目的:探讨密花香薷粗提物体外对酶抑制的作用,初步阐明其对代谢综合征的药效物质基础.方法:体外测定密花香薷粗提物及其不同萃取部位对多种酶活性的抑制率,与阳性对照比较IC50值,高效液相色谱法测定密花香薷中主成分含量.分子对接计算主成分与酶抑制作用相关目标基因的结合能.结果:密花香薷粗提物对α-淀粉酶、黄嘌呤氧化酶、胰脂肪酶、乙酰胆碱酯酶均有一定的抑制作用,IC50值分别为0.199 mg/mL、0.254 mg/mL、0.258 mg/mL、0.057 mg/mL.密花香薷乙酸乙酯部分对酶抑制作用最强,其中含量最高为绿原酸57.40 mg/g和槲皮素37.51 mg/g.分子对接发现绿原酸、槲皮素与以上代谢综合征酶抑制作用相关目标基因结合作用良好.结论:密花香薷粗提物对代谢综合征相关多种酶有一定的抑制活性,初步认为密花香薷治疗代谢综合征的药效物质基础可能为绿原酸与槲皮素.

目的 考察密花香薷挥发油透皮吸收的能力,研究其作为一种中药促渗剂的可能性.方法 应用体外透皮试验方法,以KM小鼠腹部皮肤为研究对象,HPLC测定接受液中黄芩苷含量,计算黄芩苷累积透过量,考察密花香薷挥发油对黄芩苷的促渗作用.结果 当密花香薷挥发油浓度为3％时,其黄芩苷的累积透过量最大,促渗透效果最好,与阳性对照药氮酮相比,密花香薷挥发油的累积透过量高于氮酮的累积透过量.结论 密花香薷挥发油具有促进渗透的作用,可以促进黄芩苷的吸收.

目的 优化密花香薷挥发油的水蒸气蒸馏法提取工艺,考察不同提取部位的挥发油抗菌和抗氧化活性,为密花香薷植物资源的开发与利用提供依据.方法 采用单因素法考察密花香薷不同部位挥发油的提取工艺,采用药敏纸片法研究不同提取部位的挥发油的抗菌活性,采用 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)法测定挥发油的抗氧化能力.结果 水蒸气蒸馏法提取密花香薷不同部位中的挥发油,条件为加水量14倍、浸泡时间6 h、提取时间为3 h.密花香薷不同提取部位的挥发油对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、铜绿假单胞菌有一定的抑菌活性.活性顺序依次为大肠埃希菌＞福氏痢疾杆菌＞金黄色葡萄球菌＞铜绿假单胞菌.花序挥发油的抑制效果强于叶挥发油.密花香薷挥发油的抗氧化能力随浓度增加而增强,在浓度为 10%时最强,但抗氧化作用弱于维生素 C.结论 确定密花香薷挥发油的水蒸气蒸馏法提取工艺,其不同提取部位的挥发油有一定抑菌活性和抗氧化能力.

目的 探究密花香薷能否作为香薷的代用品.方法 水蒸气蒸馏法分别提取两种植物挥发油.气相色谱—质谱(gas chromatography and Mass spectrum,GC-MS)联用技术检测其两者挥发油的化学成分,并以峰面积归一法测定各成分的相对百分含量,对比两者挥发油化学成分与含量的差异.结果 检测得到7种共有成分,分别占密花香薷与香薷挥发油含量的98.941％和98.630％,其中主成分均为香薷属特征性成分β-去氢香薷酮.结论 密花香薷与香薷的挥发油成分与比例高度契合,可以进一步探讨密花香薷替代香薷的可能性,为临床尝试打下一定的研究基础.

目的 通过网络药理学和分子对接技术初探新加香薷饮治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在活性成分、靶点、通路及分子机制.方法 从TCMSP数据库和文献挖掘收集新加香薷饮中的香薷、金银花、连翘、厚朴和扁豆花的化学成分,以TCMSP数据库和Swiss Target Prediction获取靶点,输入STRING数据库获取靶点对应的标准基因名,运用DAVID6.8进行GO富集、KEGG通路富集和组织富集分析,采用Cytoscape 3.8.0和R语言作图.从PDB数据库下载新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 3CL和ACE2的晶体结构,利用AutoDock Vina、Pymol和Discovery Studio软件进行分子对接.结果 从新加香薷饮中获得49个活性成分和321个靶点,发现了33条与治疗COVID-19相关的通路,包括肺病相关通路、病毒相关通路以及炎症-免疫相关通路,并发现了RELA、MAPK1、IL6、AKT1、MAPK8、TNF等6个基因可能与治疗COVID-19密切相关.通过分子对接发现金圣草黄素、绿原酸、咖啡酸、厚朴酚、和厚朴酚、麝香草酚、香荆芥酚与SARS-CoV-2 3CL和ACE2具有较高的亲和力.结论 中药治疗疾病是通过多组分、多靶点和多途径共同的结果,新加香薷饮具有治疗COVID-19的潜力.

