目的:探讨单采血小板体外储存过程中其微小RNA(miRNA)的表达水平。方法:选择2022年3月至2023年5月成都市血液中心采集的15份单采血小板为研究对象。15份单采血小板采集自15例健康状况良好，符合《血站技术操作规程》(2019版)采集要求的单采血小板献血者。血小板捐献者的中位年龄为30岁(22，40岁)；男性捐献者为8例，女性为7例。将单采血小板置于恒温震荡保存箱中，温度(22±2)℃，振荡频率60 Hz条件下储存，分别于储存第1天(采集当天)、第5天和第7天的上午10点留取血小板标本3～5 mL。应用血细胞分析仪检测血小板常规指标，实验室pH计测定血小板pH值，流式细胞术(FCM)测定血小板CD62P表达水平，实时荧光定量PCR法测定miRNA-126、-145、-150、-197、-223的相对表达水平。血小板标本存储1、5、7 d时各项指标比较采用重复测量方差分析；采用Spearman相关性分析血小板miRNA表达水平与储存时间的相关性。本研究遵循的程序符合成都市血液中心伦理委员会要求[批准文号：伦审(研)2020年第04号]，并且于血小板捐献前与所有捐献者签署《献血者知情同意书》。结果:①随着储存时间延长，本组15份单采血小板标本的血小板压积(PCT)增大[储存1、5、7 d时分别为(0.68±0.21)%、(0.89±0.13)%、(0.99±0.17)%]，大血小板比例(P-LCR)上升[储存1、5、7 d时分别为(20.5±6.0)%、(26.0±3.4)%、(30.4±2.8)%]；pH值下降[储存1、5、7 d时分别为(7.2±0.1)、(7.1±0.2)、(7.0±0.2)]，并且差异均有统计学意义( F＝5.60， P＝0.007； F＝9.12， P＝0.001； F＝5.44， P＝0.004)；其余指标分别比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。②单采血小板标本储存1、5、7 d时，其CD62P表达水平分别为(6.3±2.9)%、(22.0±7.3)%和(38.4±12.1)%。随着储存时间延长，血小板标本的CD62P表达水平升高，并且差异均有统计学意义( F＝36.16， P<0.001)。③本组血小板标本随着储存时间的延长，其miRNA-126、-150、-197相对表达水平增加，而miRNA-145和-223相对表达水平下降；并且差异均有统计学意义( F＝88.58、32.64、33.59、35.42、22.91，均 P<0.001)。④本组单采血小板标本的储存时间与其miRNA-126、-150和-197的表达水平呈正相关( r＝0.811、0.812、0.856，均 P<0.001)，而与miRNA-145和-223的表达水平呈负相关( r＝－0.720、－0.767，均 P<0.001)。 结论:单采血小板在体外储存过程中，其miRNA-126、-145、-150、-197和-223表达水平发生明显变化，尤其是miRNA197。

目的:探索慢性髓性白血病（CML）患者外周血样本的存储和运输对实时定量PCR（RQ-PCR）检测BCR-ABL（P210）转录本水平的影响。方法:采集84例CML患者外周血样本，根据储存时间（0、6、12、24、48和72 h）、温度[室温（18~24 ℃）和低温（2~8 ℃）]以及振荡条件（振荡时长3、6和12 h）设置不同分组，RQ-PCR法检测不同条件下外周血样本BCR-ABL（P210）转录本水平。本研究将BCR-ABL拷贝数、ABL拷贝数和BCR-ABL（P210）转录本水平等原始数据进行对数转化（log 10N）。 结果:①琼脂糖凝胶电泳结果显示：室温条件下，储存48、72 h的样本RNA出现显著降解；②储存温度方面，总体样本中，室温储存48、72 h的样本BCR-ABL拷贝数检测水平显著低于低温储存的样本（ P<0.05）；然而BCR-ABL（P210）转录本水平在低温储存与室温储存条件下检测结果差异无统计学意义（ P>0.05）；③储存时间方面，与基线的3.35±1.60相比，总体样本的BCR-ABL拷贝数检测结果仅在室温储存储存下48 h（2.93±1.59）和72 h（2.79±1.42）显著下降（ P<0.05）；与基线的5.47±0.35相比，总体样本中ABL拷贝数检测结果在48 h（低温5.29±0.30，室温5.06±0.38）和72 h（低温5.11±0.54，室温4.64±0.79）均显著下降（ P<0.05）。但是，与基线的-0.56±1.51相比，无论低温或室温条件下，不同储存时间（6、12、24、48和72 h）的样本BCR-ABL（P210）转录本水平检测结果无显著改变（ P>0.05）；④振荡方面，与基线的-0.60±1.37相比，振荡3、6、12 h的样本BCR-ABL（P210）转录本水平检测结果无显著改变（ P>0.05）。 结论:样本储存时间、储存温度及运输振荡因素可以影响BCR-ABL、ABL拷贝数的检测结果，但对BCR-ABL（P210）转录本水平定量检测结果无显著影响。

