目的:观察盐酸小檗碱联合表柔比星、顺铂对晚期子宫内膜癌(EC)的抗肿瘤效果。方法:选取2016年1月至2018年12月安徽医科大学附属巢湖医院收治的120例晚期EC患者，采用随机数表法将其分为试验组和对照组，各60例。对照组给予静脉滴注表柔比星、顺铂注射液，试验组在对照组治疗基础上给予口服盐酸小檗碱治疗，21 d/周期，共6周期。统计并对比两组临床疗效、血清肿瘤标志物变化、不良反应发生率、1年死亡率。结果:两组临床疗效等级分布比较，差异有统计学意义( Z＝4.489， P＝0.042)，且试验组总有效率为63.33%(38/60)，高于对照组的45.00%(27/60)，差异有统计学意义( χ2＝4.062， P＝0.044)。治疗后试验组血清糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)水平分别为(30.01±6.05)U/ml、(40.38±7.61)U/ml、(16.85±3.08)ng/ml，对照组分别为(45.83±6.91)U/ml、(48.89±8.05)U/ml、(20.20±4.18)ng/ml，均较本组内治疗前降低，且治疗后试验组血清CA125、CA19-9、CEA水平均低于对照组，差异均有统计学意义( t＝13.343， P<0.001； t＝5.951， P<0.001； t＝4.998， P<0.001)。治疗期间试验组肝功能异常、肾功能异常、白细胞减少、血小板减少、恶心/呕吐、腹泻、口腔黏膜炎发生率及不良反应总发生率分别为8.33%(5/60)、5.00%(3/60)、6.67%(4/60)、6.67%(4/60)、8.33%(5/60)、1.67%(1/60)、3.33%(2/60)、40.00%(24/60)，对照组分别为6.67%(4/60)、3.33%(2/60)、8.33%(5/60)、6.67%(4/60)、8.33%(5/60)、0(0/60)、1.67%(1/60)、35.00%(21/60)，差异均无统计学意义( χ2＝0.000， P＝1.000； χ2＝0.000， P＝1.000； χ2＝0.000， P＝1.000； χ2＝0.134， P＝0.714； χ2＝0.109， P＝0.741； P＝1.000； χ2＝0.000， P＝1.000； χ2＝0.320， P＝0.572)。随访1年，对照组死亡率为8.33%(5/60)，试验组死亡率为5.00%(3/60)，两组差异无统计学意义( χ2＝0.134， P＝0.714)。 结论:盐酸小檗碱联合表柔比星、顺铂治疗晚期EC疗效显著，可降低血清肿瘤标志物水平，且安全可靠，值得临床借鉴。

目的:研究兔眼部局部应用小檗碱溶液的安全性及其对兔眼角膜上皮修复的影响。方法:实验研究。日本大耳白兔92只，随机数字表法分为一般情况组（32只兔，64只眼）和角膜损伤组（60只兔，60只眼）。一般情况组再用随机数字表法分为4个组，每组8只兔（16只眼），根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为一般情况对照组及一般情况A、B、C组；双眼给药，每只眼先单次给药，观察72 h后再连续4周多次给药。角膜损伤组兔右眼制作角膜上皮损伤模型后，根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液，分为角膜损伤对照组及角膜损伤A、B、C组，每组15只兔（15只眼），连续给药1周。一般情况组兔进行行为学观察，并应用Draize眼刺激性评分系统，对兔角膜、结膜、虹膜受累的面积、程度和反应进行评分，测量不同时间眼压，视网膜电图（ERG）检测b波振幅。角膜损伤组兔于角膜缺损后1、2、3、4、5、6、7 d观察角膜上皮缺损修复情况。所有兔停药后进行角膜组织病理学观察。兔泪液pH值比较采用配对 t检验，Draize眼刺激性评分采用秩和检验，眼压、视网膜电图b波振幅及角膜上皮损伤面积和修复时间的多组比较采用方差分析及SNK- q检验。 