[目的]对宽叶山蒿叶和艾叶进行研究,为其鉴别提供微形态资料.[方法]利用数码相机、光学显微镜和扫描电子显微镜对其叶脉、叶表面和粉末特征进行研究.[结果](1)强光背景下,只有宽叶山蒿叶各级叶脉能清晰观察到.(2)腺毛只分布于宽叶山蒿叶的下表面,而艾叶上、下表面均有大量腺毛.(3)和艾叶相似,宽叶山蒿叶下表面也密被T形非腺毛,顶细胞有2种:一种顶细胞呈长梭形而弯曲,平均长度约1 450 μm(Ⅰ型);另一种顶细胞细长,扁平且扭曲,平均长度约2 800 μm(Ⅱ型).(4)宽叶山蒿叶肉组织中草酸钙簇晶较少,且最大只有10 μm.[结论]宽叶山蒿和艾的叶脉微形态特点及其叶上表面腺毛的有无特征可用于两者叶的快速鉴别.

目的:比较宽叶山蒿叶和艾叶中的挥发性成分,为宽叶山蒿的进一步开发利用提供基础.方法:采用水蒸气蒸馏法(SD)提取叶中的挥发油;采用顶空固相微萃取结合气质联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析宽叶山蒿叶和艾叶的挥发性成分,对其共有峰进行聚类分析.结果:宽叶山蒿叶中挥发油得率在 0.16%～0.23%,平均得油率仅为 4 种艾叶的 12.03%～25.33%.2 种叶挥发油中分别鉴定出 59 种和 64 种组分,共有组分 10 种,部分共有组分21 种.宽叶山蒿叶中相对含量较高的为石竹烯、氧化石竹烯和大根香叶烯D;艾叶中为桉油精、石竹烯和氧化石竹烯.聚类分析将宽叶山蒿叶的湖北蕲春种源 1(S1)和蕲艾(S8)聚为一类,其余 3 种宽叶山蒿叶和 3 种艾叶分别聚为一类.结论:宽叶山蒿叶和艾叶挥发性成分种类和含量差异明显:艾叶中桉油精相对含量显著高于宽叶山蒿叶,宽叶山蒿叶中石竹烯、氧化石竹烯和大根香叶烯D的相对含量显著高于艾叶.宽叶山蒿叶中烯类物质相对含量高于艾叶,艾叶中醇类物质相对含量高于宽叶山蒿叶;宽叶山蒿叶中含有呋喃类成分,但艾叶中未检测出.

比较野生和栽培宽叶山蒿生长和叶片品质的差异,为宽叶山蒿的进一步开发利用提供参考.采集生长于不同海拔的宽叶山蒿野生品和栽培品,测定农艺性状,出绒率,叶绒燃烧热解质量,挥发性成分、黄酮类和酚酸类成分含量.结果表明,宽叶山蒿栽培品较野生品更加高大粗壮、叶片多、分枝多;野生品的叶片出绒率和叶绒燃烧热解质量高于栽培品;各主要挥发性成分含量为栽培品高于野生品;而黄酮类和酚酸类成分含量则是野生品高于栽培品.高海拔下野生和栽培宽叶山蒿叶绒的点燃性能、燃烧的持久性、综合燃烧性能和燃烧过程中的释热量均为最优,中海拔下宽叶山蒿栽培品和野生品叶片所含主要特征挥发性成分和黄酮酚酸类成分含量均为最高,低海拔下栽培品的叶绒燃烧热解质量和上述成分含量均显著下降.从叶绒燃烧热解质量和内在成分含量考虑,宽叶山蒿人工驯化栽培适宜选择中、高海拔区域.

