目的:分析广东省50家医院血液内科血标本来源细菌的构成和耐药性，了解血液内科血流感染（BSI）的流行病学特征。方法:基于国家细菌耐药监测网（CARSS）平台，对2019年广东省50家医院血液内科、呼吸内科和ICU由血标本分离的病原菌分布和碳青霉烯类耐药革兰阴性菌（CRO）检出率进行分析，同时对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌药敏特征分儿童组（≤14岁）和成人组（>14岁）进行分析。参考CLSI 2019年M100文件标准判断结果。结果:共收集广东省50家医疗机构（三级医院48家）血液内科、呼吸内科、重症监护治疗病房（ICU）三个科室各1618、1026、3626株血标本分离菌完整微生物信息资料。其中血液内科革兰阴性杆菌占71.8%，革兰阳性球菌占28.2%。血液内科分离前5位细菌是：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、凝固酶阴性葡萄球菌和草绿色链球菌群。葡萄球菌属中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRSCN）的检出率分别为19.7%和80.6%，未发现对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁耐药的菌株，无利奈唑胺耐药的肠球菌。草绿色链球菌群对青霉素G的耐药率为6.9%，对头孢曲松和头孢噻肟耐药率均超过25.0%。肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童组耐药率普遍高于成人组。成人组肺炎克雷伯菌对美罗培南耐药率为14.1%，阴沟肠杆菌对碳青霉烯类耐药率超过25.0%，非发酵菌中铜绿假单胞菌对大部分抗菌药物敏感性超过80.0%，但儿童组对美罗培南的耐药率高于成人组（11.8%对6.5%）。鲍曼不动杆菌无对替加环素耐药菌株。科室之间比较，ICU和呼吸内科血标本革兰阳性球菌比例高于血液内科。呼吸内科碳青霉烯类耐药大肠埃希菌（CREC）和碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）检出率最低，分别为0.3%和3.7%。血液内科碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌（CRPA）和碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）检出率最低，分别为8.3%和25.8%。ICU整体碳青霉烯类耐药的革兰阴性杆菌检出率都最高。结论:血液内科血标本来源细菌构成比与重要细菌耐药性与呼吸内科、ICU存在差异，广东地区血液内科肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌及以草绿色链球菌群为主的链球菌属比例明显高于ICU和呼吸内科。

目的:监测2018年我国引起院内感染的主要病原菌的病原谱分布和对主要抗菌药物的敏感性。方法:回顾性收集来自全国11家教学医院的引起院内血流感染（BSI）、院内获得性肺炎（HAP）和院内腹腔感染（IAI）的病原菌。菌株经中心实验室复核后，对临床常见菌株进行抗菌药物药敏实验，采用琼脂稀释法或微量肉汤稀释法测定菌株的最低抑菌浓度（MIC），药敏折点采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）2019年M100S（第29版）标准。数据分析采用WHONET-5.6软件。结果:共收集1 590例病例，包括BSI 831例，HAP 450例，IAI 309例。BSI最主要的致病菌是大肠埃希菌（29.2%，243/831）、肺炎克雷伯菌（16.2%，135/831）和金黄色葡萄球菌（10.1%，84/831）；IAI最主要的致病菌是大肠埃希菌（26.2%，81/309）、屎肠球菌（15.5%，48/309）和肺炎克雷伯菌（13.3%，41/309）；而HAP最主要致病菌是鲍曼不动杆菌（24.7%，111/450）、铜绿假单胞菌（20.7%，93/450）和肺炎克雷伯菌（16.2%，73/450）。金黄色葡萄球菌对替加环素、利奈唑胺、达托霉素和糖肽类抗生素均表现为敏感，对头孢洛林的敏感率为77.8%（105/135）。甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）的发生率为29.6%（40/135），低于甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的发生率（83.7%，41/49）。发现1株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁耐药（1.1%，1/95），1株粪肠球菌对利奈唑胺耐药（2.3%，1/43）。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶的发生率分别为56.1%（193/344）和22.1%（55/249），碳青霉烯耐药株的发生率分别为4.1%（14/344）和22.9%（57/249），对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率分别为2.3%（8/344）和2.0%（5/249），对黏菌素的耐药率分别为1.5%（5/344）和7.6%（19/249），均未检出替加环素耐药株。鲍曼不动杆菌除对黏菌素（99.5%，184/185）和替加环素（91.4%，169/185）表现出较高的敏感性，对其他抗菌药物均表现出较高的耐药率，碳青霉烯耐药株的发生率达到78.9%（146/185）。碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌发生率为36.7%（66/180）；黏菌素、阿米卡星和头孢他啶/阿维巴坦对铜绿假单胞菌表现出较强的抗菌活性，敏感率分别为100%（180/180）、93.3%（168/180）和85.6%（154/180）。结论:替加环素、黏菌素和头孢他啶/阿维巴坦对大部分院内感染常见革兰阴性杆菌表现出较强的体外抗菌活性。鲍曼不动杆菌耐药问题严重。碳青霉烯耐药的肠杆菌科细菌发生率继续升高，需要引起关注并进行持续监测。

