,且参芪蛭龙汤高剂量+雷公藤多苷片组GLU含量显著高于雷公藤多苷片组(P<0.05或P<0.01).结论:参芪蛭龙汤与雷公藤多苷片联用可缓解雷公藤多苷片的骨髓抑制作用,减少MN模型大鼠蛋白尿,并改善其肾脏组织的病理损伤;上述作用可能与其下调肾脏组织中TGF-β1、HPA-1蛋白表达,降低血液中TC、TG含量有关.

目的:探究紫癜性肾炎大鼠在参芪蛭龙汤治疗下炎症反应及临床症状的变化.方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、治疗组、对照组,每组各20只.治疗组大鼠灌胃给予参芪蛭龙汤(4 g生药/kg),模型组与对照组给予同体积蒸馏水.比较各组大鼠的血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、肾组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、尿蛋白定量水平、尿红蛋白计数、肾组织nephrin及podocin蛋白平均光密度、血流动力学情况.结果:模型组与治疗组大鼠的血清IL-2、IL-6水平均低于对照组,且治疗组高于模型组;模型组与治疗组大鼠的血清TNF-α水平、肾组织NO、NOS、尿蛋白定量水平均高于对照组,且治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).模型组与治疗组大鼠的尿红蛋白计数均高于对照组,nephrin及podocin蛋白平均光密度水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组的尿红蛋白计数高于模型组,nephrin及podocin蛋白平均光密度水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).模型组与治疗组大鼠的LVPS、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平均低于对照组,且治疗组高于模型组;模型组与治疗组大鼠的LV-EDP水平均高于对照组,且治疗组低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:紫癜性肾炎大鼠使用参芪蛭龙汤可有效调节血清IL-2、IL-6和TNF-α水平,降低肾组织NO、NOS、尿蛋白定量水平,改善血尿情况,缓解肾炎症反应,稳定血流动力学.

目的:观察参芪蛭龙汤方对膜性肾病(MN)小鼠的治疗作用及可能的机制.方法:通过多次尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白制备MN模型小鼠.造模结束后,依据尿蛋白数值将MN小鼠随机分为模型对照组(等量蒸馏水)、参芪蛭龙汤低剂量组(12 g生药/kg)、参芪蛭龙汤高剂量组(24 g生药/kg)和雷公藤多苷片组(14 mg/kg).另取10只正常小鼠作为空白对照组(等量蒸馏水).连续给药4周,每天灌胃给药1次.给药结束后,收集24 h尿液,测定尿蛋白数值;眼球取血,测定肾功、肝功、血脂及血清IL-6、IL-4、TNF-α含量;HE染色观察肾脏病理变化;免疫组化染色观察肾脏IgG沉积情况;Western-blot法测定肾脏组织ERK1/2和cPLA2蛋白表达;RT-PCR法检测肾脏组织Neph-1、Nephrin及Podocin基因表达.结果:与模型组比较,参芪蛭龙汤组病理变化明显改善;参芪蛭龙汤低、高剂量组可显著降低MN小鼠尿蛋白数值;降低血脂TC及TG水平(P<0.05或P<0.01);升高ALB及TP水平(P<0.05或P<0.01);对CRE、UREA及UA水平无显著影响(P>0.05);降低血清IL-6、IL-4及TNF-α含量(P<0.05或P<0.01);显著下调MN小鼠肾脏组织中p-ERK1/2和p-cPLA2蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01);显著升高肾脏组织Neph1、Nephrin及Podocin mRNA基因表达水平(P<0.01).结论:参芪蛭龙汤对MN小鼠具有较好的治疗作用,作用机制与调节Nephrin-podocin-Neph1受体复合物相关基因表达,保护肾小球滤过屏障;抑制ERK/cPLA2途径的激活,减轻肾小球上皮细胞损伤,从而减少促炎细胞因子分泌有关.