研究不同遮荫度对宽叶山蒿生长、产量和品质的影响,为宽叶山蒿人工栽培提供参考依据.以生长一致的宽叶山蒿幼苗为试验材料,采用黑色遮阳网,设置 4 个遮荫水平(0、55%、85%、95%),进行遮荫处理,测农艺性状指标,产量,出绒率,绒总灰分,绒燃烧热解质量特性,挥发性、黄酮类、酚酸类成分含量.结果表明,宽叶山蒿的茎粗、叶宽、五叶间距、分枝数、产量在遮荫条件下显著降低,株高、叶长、叶片数、叶绿素含量和出绒率随遮荫度增加先增高后降低.自然光下叶绒燃烧性能优于中度遮荫下和重度遮荫下.桉油精的含量随遮荫度增加先增加后减少,葎草烯含量与遮荫度呈负相关,其他主要特征挥发性成分在各遮荫条件下无显著性差异;新绿原酸、隐绿原酸、异夏佛塔苷和异绿原酸B的含量与遮荫度呈负相关,绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C的含量随遮荫度增加先减少后增加.综上所述,宽叶山蒿是喜光植物,遮荫会大幅降低产量、内在成分含量和叶绒燃烧性能,这是野外宽叶山蒿主要分布在中高山的林缘、疏林、路边和荒地草丛的主要原因;进行宽叶山蒿人工驯化栽培,宜选择光照充足地块.

宽叶山蒿为艾的近源种,两者饮片或叶绒混在一起很难鉴别.该研究旨在从分子层面建立一种快速鉴别宽叶山蒿与艾的方法.根据宽叶山蒿与艾的ITS2 基因测序结果,使用DNAMAN软件进行序列比对,分析得到在ITS2 基因 202 位存在C/T单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP);并依据此SNP位点设计特异性引物,建立并优化特异性PCR方法,以此方法进行混样检测验证可行性与稳定性.在特异性PCR条件下,使用特异性引物JNC-F与通用引物ITS3R,艾可以扩增出 1 条 218 bp的特异条带,而宽叶山蒿不能扩增;使用特异性引物KY-F与通用引物ITS3R,宽叶山蒿可以扩增出 218 bp特异条带,而艾不能扩增.建立的方法同时可以用于检测饮片及加工品叶绒,使用JNC-F/ITS3R体系可以检测宽叶山蒿中是否混有艾,艾饮片及叶绒的最低检测限均为 3%;使用KY-F/ITS3R体系可以检测艾中是否混有宽叶山蒿,宽叶山蒿饮片及叶绒的最低检测限均为 5%.模板检出限考察中 2 个体系对模板的检出限均为 5 ng.构建方法可为两者质量控制提供依据,准确检测和判定市场上 2 种药材是否混用.

基于对宽叶山蒿不同萃取组分的化学成分分析以及抗氧化和抗炎作用评价,结合网络药理学、分子对接技术探讨宽叶山蒿发挥抗炎作用的药效物质和分子作用机制.采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术鉴定出宽叶山蒿 32 个化学成分,其中水组分7 个、正丁醇组分21 个、乙酸乙酯组分22 个;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)、2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基(ABTS)及铁离子自由基(FRAP)法测定不同萃取组分的抗氧化活性,采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7 细胞炎症模型,以细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及细胞中相关炎症因子mRNA表达量为指标评价抗炎作用.结果表明宽叶山蒿乙酸乙酯组分为其最佳抗氧化、抗炎活性组分.网络药理学分析结果显示,鼠李秦素、异泽兰黄素、棕矢车菊素、木犀草素、泽兰黄酮等黄酮类成分可作用于TNF、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶 1(AKT1)、肿瘤蛋白p53(TP53)、胱天蛋白酶-3(CASP3)和表皮生长因子受体(EG-FR)等关键核心靶点,通过调节磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路发挥抗炎作用.分子对接结果进一步显示上述核心成分与核心靶点间均具有良好的结合性能.该研究初步阐明了宽叶山蒿乙酸乙酯组分抗炎的药效物质及作用机制,为后续的临床应用和药物开发提供了依据.