[背景]植物根际促生菌在促进植物生长、提高植物系统抗性及改善土壤养分状况等方面具有极大的应用潜力.[目的]为微生物菌肥的开发利用提供高效微生物资源.[方法]采用稀释涂布平板法分离烟草根际土壤可培养细菌,利用PVK培养基筛选具强溶无机磷活性的菌株,结合钼锑抗比色法测定菌株溶磷活性;利用Salkowski's比色液检测菌株产吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)活性;以菌株溶磷量和IAA产量为指标,采用单因素试验设计进行发酵条件优化,以得到菌株溶磷活性和产IAA的最佳发酵方案;基于种子促发芽及幼苗促生长试验验证菌株的促生效果;结合形态学、生理生化和 16S rRNA基因序列对菌株进行分类学鉴定.[结果]于烟草根际土壤分离得到 127 个不同分类的菌株,10 个菌株具溶无机磷的能力,其中菌株SH-1464 溶磷活性最强,溶磷圈直径为 16.11 mm,溶磷量为 119.22 mg/L;Salkowski's比色结果表明,菌株具有极强的产IAA活性,为 39.88 μg/mL.单因素试验结果表明,菌株SH-1464 溶磷的最佳碳源为 10 g/L葡萄糖,最佳氮源为 0.5 g/L蛋白胨,最佳无机磷源及其添加量为 2.5 g/L磷酸三钙,最佳初始pH值为 7.5,温度 30℃,转速 200 r/min;菌株SH-1464 产IAA最佳培养条件为:麦芽糖 10 g/L,酵母粉 5 g/L,NH4NO3 10 g/L,氯化钾 2.5 g/L,L-色氨酸 0.1g/L,pH 6.5,温度 30℃,转速 180 r/min.基于单因素试验结果进行优化前后菌株溶磷量及IAA产量对比试验可知,优化后菌株的溶磷量为 225.9 mg/L,提升 84.5%;IAA产量为 75.3 μg/mL,提升 88.8%.促生试验结果表明:菌株SH-1464 处理下番茄种子的发芽率提高 84.5%,株高提高 55.1%,茎围提高 32.5%,根长、根重分别提高 16.4%和 149%,地上部分鲜重和干重分别提高 172.2%和 203.6%.结合形态学和分子生物学鉴定菌株SH-1464 为拟蕈状芽孢杆菌(Bacillus paramycoides,GenBank登录号为ON417365,保藏号为CCTCCM 2022924);此外,菌株还具有产蛋白酶、产纤维素酶、固氮、分泌铁载体的能力.[结论]菌株SH-1464 具有强溶无机磷、固氮、分泌 IAA、产蛋白酶、产纤维素酶及分泌铁载体等能力,可显著提高番茄种子的发芽率,对番茄幼苗株高、茎围、根长、根重、地上部分鲜重和干重等农艺性状具有显著促进作用,可作为高效微生物资源在微生物菌剂的开发利用等方面展现广泛应用前景.

目的 了解2014 2016年某综合医院医院感染情况、病原菌分布及耐药性,为预防与控制医院感染提供依据.方法 采用前瞻性和回顾性调查方法,收集该院2014年1月-2016年12月住院患者的临床资料,对医院感染病原菌分布及其耐药性进行统计分析.结果 2014-2016年共发生医院感染4 750例、5 352例次,医院感染发病率为2.19％,医院感染例次发病率2.46％.三年医院感染发病率分别为2.47％、2.07％和2.05％,呈下降趋势,差异具有统计学意义(x2=36.217,P＜0.01).重症医学科、神经外科、烧伤整形科等科室医院感染发生率较高,以呼吸道、泌尿道、手术部位等为常见医院感染部位.医院感染分离病原菌以革兰阴性菌为主(76.10％).大肠埃希菌对头孢菌素类、氟喹诺酮类药物耐药率较高(＞60％);肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药性较高;铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率呈逐年上升趋势(x2=15.175,P =0.001);鲍曼不动杆菌对检测的抗菌药物耐药率均＞50％.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌占60％左右,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌达80％以上,未分离到对万古霉素、利奈唑胺耐药的葡萄球菌属细菌.结论 该院医院感染常见病原菌对抗菌药物耐药率较高.科学地开展医院感染监测,定期总结分析临床资料,对于指导合理使用抗菌药物,控制多重耐药菌株产生,降低医院感染具有重要的意义.

