目的:观察脉络膜黑色素瘤（CM）患者的临床及病理学特点。方法:回顾性病例研究。2011年至2021年于苏州大学附属第二医院病理科收检并经病理检查确诊的CM患者15例15只眼的石蜡标本纳入研究。通过医院信息系统回顾性收集患者年龄、性别、临床表现、治疗方案、病理检查结果等。分析其临床特点、免疫组织化学（免疫组化）染色、分子病理学特点。结果:15例患者中，男性8例，女性7例；平均年龄61岁；均为单眼发病。主述视力下降、视物模糊、眼前黑影遮挡感8例；眼红、流泪、脓性分泌物1例；视力丧失、无光感2例；伴视网膜脱离4例。肿瘤平均直径1.4 cm。肿瘤大体外观呈半球形、"蘑菇形"或扁平弥漫形。肿瘤细胞多呈实性、片状、交叉簇状排列，部分围绕血管呈假"菊形"团样排列伴坏死。15只眼中，梭形细胞型、上皮样型、混合细胞型分别为6、2、7只眼。胞质部分嗜双色或嗜酸性，部分透明，部分富含色素；细胞黏附性差，异形性显著，染色质粗糙，核分裂象多见，核仁明显。免疫组化染色结果显示，所有患眼肿瘤组织中HMB45、SOX10、S100、Melan-A均为阳性；上皮源性标记AE1/3、淋巴源性标记LCA以及神经内分泌标记CgA、Syn均为阴性。基因检测结果显示，所有患者均未发现 C-KIT、 BRAF、 NRAS基因突变。随访时间为8~ 98个月。15例患者中，生存12例；肿瘤复发和（或）转移死亡3例。 结论:CM临床无特异性表现，确诊依赖组织学形态及免疫组化染色。

菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体,对生态环境有重大的意义.外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化,本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑(Laccaria bicolor)为研究对象,选择细胞核中的核小体蛋白H2B基因为目的基因,以pCEBN为表达载体,融合红色荧光蛋白,最终构建在真菌中表达的双元载体,使用根瘤农杆菌介导转化法转化双色蜡蘑菌丝,随后利用PCR对真菌转化子进行验证后,通过激光共聚焦显微镜观察到菌丝细胞核中的红色荧光,成功将融合荧光蛋白转化菌根真菌,为后续研究菌根真菌中基因的亚细胞定位提供了实验平台.结果表明,利用双元载体和农杆菌转化方法,建立了高效的双色蜡蘑转化体系(93.33％),在激光共聚焦显微镜下观察到菌丝细胞核中红色荧光信号,验证了融合荧光蛋白在双色蜡蘑中的成功表达.本研究成功地构建了菌根真菌中的核小体蛋白和红色荧光蛋白融合表达的真菌转化体系.

目的 克隆猪苓Polyporus umbellatus菌核无机磷酸盐转运蛋白基因并进行生物信息学和表达模式分析.方法 采用RT-PCR技术从猪苓菌核中克隆得到1个无机磷酸盐转运蛋白(inorganic phosphate transporter)基因,利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域、信号肽和跨膜结构等分子特性;采用Clustal W2以及MEGA 6.0分别进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;实时荧光定量PCR分析基因表达模式.结果 猪苓无机磷酸盐转运蛋白基因命名为PuPiT (NCBI登录号:KU179154).该基因开放读码框全长为1 590 bp,编码530个氨基酸.PuPiT蛋白相对分子质量为57 552,等电点6.82.氨基酸序列分析表明,PuPiT蛋白具有12个跨膜区.氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示PuPiT与Moniliophthora rorer亲缘关系最近,与Moniliophthora roreri、双色蜡蘑Laccaria bicolor、Heterobasidion irregulare有较高的同源性,荧光定量PCR结果表明,PuPiT在与蜜环菌共生的猪苓菌核及未与蜜环菌共生的菌核中都有表达,其中共生部分的表达量显著上调,约是未共生部位的12倍,说明其参与猪苓与蜜环菌共生过程.结论 PuPiT基因克隆和分子特征为进一步研究揭示其在猪苓菌核磷元素转运及与蜜环菌共生过程中的调控作用奠定基础.

