目的:观察长链非编码RNA(lncRNA)叉头框蛋白C1(FOXC1)基因启动子上游转录体(FOXCUT)调控JAK信号在乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测lncRNA FOXCUT在乳腺癌细胞株(MCF-7和MDA-MB-231)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中的表达。体外干扰lncRNA-FOXCUT在乳腺癌细胞MCF-7中表达，利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、伤口愈合法和细胞侵袭实验检测lncRNA FOXCUT对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。同时，用qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤2(bcl-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Janus激酶1(JAK1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达。多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK- q检验。 结果:lncRNA FOXCUT在乳腺癌细胞MCF-7(1.567±0.270， t＝5.086， P<0.01)和MDA-MB-231(1.513±0.387， t＝3.533， P<0.01)中表达明显高于MCF-10A细胞(1.004±0.193)，差异有统计学意义。siRNA-FOXCUT组细胞增殖活力明显低于NC组(48 h时0.790±0.068比0.991±0.165， t＝2.516， P<0.05；72 h时0.928±0.135比1.500±0.311， t＝3.775， P<0.01)，差异有统计学意义。同时，siRNA-FOXCUT组MCF-7细胞的迁移率[(30.163±4.133)%比(79.330±4.952)%， t＝13.200， P<0.01]和侵袭[(101.000±13.115)个比(244.667±18.771)个， t＝10.870， P<0.01]能力均低于NC组，差异有统计学意义。siRNA-FOXCUT组细胞中bcl-2(0.565±0.058比1.075±0.242， t＝3.555， P<0.01)和MMP-9(0.527±0.138比0.982±0.172， t＝3.574， P<0.01)在mRNA和蛋白水平均低于NC组，同时p-JAK1(0.185±0.031比1.095±0.134， t＝11.460， P<0.01)和p-STAT3(0.298±0.029比0.948±0.235， t＝4.755， P<0.01)蛋白表达低于NC组，差异有统计学意义。 结论:lncRNA FOXCUT可能通过JAK1/STAT3途径参与调控乳腺癌的增殖、迁移和侵袭。

目的:研究人结直肠癌中微小RNA(miR)-422a的异常表达与肿瘤生物学特征之间的关系，探讨miR-422a对人结直肠癌细胞系HCT15生长和侵袭能力的调控机制。方法:收集2017年8月至2018年1月在武汉大学中南医院实施结直肠癌手术切除标本65例，收取结直肠癌组织及癌旁组织。采用实时定量反转录聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测组织中miR-422a及叉头框蛋白Q1(FoxQ1)的mRNA表达水平，蛋白质印迹法(Western blot)分析检测组织中FoxQ1的蛋白表达强度。分析miR-422a与结直肠癌肿瘤生物学特征和FoxQ1 mRNA表达水平的相关性。RT-qPCR检测miR-422a在结直肠癌细胞中的表达，并使用miR-422a模拟物转染人结直肠癌HCT15细胞。采用双荧光素酶活性实验验证miR-422a对FoxQ1的靶向作用。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况，Transwell小室法检测细胞侵袭，Western blot法检测FoxQ1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达。结果:结直肠癌组织miR-422a的表达水平低于癌旁组织，差异有统计学意义(1.015±0.123比3.910±0.078， P<0.01)；结直肠癌组织FoxQ1的表达水平高于癌旁组织，差异有统计学意义(2.398±0.195比1.583±0.174， P<0.01)；相关分析显示，FoxQ1表达强度与miR-422a表达水平呈负相关( r＝－0.664， P<0.01)。miR-422a的表达水平与肿瘤大小( P< 0.05)、局部浸润( P< 0.05)、淋巴结转移( P< 0.01)、远处转移( P< 0.01)和TNM分期( P< 0.01)有关。miR-422a在HCT15细胞中表达较低，上调HCT15细胞中miR-422a表达水平后，细胞增殖和侵袭能力均受到抑制，差异有统计学意义( P<0.01)；FoxQ1及Vimentin蛋白表达水平降低，E-cadherin蛋白表达增高。双荧光素酶报告基因结果提示FoxQ1是miR-422a的靶基因。 结论:miR-422a的表达与结直肠癌的恶性程度相关。上调miR-422a的表达靶向FoxQ1抑制结直肠癌细胞的上皮-间充质转化，从而抑制其增殖和侵袭能力。