目的 了解2016年上海市某院临床常见标本中细菌的分布和耐药性变迁,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2016年1-12月上海市宝山区中西医结合医院患者标本分离的细菌,按CLSI M100-S26标准判断结果,采用WHO-NET5.6软件对数据进行统计分析.结果 1 920株非重复分离菌中革兰阴性菌1 385株,占72.14％;革兰阳性菌535株,占27.86％.葡萄球菌属中未发现对万古霉素、利奈唑胺耐药的菌株.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为56.16％和63.41％.屎肠球菌对多数抗菌药物耐药率高于粪肠球菌.发现1株耐万古霉素的屎肠球菌.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为42.06％(106/252)、45.39％(143/315),产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株.鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率达60％以上,铜绿假单胞菌对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶的敏感率分别为68.47％、66.30％、37.70％,并检出流感嗜血杆菌47株,其中对复方磺胺甲噁唑的敏感率为40.43％.ICU分离出的肠杆菌科细菌和非发酵细菌的耐药率均高于非ICU分离细菌;分离的细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药情况较严重.结论 加强细菌耐药率监测,有助于掌握其耐药特点.对临床指导用药的意义非常重要.

目的:分析血培养中病原菌分布及菌株的耐药性,给临床合理用药提供依据.方法:应用Bect/Alert 3D全自动血培养仪对送检血标本进行培养;使用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定及药敏分析系统进行病原菌鉴定及药敏实验,药敏结果按照CLSI 2015年版标准判定.结果:17818例血培养标本中分离出病原菌1857株,检出率为12.06%,其中革兰阳性菌719株、革兰阴性菌986株、厌氧菌39株及真菌113株.革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌为主;革兰阴性菌以大肠埃希菌为主.革兰阳性菌对万古霉素、替加环素和利奈唑胺敏感率为100.00%;革兰阴性菌不同程度的对碳青霉烯类抗生素耐药.病原菌主要分布于肝胆胰外科(31.61%)、重症科246株(13.25%).结论:血培养分离的病原菌种类复杂,革兰阴性菌分离率高于革兰阳性菌,以大肠埃希菌居多.分离菌耐药情况严重.

目的:研究猪圈发酵床分离细菌的系统发育树及生理生化特征.方法:采用R2A培养基对猪发酵床上层垫料进行分离菌株培养,将培养得到的单个菌落培养于固体培养基中,获得纯培养菌株;肉眼观察培养基中细菌的生长情况,电镜下观察细菌的形态、大小和排列特点,采用16S rRNA基因序列扩增、测序,邻接法构建16S rRNA序列的系统发育树,将分离到的猪圈发酵床中的细菌与文献中获知的初期发酵床优势细菌的标准菌株进行生理生化特征的比对.结果:在R2A培养基中分离得到3株细菌SZDIS-1-1、GZDIS-1和SZDIS-2,鉴定为微杆菌属细菌;与文献中获知的4种标准菌株一样,培养得到的3种细菌镜下均为杆状,过氧化氢酶、吲哚试验均为阴性,能够利用麦芽糖作为生长碳源;药敏试验显示,分离得到的3株细菌对阿米卡星、头孢呋辛、利福平、妥布霉素、青霉素和环丙沙星等抗生素比较敏感,其中头孢呋辛抑菌效果最佳.结论:在猪圈发酵床首次分离得到3株菌株,并构建系统发育树.

