目的:探讨血清可溶性细胞核因子κB受体活化因子配体（soluble receptor activator of nuclear factor-κB ligand，sRANKL）、网膜素-1（Omentin-1）水平与绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis，PMOP）的关联。方法:选取2017年6月至2021年7月青岛市市立医院收治的310例绝经患者，其中PMOP患者165例，其余145例单纯绝经妇女作为对照组。采用ELISA检测患者血清sRANKL、Omentin-1水平；比较两组患者骨密度和骨代谢指标[Ⅰ型前胶原氨基末端前肽（N-terminal propeptide of typeⅠ precollagen，PINP）、骨碱性磷酸酶（bone alkaline phosphate，BALP）、β-Ⅰ型胶原C端肽（β isomer of the C-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen，β-CTX）和骨钙素（osteocalcin，OC）]。采用Pearson分析PMOP组血清sRANKL、Omentin-1水平与骨密度、骨代谢指标的相关性。ROC曲线分析sRANKL、Omentin-1对PMOP的预测价值；Logistic回归分析多因素对PMOP的影响。结果:与对照组（15.62±4.41）（42.56±8.53）比较，PMOP组血清sRANKL水平（26.63±8.12）升高，Omentin-1水平（32.32±5.52）降低（ t=14.55， P<0.001； t=12.69， P<0.001）。经Pearson法分析，PMOP组血清sRANKL与PINP、β-CTX、OC呈正相关，血清Omentin-1水平与上述指标呈负相关。ROC曲线显示血清sRANKL、Omentin-1对预测PMOP有重要的参考意义。Logistic回归提示sRANKL升高和Omentin-1降低是PMOP的危险因素。 结论:PMOP患者血清sRANKL、Omentin-1与骨密度、骨代谢指标有相关性，有作为PMOP诊断靶点的潜力。

目的 探讨血清护骨素(osteoprotegerin,OPG)、可溶性细胞核因子κB受体活化因子配体(soluble Receptor Activator ofNuclear Factor-κB Ligand,sRANKL)及尿足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)在2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的鉴别诊断价值.方法 收集2型糖尿病(T2DM)患者126例,并按照Mogensen分期标准将患者分为糖尿病无肾病(DM)组、糖尿病早期肾病(早期DN)组和糖尿病临床肾病(临床DN)组,另收集33例健康者作为健康人对照组;ELISA法测定各组血清OPG、sRANKL和尿PCX水平并进行统计学分析;Logistic回归分析DN患者的危险因素,ROC曲线评估3个指标对DN鉴别诊断的效能.结果 OPG、sRANKL及PCX水平在各组间的差异均有统计学意义(F分别为5.890,4.571,7.633,P均＜0.05),组间两两比较结果显示,早期DN组OPG、sRANKL及PCX的表达水平均高于DM组(t分别为3.761,7.420,12.050,P均＜0.05);三者在临床DN组中的表达水平亦高于DM组(t分别为4.580,5.292,1 1.973,p均＜0.05).Logistic回归分析显示,PCX是DN发生的独立危险因素(OR=3.615,95％CI:1.413 ～ 9.245).ROC曲线分析结果显示OPG、sRANKL和PCX联合检测鉴别诊断DN的敏感性(94.7％)明显高于各单项检测(分别为79.2％,81.0％,89.2％).结论 OPG、sRANKL及PCX水平是DN鉴别诊断的敏感指标,联合检测对临床鉴别诊断DN具有重要价值.

目的:探究知母皂苷BⅡ(TBⅡ)对破骨细胞分化过程中核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL),RANK,原癌基因(C-FOS)基因表达量的影响.方法:利用分子对接软件LeDock对TBⅡ分别与RANKL,RANK和C-FOS进行分子对接 打分.RAW264.7细给予可溶性RANKL(sRANKL)干预,设立空白组,sRANKL组(模型组),淫羊藿苷(Ica)组,TBⅡ低剂量组(2μmol·L-1),TBⅡ中剂量组(4μmol·L.1),TBⅡ高剂量组(8.μmol·L-1).相应试剂盒检测破骨细胞分化的标志性酶(TRAP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测C-FOS,与其上游RANKL/RANK和下游活化T细胞核因子胞质1型(NFATC1)表达量,以及骨保护素OPG的表达量.结果:分子对接打分结果分别为-11.86,-11.38,-12.34 kcal·mol-1,TBⅡ能够与RANKL,RANK和C-FOS结合.与正常组比较,模型组TRAP含量显著升高(JP＜0.01);与模型组比较,各给药组显著降低TRAP含量(P＜0.01),且TBⅡ呈剂量依赖性降低TRAP含量.与正常组比较,模型组RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1表达量显著升高(P＜0.01),OPG表达量显著降低(P＜0.01);与模型组比较,各给药组显著降低RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1表达量(P＜0.01),显著升高OPG表达量(JP＜0.01).结论:TBⅡ可能通过调控RANKL/RANK/C-FOS信号通路,抑制破骨细胞前体细胞向破骨细胞的分化,抑制破骨细胞活性,减少骨吸收,改善骨质疏松.

骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCTB)是一种好发于长骨干骺端的局部侵袭性生长的原发性骨肿瘤,是交界性肿瘤,极少发生转移,但有恶变可能,常会导致严重骨质破坏,治疗难点是手术后极易复发.细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)是蚀骨细胞初成、发挥功能所必需的跨膜及可溶性蛋白.RANKL过表达引发骨质溶解破坏,导致GCTB瘤体逐步膨胀性、局部侵袭性生长.

目的:探讨吴茱萸碱对破骨细胞分化与骨吸收功能的调控及对骨质疏松症的治疗作用。方法:取小鼠原代骨髓来源巨噬细胞分别给予0、10、20、50、100、200 μmol/L吴茱萸碱处理，CCK8检测细胞活力；然后利用原代骨髓来源巨噬细胞给予小鼠重组可溶性核因子κB受体活化因子配体与集落刺激因子行破骨细胞分化诱导，分别给予20与50 μmol/L吴茱萸碱干预。抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨细胞形成能力，荧光定量PCR分析破骨细胞分化相关基因表达，免疫荧光检测F肌动蛋白（F-actin）形成，扫描电镜观察破骨细胞骨吸收能力。7月龄C57BL/6小鼠灌胃给予100与200 mg/kg吴茱萸碱，给药3个月后Micro-CT检测小鼠骨密度与骨质量。采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果:CCK8结果显示，与对照组相比，给予10、20、50、100 μmol/L吴茱萸碱处理后细胞活力无明显变化，差异无统计学意义（P > 0.05）；而给予200 μmol/L吴茱萸碱的细胞活力下降（100.64±0.18比47.54±5.58），差异具有统计学意义（P < 0.01）。与对照组相比，20 μmol/L吴茱萸碱的TRAP染色阳性细胞数[（200.57±28.35）比（142.29±19.21）个]、Trap （1.00±0.13比0.55±0.16）、组织蛋白酶K（Ctsk） （1.01±0.17比0.59±0.11）mRNA水平、骨吸收面积比（1.00±0.15比0.79±0.19）均减少，差异有统计学意义（P < 0.05）。与对照组相比，50 μmol/L吴茱萸碱的TRAP阳性细胞数[（200.57±28.35）比（112.71±12.18）个]、Trap （1.00±0.13比0.46±0.17）、Ctsk（1.01±0.17比0.49±0.12）、树突状细胞-特异性跨膜蛋白（DC- Stamp） （1.00±0.10比0.55±0.14）、c-Fos （1.01±0.10比0.58±0.14）、活化T细胞核因子c1 （Nfatc1） （1.00±0.10比0.59±0.14）、H+转运ATP酶v0亚基d2 （Atp6v0d2）的mRNA表达（1.00±0.10比0.59±0.18）、F-actin数量[（165.00± 18.50）比（98.33±21.15）个]和骨吸收面积比（1.00±0.15比0.62±0.10）均降低，差异有统计学意义（P < 0.05）。Micro-CT结果显示，与生理盐水组相比，100 mg/kg吴茱萸碱组小鼠骨密度有一定升高[（0.19±0.03）比（0.21±0.01）g/cm3]，但差异无统计学意义（P > 0.05）；与生理盐水组相比，200 mg/kg吴茱萸碱组小鼠胫骨的骨密度[（0.19±0.03）比（0.23±0.01）g/cm3]、骨体积比[（9.79±1.39）﹪比（11.62±1.18）﹪]、骨小梁数量[（2.43±0.29）比（3.08±0.43）/mm]上升，骨小梁分离度[（0.44±0.06）比（0.27±0.05）mm]下降，差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论:吴茱萸碱通过抑制破骨细胞分化与骨吸收功能延缓小鼠骨量丢失。

目的 研究成骨生长肽(OGP)对体外培养的来源于绝经后骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞的成骨和成脂肪分化能力的影响,探讨OGP治疗绝经后骨质疏松症的作用机制.方法 分离培养绝经后骨质疏松患者的骨髓间充质干细胞(BMSCs),按照加入OGP浓度的不同分别分为A组(健康成人)、B组(患者)、C组(10-7 mol/L OGP)、D组(10-9 mol/L OGP)、E组(10-11 mol/L OGP),倒置相差显微镜观察各组细胞的生长情况和形态特征,MTT法测量细胞增殖率的变化,RT-PCR定量检测成骨标记物[碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原(COL-1)、骨钙素(OC)]及成脂肪标记物[脂蛋白脂酶(LPL),脂肪细胞结合蛋白-2(AP-2),瘦素(Leptin)]及骨保护素(OPG)、可溶性细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的mRNA含量,Western blot定量检测成骨标记物、成脂肪标记物及OPG、RANKL的蛋白表达.结果 与A组比较,B组成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量较低(P＜0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量较高(P＜0.05).与B组比较,加入不同浓度的OGP后,C、D、E组的成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量显著上升(P＜0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量显著下降(P＜0.05);与C组相比,D、E两组成骨标记物、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达量显著上升(P＜0.05),成脂肪标记物mRNA和蛋白表达量显著下降(P＜0.05),E组上述指标与D组及A组之间无显著性差异(P＞0.05).结论 相比较加入10-7、10-11 mol/L OGP,加入10-9mol/L OGP对绝经后骨质疏松患者的BMSCs的改善效果最佳,能够促进BMSCs增殖,向成骨方向分化,并抑制向成脂肪方向的分化,进而促进骨-脂肪平衡.