为从定性和定量2个方面比较宽叶山蒿与艾的化学成分差异,该文以不同种源的艾与宽叶山蒿的叶和绒为研究对象,采用UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定了样品中18个化合物的结构,利用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异标志物,并利用UPLC-UV同时测定了12个化学成分的含量.结果 表明宽叶山蒿与艾所含主要成分类似,主要为绿原酸类和黄酮类,除个别成分的有无区别外主要是含量高低上具有差异.艾中的高车前素未在宽叶山蒿中检测到,夏佛塔苷、异绿原酸B和异绿原酸C为艾叶与宽叶山蒿叶的差异性化合物,异绿原酸A、异绿原酸C和棕矢车菊素为艾绒与宽叶山蒿绒的差异性化合物.艾中棕矢车菊素和夏佛塔苷含量存在明显差异.另外,宽叶山蒿野生比栽培的异绿原酸A含量高.该方法成功评价了宽叶山蒿与四大名艾的整体质量,为宽叶山蒿的下一步开发利用提供了科学依据.

九牛草始载宋代《本草图经》,明清本草多有沿用,但其所指均不甚清楚.艾叶在我国有着悠久应用历史和广阔应用范围,成为传统文化不可分割的一部分.历史上,艾叶药材的基原较多,其中明、清时期的蕲州九牛草被称作为"蕲艾",珍贵而价高,民间推崇为"艾之精英".为捋清九牛草基原和九牛草与艾的历史渊源,该文通过对古代文献著作中九牛草的本草文图考证、产地分析,对蕲州九牛草的实地调查取样,并查阅中国科学院植物研究所标本馆馆藏蒿属标本,考证认为古代本草记载九牛草基原植物应为菊科植物宽叶山蒿Artemisia stolonifera,为古代中药材艾叶的重要基原之一,值得进一步开发利用.

采用扫描电子显微镜对宽叶山蒿与北艾、海艾、蕲艾和祁艾的叶表皮腺毛和非腺毛形态、大小进行观察与统计学分析,结果显示宽叶山蒿与四大艾各部位表皮毛特征均存在显著差异,这种差异与化学成分差异密切相关.中部叶非腺毛长度和腺毛面积大小最稳定;腺毛密度可区分宽叶山蒿与艾叶;非腺毛密度和卷曲度可以进一步区分四大艾,宽叶山蒿非腺毛密度最高.四大艾上部叶下表面非腺毛以蕲艾最厚;祁艾中部叶上表面T形非腺毛柄长者易倒伏,顶端细长者呈波浪状分布;海艾非腺毛卷曲度最高.统计学结果表明,海艾下部叶上、下表面的腺毛面积大小和下表面腺毛密度均较其他品种各部位更高;宽叶山蒿上部叶下表面非腺毛密度最高;蕲艾上部叶上表面腺毛密度、非腺毛密度最大.荧光显微镜观察结果表明黄酮类成分与表皮毛大小及密度密切相关.蕲艾、北艾黄酮类显色程度和显色面积均最佳,宽叶山蒿中黄酮类显色最弱.该研究使用扫描电子显微镜和荧光显微镜对艾叶不同叶位叶片表皮毛超微结构进行观测分析,结果为艾叶资源品种及近缘种显微鉴定提供了新的证据,也为结构与成分及功能关系研究提供参考资料.

目的:比较顶空-固相微萃取法(HS-SPME)和水蒸气蒸馏法(SD)对宽叶山蒿叶挥发性成分的提取效果.方法:采用GC-MS技术分别对HS-SPME与SD的提取物进行分析.结果:HS-SPME法提取物共鉴别出46个化合物,主要为石竹烯氧化物、石竹烯等;SD法提取物共鉴别出31个化合物,主要为石竹烯氧化物、异丁子香烯等.两种方法共鉴定出挥发性成分54种,共有成分23种,SD法特有成分8个,HS-SPME法特有成分23个.两种方法提取的挥发性成分种类、数量和含量差异较大.结论:HS-SPME-GS-MS法可简便、高效地检测宽叶山蒿叶的挥发性成分,但不能完全替代传统的SD-GC-MS方法,将两种方法联用分析宽叶山蒿叶中挥发性成分能够得到更加全面的信息.