目的:观察蛇草肾炎颗粒对C-BSA膜性肾病小鼠ERK1/2(细胞外调节蛋白激酶)和cPLA2(细胞质磷脂酶A2)信号通路蛋白的影响,探讨蛇草肾炎颗粒对膜性肾病的作用机理.方法:将50只小鼠随机分为正常对照组、模型组、蛇草肾炎颗粒高剂量组(7.8 g/kg)、低剂量组(3.9 g/kg)及洛汀新组(1.26 g/kg).采用小鼠尾静脉注射C-BSA复制膜性肾病模型,造模后各组按照小鼠体质量分别灌胃给药;正常组、模型组灌胃等量生理盐水,每天1次,灌胃28 d.观察各组小鼠24 h尿蛋白定量、血清白蛋白的变化情况;末次给药后,采用Western blotting法检测肾组织ERK1/2、p-ERK1/2、cPLA2、p-cPLA2信号通路蛋白.结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠24 h尿蛋白定量显著升高(P＜0.01);与模型对照组比较,洛汀新组、蛇草肾炎颗粒低、高剂量组小鼠24 h尿蛋白定量均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与正常组比较,模型组小鼠血清白蛋白水平显著降低(P＜0.05);与模型组比较,蛇草肾炎颗粒高、低剂量组血清白蛋白含量均显著升高(P＜0.01).与正常对照组比较,模型组小鼠肾组织ERK1/2和cPLA2磷酸化表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,蛇草肾炎颗粒高、低剂量组肾组织ERK1/2和cP-LA2磷酸化的水平均明显降低(P＜0.05、P＜0.01).结论:蛇草肾炎颗粒能够显著降低膜性肾病小鼠尿蛋白,升高血清白蛋白水平,降低ERK1/2和cPLA2磷酸化蛋白表达是其作用机制之一.

目的 研究膜肾方对膜性肾病大鼠的治疗作用,并分析其与ERK/cPLA2信号通路的相关性.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组和膜肾方组,每组10只.模型组和膜肾方组大鼠尾静脉注射阳离子化牛血清蛋白建立膜性肾病大鼠模型,造模成功后膜肾方组大鼠给予膜肾方灌胃,每日一次,空白对照组、模型组灌服等量生理盐水.4周后留取24h尿液,测定24h尿蛋白定量;大鼠麻醉后腹主动脉取血,全自动生化分析仪测定大鼠血清中肌酐、尿素氮、白蛋白含量;取双肾,留取相应肾组织标本进行光镜、免疫荧光的观察;采用Western blot法检测肾脏中ERK1/2和胞浆型磷脂酶(cPLA2)蛋白磷酸化水平.结果 与对照组比较,模型组血清中Scr、BUN水平明显升高(P＜0.05),血清Alb水平明显降低(P＜0.05),24h尿蛋白定量明显增加(P＜0.05),肾组织中ERK1/2、cPLA2磷酸化蛋白表达显著升高(P＜0.05);与模型组比较,膜肾方显著降低血清中Scr、BUN水平(P＜0.05),升高血清中Alb水平(P＜0.05),减少24h尿蛋白定量(P＜0.05),减少肾组织中ERK1/2和cPLA2磷酸化蛋白表达(P＜0.05);HE染色结果显示膜肾方可以改善膜性肾病大鼠肾脏的病理变化.结论 膜肾方对膜性肾病大鼠发挥明显治疗作用,其作用机制与抑制ERK/cPLA2信号通路激活有关.

目的:观察参芪蛭龙汤方对膜性肾病(MN)小鼠的治疗作用及可能的机制.方法:通过多次尾静脉注射阳离子牛血清白蛋白制备MN模型小鼠.造模结束后,依据尿蛋白数值将MN小鼠随机分为模型对照组(等量蒸馏水)、参芪蛭龙汤低剂量组(12 g生药/kg)、参芪蛭龙汤高剂量组(24 g生药/kg)和雷公藤多苷片组(14 mg/kg).另取10只正常小鼠作为空白对照组(等量蒸馏水).连续给药4周,每天灌胃给药1次.给药结束后,收集24 h尿液,测定尿蛋白数值;眼球取血,测定肾功、肝功、血脂及血清IL-6、IL-4、TNF-α含量;HE染色观察肾脏病理变化;免疫组化染色观察肾脏IgG沉积情况;Western-blot法测定肾脏组织ERK1/2和cPLA2蛋白表达;RT-PCR法检测肾脏组织Neph-1、Nephrin及Podocin基因表达.结果:与模型组比较,参芪蛭龙汤组病理变化明显改善;参芪蛭龙汤低、高剂量组可显著降低MN小鼠尿蛋白数值;降低血脂TC及TG水平(P<0.05或P<0.01);升高ALB及TP水平(P<0.05或P<0.01);对CRE、UREA及UA水平无显著影响(P>0.05);降低血清IL-6、IL-4及TNF-α含量(P<0.05或P<0.01);显著下调MN小鼠肾脏组织中p-ERK1/2和p-cPLA2蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01);显著升高肾脏组织Neph1、Nephrin及Podocin mRNA基因表达水平(P<0.01).结论:参芪蛭龙汤对MN小鼠具有较好的治疗作用,作用机制与调节Nephrin-podocin-Neph1受体复合物相关基因表达,保护肾小球滤过屏障;抑制ERK/cPLA2途径的激活,减轻肾小球上皮细胞损伤,从而减少促炎细胞因子分泌有关.