目的 探讨miR-320a对肝癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制.方法 采用荧光定量PCR检测不同肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、Bel-7402、QGY-7701、QGY-7703和正常肝细胞中HL-7702中miR-320a的表达水平;细胞克隆形成实验和Transwell小室法检测miR-320a对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;Western blot检测细胞上皮一间质转化相关的E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达水平;双荧光素酶报告基因实验、qPCR和Western blot验证miR-320a对叉头框蛋白Q1的靶向作用.采用裸鼠皮下移植瘤实验研究miR-320a通过靶向FOXQ1对HepG2细胞体内成瘤的影响.结果 miR-320a在肝癌细胞中表达下调,过表达miR-320a抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制EMT.MiR-320a通过靶向抑制FOXQ1抑制HepG2细胞在裸鼠体内移植瘤生长,减轻瘤体体积和重量.结论 miR-320a通过靶向抑制FOXQ1抑制肝癌细胞的增殖和侵袭.

目的 探讨血浆转录因子叉头框Q1 基因(FoxQ1)表达水平与肺癌发病风险的关系及其在肺癌预后中价值.方法 收集内蒙古自治区肿瘤医院接受治疗的肺癌患者90 例为肺癌组,同期年龄、性别与肺癌患者相匹配的 90 例健康体检人群为对照组.采集外周血液样本,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆FoxQ1 表达,分析血浆FoxQ1 蛋白表达水平与肺癌发病风险的关系,通过Kaplan-Meier来分析血浆FoxQ1 表达在肺癌预后诊断中的价值.结果 肺癌组血浆FoxQ1 表达水平显著高于对照组(P<0.05),晚期患者(TNM分期Ⅲ和Ⅳ期)血浆FoxQ1 的表达水平显著高于早期患者(TNM分期为Ⅰ和Ⅱ期,P<0.01).以健康人群为参照,与FoxQ1 表达低的个体相比,血浆FoxQ1 表达高的个体肺癌发病风险显著上升(P<0.05).FoxQ1 低表达者中位生存时间显著高于高表达者(P<0.01).结论 血浆FoxQ1 表达水平升高与肺癌发病风险升高显著正相关,FoxQ1 高表达患者预后不良,可用于临床病情评估.

目的 探讨苦碟子总黄酮(total flavonoids of Sowthistleleaf ixeris seedling,TFS)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)大鼠心功能的影响及可能的作用机制.方法 随机选取 15 只大鼠作为假手术组,剩余大鼠通过结扎左冠状动脉前降支建立 MI模型.建模成功后,随机分为模型组、TFS 低剂量组(5 mg·kg-1·d-1)、TFS 高剂量组(10 mg·kg-1·d-1)和辅酶 Q10 组(30 mg·kg-1·d-1),每组15只,假手术组和模型组大鼠每日灌服等体积生理盐水.连续给药28d.计算左心室质量(left ventricular mass,LVM)/体质量(body mass,BM)值;TTC染色观察心肌梗死情况;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE 染色法)观察心肌组织形态学变化;测定血流动力学参数;测定血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌钙蛋白T(troponin T,TnT)的水平和肌酸激酶 MB(creatine kinase MB,CK-MB)的活性;检测心肌组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;检测心肌组织中磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化 AMPK(p-AMPK)、叉头框蛋白 O1(fork head box protein O1,FOXO1)和磷酸化 FOXO1(p-FOXO1)蛋白的相对表达水平.结果 成功构建MI大鼠模型;与假手术组比较,模型组大鼠LVM/BM值升高,左心室收缩压(left ventricular sys-tolic pressure,LVSP)、左心室压最大增率(maximum rate of increase of left ventricular internal pressure,+dp/dtmax)及左心室压最大减率(maximum decrease rate of left ventricular internal pressure,-dp/dtmax)均降低,左心室舒张末期压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)升高(P＜0.05),心肌组织有明显大范围白色梗死灶,心肌细胞连接松散,排列紊乱,间质炎性渗出较多,血清 LDH、TnT水平和CK-MB活性升高,心肌组织中 IL-6、TNF-α和 MDA的含量增加,SOD及 GSH-Px的活性降低,且 p-FOXO1 蛋白的相对表达水平升高,p-AMPK和 FOXO1 蛋白的相对表达水平降低(P＜0.05);与模型组比较,3 个给药组大鼠的 LVM/BM值降低,LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax均升高,LVEDP降低(P＜0.05),心肌梗死面积缩小,病理组织结构逐渐改善,血清 LDH、TnT 水平和 CK-MB 活性降低,心肌组织中 IL-6、TNF-α和 MDA 含量减少,SOD 和 GSH-Px 活性升高,且p-FOXO1蛋白的相对表达水平降低,p-AMPK和 FOXO1 蛋白的相对表达水平升高(P＜0.05),对 MI大鼠心功能的作用效果逐渐增强(P＜0.05).结论 TFS可改善模型大鼠心功能障碍,其作用机制可能与激活 AMPK/FOXO1 轴、提高机体抗氧化应激水平有关.