利用MISA软件对密花香薷转录组42 362条Unigene进行SSR位点搜索,并对其SSR序列结构及分布特征进行了分析.结果表明:(1)密花香薷转录组Unigene序列中共检测到17 564个SSR重复序列,分布于11 903条Unigene上,出现频率为28.10％,平均每3 200 bp出现一个SSR位点.(2)单、二、三核苷酸重复类型为密花香薷转录组SSR位点的主导基序类型,占总SSR位点的97.27％,3种主导基序类型中,单核苷酸所形成基元类型数量最多,共检测到169个基元类型(51.22％),单核苷酸(A/T)n基元类型占明显优势,二核苷酸重复类型(AG/CT)n基元类型占优,分别占总SSR位点的50.60％和12.17％.(3)单核苷酸SSR位点所包含重复次数最多(49),重复次数介于10～66,同一基序类型不同重复次数所形成的SSR位点数量差异较大,随重复次数的增加,SSR位点数呈下降趋势.(4)密花香薷转录组二至六核苷酸基序SSR序列长度集中在12～30 bp区间,共包含有8 190个SSR位点,占所统计SSR位点的95.60％,1 589(≥20 bp)个SSR序列具有极高的多态性,占所统计SSR位点的18.54％.综合出现频率、分布密度、基元重复次数和长度变异等多个研究结果发现,密花香薷转录组检索到的SSR序列表现出较高的多态性潜能,具有较大的开发价值.该研究为后续密花香薷SSR分子标记引物开发奠定了理论基础.

目的 基于高通量测序获得药用资源植物密花香薷Elsholtzia densa叶绿体基因组序列,分析了叶绿体基因组结构及特征,为研究密花香薷资源分类及系统进化奠定了基础.方法 以密花香薷叶片为材料,利用改良的CTAB法提取DNA;采用二代测序技术Illumina NovaSeq平台对叶绿体基因组进行测序;以广藿香叶绿体基因组为参考序列,进行序列组装和矫正,得到完整叶绿体基因组序列;利用生物信息学方法分析密花香薷叶绿体基因组特征并进行系统发育分析.结果 获得密花香薷完整叶绿体基因组序列全长149 095 bp,GC含量37.92％,注释到130个基因,其中包括85个蛋白质编码基因,8个rRNA基因和37个tRNA基因;密花香薷叶绿体基因组中共检测到28个散在重复序列,串联重复序列共检测到191个,单核苷酸重复序列最多,共114个;系统发育结果表明,密花香薷和其他唇形科植物聚合在一起形成一个分支结构,紫苏属植物和香薷属植物亲缘关系较近.结论 建立了适于香薷属植物叶绿体基因组测序及其特征分析的方法,丰富了唇形科植物遗传资源,为密花香薷分子标记开发及唇形科属种间系统发育分析研究提供了理论基础.

目的 对5种唇形科植物东紫苏(Elsholtzia bodinieri)、野拔子(Elsholtzia rugulosa)、密花香薷(Elsholtzi adensa)、大黄药(Elsholtzia penduliflora)、石香薷(Mosla chinensis)挥发油成分及其抗流感病毒活性研究.方法 采用气质联用方法,结合NIST5.0标准谱库,对水蒸气蒸馏法提取得到的5种唇形科植物挥发油成分进行比较分析,并利用A/WSN/33/2009(H1N1)病毒感染犬肾细胞(MDCK)细胞,对5种唇形科植物挥发油进行抗流感病毒活性评价.结果 不同唇形科植物检出的主要挥发性物质的种类和相对含量有所差异.从5种唇形科植物挥发油中共检测出相对含量大于0.50％的挥发性成分105种,包含萜烯类、烷烃类、醛类、醚类、醇类、酮类、酸类、酯类等,其中萜烯类和烷烃类物质含量最高,占总挥发性成分的32.40％～72.50％.体外抗流感病毒活性实验显示,这5种唇形科植物挥发油都具有一定的抗流感病毒活性.其中,密花香薷的抗流感活性最强,对流感病毒A/WSN/33(H1N1)的抑制率达(44.43±1.30)％.结论 挥发油是唇形科植物的重要药效成分,分析5种唇形科植物挥发油活性成分的主要化学组成及抗流感病毒活性,为进一步开发研究提供科学依据.

目的 探讨密花香薷挥发油诱导肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及机理.方法 设置三个处理组,使密花香薷挥发油处理终浓度为20、40 μg/ml和60 μg/ml,以1％DMSO为对照.采用AO-EB染色和Annexin-V/PI双染流式细胞术分析细胞死亡率;化学荧光法检测细胞内ROS相对含量和线粒体膜电位;通过透射电子显微镜观察细胞超微结构;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin 1和LC3的表达量;采用SPSS 17.0进行ANOVA方差分析,Duncan法进行多重比较.结果 AO/EB双染和Annexin-V/PI双染流式细胞术结果表明,随着密花香薷挥发油浓度增加,SMMC-7721细胞的死亡率增高(F=132.100,P＜0.001);SMMC-7721细胞内相对ROS水平升高,差异有统计学意义(F=61.580,P＜0.001),而线粒体膜电位下降(F=64.300,P＜0.001);透射电子显微镜观察SMMC-7721细胞内出现自噬体;Western blot检测结果显示,随着密花香薷挥发油处理浓度的增加,自噬相关蛋白LC3-Ⅰ(F=504.100,P＜0.001)、LC3-Ⅱ(F=184.500,P＜0.001)和 Beclin 1 水平上调(F=58.690,P＜0.001).结论 密花香薷挥发油可通过活性氧-线粒体途径诱导SMMC-7721细胞自噬性死亡.