为了让更多基层单位了解数字化、接受数字化、肯定数字化病理科存在的必要性，本文分享了湖北省房县人民医院数字化病理科建设的成功经验，从而为县级医院数字化病理科建设提供可借鉴的实现路径。从数字化切片和远程病理会诊平台的适用场景、工作流程、系统集成、数据安全、落地条件、应用成效等方面分别阐述数字化病理科建设的具体细节和使用体验，并通过评估扫描用时、存储容量等客观参数和用户主观感受来论证县级医院数字化病理科建设的可行性。结果显示：（1）将原有的手动显微镜升级为全自动扫描成像及多终端远程阅片系统，既能大幅降低数字化病理科的硬件投入，又可突破空间壁垒，实现远程诊断；（2）单张切片平均数字化耗时约（39.09±7.58）s，全切片扫描并不影响病理报告发放速度；（3）系统性能稳定，图像分辨率高，存储空间充足，阅片流畅；（4）将病理数据纳入信息安全等级保护（三级）有利于信息安全保障；（5）数字化病理科为实现医疗资源下沉和打破基层病理科人员紧缺、外出进修难的困境提供了实现路径。房县人民医院病理科数字化建设是一次非常成功的实战演练，将理论设想转换成为客观事实，其可行性强，建设周期短，资金设备投入少，值得推广与实施。

支气管镜作为辅助呼吸道疾病治疗及诊断的可复用医疗器械,精密程度高,结构复杂,对其清洗、消毒、存储及保养具有挑战性.随着支气管镜相关医院感染事件发生增多,相关防控工作需要被更加重视.本文对目前国内外支气管镜医院感染现状进行综述,分析了相关感染风险因素,并从支气管镜清洗消毒流程、干燥过程及存储方式、定期维修和保养计划、微生物监测、标准预防、流程与质量管理、感染控制策略7个方面总结并提出了相关感染防控措施补充建议,为医疗机构管理人员结合科室仪器设备和环境设施条件,因地制宜地选择最适宜的支气管镜防控管理措施及手段提供参考依据.

铁代谢是指铁在人体内的代谢过程处于吸收、转运、利用、丢失、循环、调节及存储等环节的动态平衡.机体铁代谢在机体维持正常生理活动中具有重要意义.当铁代谢失衡时可出现铁缺乏及铁过载.有证据表明,血栓形成与铁代谢失衡导致的铁缺乏和铁过载具有相关性,但其在静脉血栓形成中的作用机制尚未被阐明.本文综述了铁代谢吸收、代谢及调控的相关机制,总结了铁缺乏、铁过载等不同铁稳态失衡条件下对血栓形成的影响,主要探讨其在血栓形成过程中的作用机制,以铁代谢作为切入点,为临床防治血栓提供新思路.

RNA 是重要的生物医学研究对象,分离获得质量合格的 RNA 是研究 RNA 生物学功能的重要前提[1].目前常用的 RNA 检测方法,如实时定量 PCR、Northern blot、转录组测序等,都对 RNA 的质量有很高的要求.真核生物体内的 RNA 多以单链形式存在,稳定性较差,容易在样本采集、预处理和存储过程中发生降解[2].组织标本是临床研究RNA 功能的重要样本来源,对于组织的合理保存是保证其后续研究价值的重要前提之一[3].为最大程度保持组织样本RNA 的完整性,研究人员陆续开发了一系列的组织保存液,如 Trizol?、RNAstore、RNAlater?、DNA/RNA Shield?等,目前尚缺乏对新研发的 RNA 保护剂(如 RNAstore)的 RNA 稳定效果的比较研究.本文比较了不同 RNA 保护剂对组织样本 RNA 完整性的保护能力,并进一步分析不同保存时间对 RNA 提取得率、纯度和完整性的影响,从中筛选出适合组织标本 RNA 提取的组织样本保存条件.

目的 研究在舰艇长远航中,放置在舰艇不同战位、不同存储条件下,纸塑袋和无纺布 2 种常用的一次性包装材料包装的灭菌医疗物品的有效期,为长远航舰艇上灭菌医疗物品的存储提供借鉴.方法 通过对压力蒸汽灭菌后存放在舰艇不同战位、不同批次的无纺布和纸塑袋包装的医疗物品进行无菌检查实验,确定 2 种包装材料包装的灭菌医疗物品在舰艇上的有效期,并进行统计学分析.结果 第 150 天机舱、机库里纸塑袋和无纺布包装的灭菌医疗物品开始有菌生长;第 165 天口腔诊室无纺布包装的灭菌医疗物品开始有菌生长;第 180 天医务室(接诊室)纸塑袋包装的灭菌医疗物品开始有菌生长;第180 天手术间纸塑袋和无纺布包装的灭菌医疗物品均无菌生长.统计学分析显示,在相同战位,纸塑袋和无纺布包装的灭菌医疗物品存储有效期差异无统计学意义(P>0.05);医务室、口腔诊室与手术间的灭菌医疗物品存储有效期差异无统计学意义(P>0.05),机舱、机库与手术间的灭菌医疗物品存储有效期差异有统计学意义(P<0.05).结论 在舰艇长远航条件下,压力蒸汽灭菌后的纸塑袋和无纺布包装的医疗物品存储有效期在 135 d以内为宜,2 种包装材料的无菌保障有效期差异无统计学意义.