目的:探讨沉默叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQD基因对胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成的影响及其在转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1,TGF-p1)信号通路中的作用.方法:用FOXQ 1-shRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒(NC-shRNA)感染PANC-1细胞,流式细胞术检测感染率,实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting法检测沉默效果.实验设FOXQ l-shRNA组、NC-shRNA组与空白对照组,用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)进行体外血管生成实验,荧光显微镜下观察细胞血管生成能力.用qPCR、Western blotting法检测VEGF-A、MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平;用TGF-β1(终质量浓度5 ng/ml)诱导FOXQ 1-shRNA组和NC-shRNA组细胞,检测诱导前后细胞体外血管生成能力变化与FOXQ1、VEGF-A、MMP-2表达差异.结果:shRNA慢病毒感染率为90％左右,FOXQ 1-shRNA组PANC-1细胞的体外血管生成数目显著少于NC-shRNA组[(9.33±2.08)vs (28.67±2.52)条,P＜0.05],其VEGF-A、MMP-2表达下调(均P＜0.05).TGF-p1增强各组细胞体外血管生成能力,促进FOXQ1、VEGF-A、MMP-2 mRNA和蛋白的表达水平(均P＜0.05).结论:FOXQ1介导了胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成,其机制可能与VEGF-A和MMP-2的下调有关,且可能受TGF-β1通路的调控.

目的 观察沉默肝癌SMMC-7721细胞中叉头框Q1 (FOXQ1)基因的表达对奥沙利铂敏感性的影响.方法 ①构建靶向FOXQ1基因的shRNA重组慢病毒载体及阴性对照重组慢病毒载体,再筛选最佳的干扰序列.②将细胞分为3组:干扰组(转染FOXQ1-shRNA-1重组慢病毒载体)、阴性对照组(转染阴性对照重组慢病毒载体)及空白对照组(未做任何处理).检测3组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达.③将另一部分细胞分为干扰组、阴性对照组、空白对照组、干扰+奥沙利铂、阴性对照+奥沙利铂组与空白对照+奥沙利铂组,给予相应处理,培养48 h后检测细胞凋亡率.细胞活力实验方法同细胞凋亡率实验.结果 ①FOXQ1-shRNA-1组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达水平均低于FOXQ1-shRNA-2组和FOXQ1-shRNA-3组(p＜0.05),为最佳干扰序列.②干扰组细胞中FOXQ1 mRNA及其蛋白的表达水平均低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05),但阴性对照组和空白对照组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).③不管是在加入OXA条件下,还是在未加入OXA条件下,干扰组细胞的凋亡率均高于阴性对照组与空白对照组(P＜0.05),细胞活力均低于阴性对照组和空白对照组(P＜0.05),但同条件下阴性对照组和空白对照组的细胞凋亡率和细胞活力比较差异均无统计学意义(P＞0.05);在干扰组、阴性对照组和空白对照组中,均是加入OXA组的细胞凋亡率高于未加入OXA组(P＜0.05),加入OXA组的细胞活力低于未加入OXA组(P＜0.05).结论 沉默FOXQ1基因的表达能够有效诱导SMMC-7721细胞的凋亡,并增加其对奥沙利铂的化疗敏感性.