目的 监测2016年我国引起院内感染的主要病原菌的病原谱分布和对主要抗菌药物的敏感性.方法 回顾性收集来自全国12家教学医院的引起院内血流感染(BSI)、院内获得性肺炎(HAP)和院内获得性腹腔感染(IAI)的病原菌.菌株经中心实验室复核后,对其中重要的临床常见菌株进行了抗菌药物药敏实验,采用琼脂稀释法或微量肉汤稀释法测定菌株的最低抑菌浓度,药敏结果判断采用CLSI 2017年M100S(第27版)标准.数据分析采用WHONET-5.6软件.结果 共收集2060例病例,包括BSI 894例,HAP 630例,IAI 536例.对其中的1896株重要的临床常见菌株进行了抗菌药物药敏实验.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是引起BSI和IAI的最主要的致病菌,而鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌是引起HAP的最主要致病菌.金黄色葡萄球菌对替加环素、利奈唑胺、达托霉素和糖肽类抗生素都表现为敏感.甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的发生率为44.4％(75/169).甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌的发生率为80.9％(72/89).未发现对替加环素、利奈唑胺和达托霉素耐药的肠球菌.万古霉素耐药的肠球菌只在屎肠球菌中发现,占屎肠球菌的1.8％(2/111).替加环素、美罗培南、阿米卡星、亚胺培南、多黏菌素B对肠杆菌科细菌表现出很高的抗菌活性,肠杆菌科细菌对上述药物的敏感率分别为96.6％(865/895)、94.3％(859/911)、94.2％(858/911)、94.1％(857/911)、91.6％(820/895).大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶的发生率为58.4％(263/450)和28.6％(84/294).碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌发生率分别为15.3％(45/294)和1.8％(8/450).多黏菌素B耐药的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌发生率分别为4.1％(12/294)和4.4％(20/450).替加环素耐药的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌发生率分别为2.4％(7/294)和0.2％(1/450).鲍曼不动杆菌除对替加环素(91.4％,235/257)和多黏菌素(100％,257/257)表现出较高的敏感性,对其他抗菌药物均表现出较高的耐药率,碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌发生率达到80.5％(207/257).碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌发生率为31.7％(59/186),多黏菌素B和阿米卡星对铜绿假单胞菌都表现出较强的抗菌活性,敏感率分别为100％(186/186)和90.9％(169/186).结论 替加环素和多黏菌素B对大部分院内感染常见致病菌均表现出较强的抗菌活性.鲍曼不动杆菌耐药问题严重.碳青霉烯耐药和多黏菌素B耐药的肠杆菌科细菌发生率有所增高,需要引起关注并进行持续监测.

天然存在的高分子生物聚合物γ-聚谷氨酸(γ-PGA)因具生物可降解性、无毒性和非免疫原性而被广泛应用于食品、工业和医疗等领域,主要由微生物发酵制备;当前γ-聚谷氨酸的微生物发酵制备技术在我国基本上处于实验室研究阶段,距离大规模的工业化生产还有很大差距.综述γ-聚谷氨酸的高产菌株选育,包括分离筛选新的γ-PGA生产菌株以及对原有的菌株进行遗传诱变和基因操作、合成机制;发酵条件优化,包括对培养基的组成成分(碳源、氮源和金属离子等)和发酵因素(温度、pH和溶氧等)进行优化;发酵方式选择,包括常规的液体发酵方式以及以工农业废弃物为原料的固体发酵方式;分离方法的建立,包括有机溶剂沉淀法和金属离子沉淀法的比较等.最后对γ-PGA相对分子质量的调控、生产成本、分离纯化、具体合成机制和大规模生产进行展望,以期为γ-聚谷氨酸工业化生产及在我国进一步的推广应用提供理论支撑.

利用微生物回收和固定CO2气体的生物固碳方法,成为解决"温室效应"这一重大环境问题的焦点,本研究目的是分离筛选固碳微生物菌株.利用无碳源无机培养基从活性污泥、沼液和设施土壤中分离筛选出以CO2为碳源的菌株24株,选取其中生长较快的8株菌进行cbbL基因、形态观察、生理生化反应测定和16S rDNA测序分析,将测序结果在BlAST数据库中比对,进行固碳菌株的分子鉴定,并对其菌体含量和RubisCO酶活性进行比较.选取RubisCO酶活性最高的菌株C2-8R,进行土壤施用试验,通过土壤RubisCO酶活性的测定,确定分离筛选的固碳菌的固碳能力.研究表明,可通过无碳源培养基进行固碳微生物菌株的筛选,筛选的固碳菌分别隶属于假单胞菌属和嗜甲基菌属,并可通过RubisCO酶活性来反映微生物的固碳能力.