目的:运用转录组学和机器学习方法探索铁死亡关键基因与肺结核发病机制的相关性.方法:以"pulmonary tuberculosis"为关键词,以测序类型(转录组学)和物种(HOMO sapiens)等为条件从公共存储库NCBI GEO(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo)中进行搜索和筛选,得到GSE153326和GSE67589两套转录组数据集.将GSE153326作为训练组数据[包含健康人群血液样本8份,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)阳性血液样本52份]、GSE67589作为验证组数据(包含健康人群血液样本30份,MTB阳性27份);使用R脚本对数据进行矫正和注释,对两转录组的差异表达基因鉴定后,筛选出GSE153326训练组差异基因中与铁死亡相关基因(TBFerDEG)的表达情况,并对TBFerDEG的基因本体(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)进行富集分析;利用LASSO回归分析和SVM算法,从TBFerDEG中获得与铁死亡有明显差异的关键基因,并对其进行ROC分析,探索与关键基因相关的药物调控网络;最后将关键基因导入GSE67589验证组中,以验证训练组筛选出的铁死亡关键基因的诊断意义.结果:通过生物信息学分析,共筛选得到416个TBFerDEG,剔除不符合入选要求的基因,最终得到56个TBFerDEG差异基因.GO富集分析发现,肺结核中与铁死亡相关的生物学进程有细胞对化学应激的反应自噬调节、线粒体自噬、线粒体解体等;参与的通路有AMPK信号通路和铁死亡等.通过LASSO回归分析和SVM算法,最终得到5个与铁死亡相关的关键基因,分别为BID、AR、STK11、ALOX12和SRC,AUC分别为0.807、0.858、0.734、0.840和0.880;验证关键基因结果表明,AR和SRC基因在验证组(GSE67589)中MTB阳性与健康人群中的表达差异均有统计学意义(P值分别为0.004和0.017).结论:AR和SRC是肺结核中与铁死亡相关的关键基因,可能为今后的基础研究奠定一定的借鉴和参考.

目的 探讨超声成像参数对S-Detect技术诊断结果产生的影响.方法 前瞻性收集2021年10月至2022年3月因乳腺结节在浙江大学医学院附属邵逸夫医院就诊的患者,共纳入133例患者(143个结节).设置5种超声成像参数条件,包括基准(单焦点、焦点位于病灶中部水平、病灶深度适合)、双焦点、焦点位置过浅、焦点位置过深、扫查深度过深.分别存储在不同超声成像参数下获得的超声图像,并应用S-Detect技术对图像进行分析解读.比较基准参数设置与其他参数设置之间的诊断结果一致性及超声特征判读的一致性.并以病理结果为"金标准",比较各个参数设置条件下的诊断效能.结果 扫查深度过深与基准条件的诊断一致性(kappa=0.771)较其他设置更低,对于形状(kappa=0.489)及内部回声(kappa=0.442)这两个超声特征判读的一致性也较其他设置低.同时诊断效能(AUC=0.716)为各个设置中的最低者,且与基准设置的诊断效能差距最大.其他各项参数条件与基准条件的一致性较好,诊断效能与基准条件之间无显著性差异.结论 对比基准参数设置,在不同成像参数设置中,扫查深度过深条件下的诊断一致性、超声特征判读一致性、诊断效能均较其他条件更低.因此应用S-Detect技术时应避免采用过深的扫查深度.

目的 探讨不同稀释液对混合酶标抗体稳定性的影响,筛选出一种适用于混合酶标抗体的稀释液,可同时保护辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)偶联二抗和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)偶联二抗鸡尾酒混合物的稳定性.方法 以Tris-HCl缓冲盐溶液为基础溶液,设置4种不同的稀释液配方(A、B、C、D),每种配方包含不同类型的稳定剂,如蛋白、金属离子、表面活性剂、抑菌剂等,采用不同的稀释液配置混合酶标抗体,在冷藏(2～8 ℃)和37 ℃条件下存储,通过ELISA、酶活测定及免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色法检测其稳定性.结果 D液配方[Tris(50mmol/L)+牛血清白蛋白(1.5％,g/100mL)+Tween-20(0.3％)+Proclin-950(0.1％,g/100 mL)+氯化钠(150 mmol/L)+L-Ascorbic Acid(1 mmol/L)+L-methionine(5 mmol/L)+L-histidine(5mmol/L)+酪蛋白酸钠(1％,g/100 mL)+氯化锌(0.1 mmol/L)+海藻糖(8％,g/100 mL)]保存试剂的稳定性最好,在37 ℃条件下保存10周,HRP偶联二抗和AP偶联二抗的工作液效价最高,HRP和AP的活性剩余比率分别为93.46％和96.07％,IHC结果无明显差异.结论 该配方稀释液可用于混合酶标抗体工作液的配置.