目的 探讨叉头框Q1(FOXQ1)-siRNA对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞侵袭迁移能力的影响及其相关机制.方法 通过LipofectamineTM2000将FOXQ1-siRNA和无意义序列siRNA分别转入TPC-1细胞,分别作为实验组和无义序列组,空白组不给予任何处理.转染成功后,利用qRT-PCR和Western blotting法分别检测FOXQ1 mRNA和蛋白的表达水平,采用Western blotting法检测TPC-1细胞中磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、基质金属蛋白酶7、9(MMP7、MMP9)的表达水平.转染48 h,采用Transwell小室试验观察细胞体外的侵袭、迁移能力.结果 与空白组和无义序列组相比,实验组中FOXQ1 mRNA和蛋白的相对表达水平降低(P均＜0.05);实验组中p-AKT、MMP7及MMP9蛋白的相对表达水平低于空白组和无义序列组(P均＜0.05).转染48 h,实验组中穿过小室膜的细胞数低于空白组和无义序列组(P均＜0.05).结论 FOXQ1-siRNA可抑制TPC-1细胞的侵袭迁移,这一作用可能是通过抑制PI3K/AKT信号通路实现.

[目的]研究直肠癌患者手术前后血清miR-24-3p和叉头框蛋白Q1(FOXQ1)水平变化及其与预后的关系.[方法]选择2011年2月～2014年10月在我院行根治性手术切除的64例直肠癌患者(直肠癌组)作为研究对象,同时期体检健康且无肿瘤家族史的50例正常者(正常组)作为对照,检测直肠癌患者手术前后及正常组血清miR-24-3p和FOXQ1水平,分析血清miR-24-3p和FOXQ1水平与直肠癌患者临床病理特征和3年生存率的关系.[结果]直肠癌组手术前和手术后血清miR-24-3p相对表达量均显著低于正常组(P＜0.05),血清FOXQ1水平均显著高于正常组(P＜0.05),直肠癌患者术后血清miR-24-3p相对表达量显著升高,血清FOXQ1水平显著降低;直肠癌患者术后半年内复发患者血清miR-24-3p相对表达量显著低于未复发患者(P＜0.05),血清FOXQ1水平显著高于未复发患者(P＜0.05).血清miR-24-3p表达水平与直肠癌患者TNM分期、浸润程度及淋巴结转移有关(P＜0.05),血清FOXQ1水平与直肠癌患者肿瘤大小、TNM分期、浸润程度及淋巴结转移有关(P＜0.05);直肠癌组患者血清miR-24-3p和FOXQ1表达水平呈显著负相关关系(r=-0.762,P=0.000);术后血清miR-24-3p升高率＞48.15％患者3年生存率显著高于升高率＜48.15％患者(P＜0.05),血清FOXQ1降低率＞33.69％患者3年生存率显著高于降低率＜33.69％患者(P＜0.05);FOXQ1表达水平是影响直肠癌患者预后的危险因素,而miR-24-3p表达水平是直肠癌患者预后的保护因素.[结论]直肠癌患者术后血清miR-24-3p水平显著升高,FOXQ1水平显著降低,其升高或降低程度与患者远期预后密切相关.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中叉头框蛋白P1(FOXP1)、叉头框蛋白Q1(FOXQ1)的表达情况,并分析其表达与NSCLC患者临床病理参数及预后的关系.方法 选取自2012年1月至2015年12月解放军171医院收治的132例NSCLC患者为研究对象.通过免疫组化法检测患者手术切除的癌组织及癌旁正常组织中FOXP1、FOXQ1蛋白的阳性表达率,分析FOXP1、FOXQ1在NSCLC组织中的表达与患者临床病理参数、预后的关系.结果 FOXP1、FOXQ1在NSCLC组织中的阳性表达率显著高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05).FOXP1与FOXQ1的阳性表达率与患者年龄、吸烟史、组织分化程度及肿瘤大小均无相关性(P>0.05),而与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移均有显著相关性(P<0.05).FOXP1的表达与患者性别、肿瘤病理类型有相关性(P<0.05).FOXP1与FOXQ1的表达呈负相关(γs=-0.768,P<0.05).NSCLC癌组织中,FOXP1阴性表达组的存活率著低于阳性表达组,平均存活时间显著短于阳性表达组,差异均有统计学意义(P<0.05).FOXQ1阴性表达组的存活率显著高于阳性表达组,平均存活时间显著长于阳性表达组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 FOXP1、FOXQ1参与了NSCLC的发生与发展,有望成为检测NSCLC的肿瘤标记物.