为研究双色蜡蘑(Laccariabicolor)对黑松(Pinus thunbergii)幼苗生长及其根系形态的影响,在营养杯培育条件下,用双色蜡蘑液体菌剂对黑松幼苗进行接种处理,接种第15 、30 、60 、90 、120天时取样,比较接种和未接种黑松幼苗的生物量、根系形态及根系分形维数的差异.结果表明:双色蜡蘑在黑松幼苗地上植株、地下根系的生长及其生物量的积累方面都表现出明显的促进作用.接种双色蜡蘑也显著改善了根系总长度、分支数、表面积、体积等参数和根系分形维数,并对地下根系生长的促进作用时间早于地上部分,且效应显著高于地上部分.接种双色蜡蘑第15～30天时对地上部分基本无影响,但对根系促进作用明显,而地上部分在第60天时开始表现出显著的生长效应.研究发现,双色蜡蘑能够成功定殖于黑松根部,促进黑松幼苗生长及其生物量的积累,同时显著促进根系总长度、分支数、表面积和体积增加,并使根系分形维数增大,表现出明显的促生作用,且对根系发育的显著促进作用早于地上部分.

杨树(Populus)是重要造林树种,也是研究林木基础生物学性状的模式材料.不仅如此,杨树可与多种细菌(内生细菌、内生固氮菌和根际促生菌)和真菌(外生菌根真菌、丛枝菌根真菌和内生真菌)类群建立共生关系,为揭示树木和微生物之间的互惠共生机制提供了理想模型.这些共生菌能积极调控林木生长发育、营养吸收和生理生态过程.目前在杨树-双色蜡蘑(Laccaria bicolor)形成的外生菌根发育、提高杨树耐盐、耐重金属的生理与分子机制、叶片内生真菌群落结构与病害发生、菌根辅助细菌和菌丝内共生细菌-真菌-杨树形成的三重跨界共生等方面取得多项突破.近年来,一批模式草本植物微生物组(microbiome)计划相继实施,对共生菌群落结构和功能的认识有了革命性的进步.以美洲黑杨、毛果杨和胶杨为代表的林木微生物组研究也已启动,表明宿主基因型和环境因子可显著影响共生菌群落结构与物种组成;在根际(rhizosphere)和内生(endosphere)环境存在结构和功能迥异的菌群.另一方面,以根系为诱饵,通过宿主表型来推测菌群功能的反向“钓鱼”策略将推动林木根际微生物工程研究,为揭示杨树-微生物群落的相互关系、菌群进化搭建了研究模型.总之,深入认识多元微生物对林木表型和生理代谢的表观遗传学调控机制将为今后创制新型菌剂并用于高效育苗和抗性育种提供新的思路,具有重要的科学意义和应用价值.

金针菇栽培通过提高栽培室CQ2浓度来抑制菌盖生长,提高商品质量.碳酸酐酶能调节CQ2/HCQ3-在细胞内的平衡,它可能是响应CQ2胁迫的关键酶.本研究利用我们已完成的金针菇Flammulina filiformis的基因组测序数据,以双色蜡蘑碳酸酐酶家族基因为参照,通过本地BLAST,得到7个金针菇碳酸酐酶家族的基因,分别命名为CA-1、CA-2、CA-3、CA-4、CA-5、CA-6、CA-7.基因结构、保守结构域和系统进化分析结果均支持这7个序列是碳酸酐酶家族的编码基因.高浓度CQ2胁迫处理金针菇子实体12h,CA-1、CA-2表达量与CQ2浓度正相关,CA-5负相关,CA-3、CA-4和CA-6没有响应,CA-7无明显规律.据此推测,CA-1、CA-2和CA-5可能是金针菇响应CQ2胁迫的关键基因之一,参与调控菌盖生长发育.