背景:胞浆型磷脂酶A2(cytosolic phospholipase A2,cPLA2)是治疗脊髓损伤的新型策略和靶标,其受RhoA/Rho kinase及MEK/ERK信号通路的调控.而电针可通过调控RhoA/Rho kinase和MEK/ERK信号通路治疗脊髓损伤.目的:探讨电针调控Rho/ROCK(Rho kinase)及MEK/ERK信号通路对脊髓损伤后cPLA2的影响.方法:90只雌性SD大鼠,随机取72只制备脊髓损伤模型,BBB评分后随机分为脊髓损伤组、电针治疗组、U0126治疗组(ERK阻断剂)和Y27632治疗组(ROCK阻断剂),另18只设为假手术组(只进行椎板咬除,但不进行脊髓撞击).电针治疗组大鼠取大椎、腰阳关以及双侧次髎、足三里进行电针治疗,每天1次,每次20 min,共14次;U0126治疗组和Y27632治疗组分别予以U0126和Y27362隔天1次硬膜下腔注射.治疗结束经BBB评分后处死大鼠,收集脊髓组织,ELISA检测脊髓组织前列腺素E2、血小板活化因子的水平;TUNEL法检测脊髓神经细胞凋亡率;Western blot检测脊髓RhoA、ROCKⅡ、MEK、ERK1/2、p-ERK1/2、cPLA2、p-cPLA2蛋白的表达;qRT-PCR检测脊髓RhoA、ROCKⅡ、MEK、ERK1/2与cPLA2的基因表达.结果 与结论:①与假手术组比较,脊髓损伤组大鼠BBB评分明显下降(P<0.01),脊髓组织细胞凋亡阳性细胞数、前列腺素E2和血小板活化因子水平、p-cPLA2蛋白和cPLA2基因的表达均明显升高(P<0.01);除电针治疗组大鼠cPLA2基因表达降低差异无显著性意义外,各治疗组大鼠上述指标均明显逆转(P<0.01);②与假手术组比较,脊髓损伤组大鼠脊髓组织RhoA及ROCKⅡ蛋白和基因的表达、MEK和ERK1/2基因的表达、MEK和p-ERK1/2蛋白的表达均明显升高(P<0.01),电针治疗组及其他两治疗组大鼠上述指标均明显降低(P<0.01或P<0.05);③结果 说明,电针能下调Rho/ROCK和MEK/ERK信号通路相关因子表达,抑制cPLA2的活性,减少神经细胞凋亡、减轻炎症反应,最终达到治疗脊髓损伤的作用.

基于足细胞的保护作用探讨中医药治疗膜性肾病作用机制的实验研究进展.膜性肾病的主要病理特征表现为肾小球足细胞上皮下免疫复合物沉积及肾小球基底膜和足细胞损伤.中医药可通过下调PI3K/AKT/mTOR、TLR4/NF-κB、ERK/cPLA2、TGF-β1/Smad等足细胞相关信号通路表达,上调AMPK/mTOR足细胞相关信号通路表达,提升Nephrin、Podocin等足细胞相关蛋白的含量及调控足细胞相关凋亡基因(Bcl-2和Bax)的表达从而减轻蛋白尿,降低炎症因子和改善肾功能和脂质代谢,提升血清白蛋白含量,减轻肾脏纤维化和足细胞损伤,进而延缓肾脏病的进展.作者就近五年来中医药基于足细胞的保护作用治疗膜性肾病的基础实验研究进展展开综述,以期对临床膜性肾病的治疗提供参考.