结果:单次给药和多次给药后一般情况组兔均无明显异常行为。一般情况对照及A、B、C组在多次给药1、2、4周时Draize眼刺激评分差异均无统计学意义，其中一般情况C组的Draize眼刺激评分分别为7（0，12）、6（0，10）、6（0，16）分（χ 2=1.640，0.265，1.963，1.381； P>0.05）。一般情况对照及A、B、C组在多次给药前后不同时间的眼压差异均无统计学意义（ F=0.065，0.292，0.015，0.041； P>0.05）。在多次给药前及给药后2、4周一般情况对照组的b波振幅分别为（127.75±17.12）、（129.18±15.83）、（128.81±13.58）μV，一般情况A组为（130.68±18.75）、（131.38±16.96）、（130.62±12.18）μV，一般情况B组为（128.00±16.74）、（128.44±16.64）、（129.06±16.16）μV，一般情况C组为（131.81±19.37）、（132.13±18.36）、（129.94±12.60）μV，各组在给药前后不同时间b波振幅差异均无统计学意义（ F=0.037，0.011，0.017，0.702； P>0.05）。一般情况对照组与一般情况A、B、C组角膜组织病理学检查结果无明显差异。角膜损伤各组在不同时间的角膜上皮缺损面积有统计学意义（ F=5.316，25.864，127.613； P<0.05），角膜损伤对照组与角膜损伤A、B、C组之间两两比较，角膜损伤C组的角膜上皮缺损面积明显大于其他3个组，差异具有统计学意义（ q=5.153，10.313，6.976； P<0.05）。角膜损伤对照及A、B、C组的修复愈合时间为（83.0±1.85）、（82.9±2.07）、（83.7±2.09）和（101.6±2.20）h，角膜损伤C组角膜上皮缺损修复时间长，差异有统计学意义（ F=301.437， P=0.000），角膜损伤对照组及角膜损伤A、B组之间比较，角膜上皮缺损修复时间差异无统计学意义（ F=0.813， P=0.450）；修复结束后，角膜损伤组之间角膜组织的病理学检查结果无明显差异。 结论:兔眼局部应用小檗碱溶液较安全，兔眼眼表未见明显的毒性反应，对视网膜未见明显影响。1.5 mg/ml浓度小檗碱溶液可延迟兔眼角膜上皮缺损修复，但对修复后的角膜组织结构的完整性无影响。 （中华眼科杂志，2020，56：131-137）

目的:探索使用网络药理学方法和动物实验研究黄连治疗龋齿的作用机制。方法:通过中药系统药理学（TCMSP）数据库与分析平台筛选出黄连有效成分及其靶点，并通过GeneCards数据库在线检索疾病靶点。在Venny 2.1网站筛选出黄连和龋齿的交集靶点，并将交集靶点在线进行蛋白-蛋白相互作用分析和基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。然后，使用Cytoscape制作"成分-靶点-通路"网络图。将大鼠随机分为模型组和黄连组，建立龋齿大鼠模型。模型组大鼠用浸有150 μl 0.9%氯化钠溶液小棉球反复涂擦大鼠磨牙各面5 min，黄连组大鼠将浸有黄连（5.8 mg黄连融入150 μl 0.9%氯化钠溶液）的小棉球反复涂擦大鼠磨牙各面5 min。2组大鼠每周处理1次，连续处理4周。对变异链球菌菌落数进行计数，并采用酶联免疫法检测血清丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）、JUN、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。结果:黄连中有11个有效成分，通过干预54个靶点，调节多个分子通路，从而治疗龋齿。槲皮素、小檗碱、黄藤素、小檗浸碱和四氢小檗碱等是核心成分，AKT1、JUN、IL-6、TNF、Bcl-2为核心靶点。GO分析显示，BP主要包括细胞因子活性、信号受体激活剂活性、信号受体调节剂活性、细胞因子受体结合和受体配体活性等；CC主要包括对脂多糖的反应、对细菌分子的反应、细胞对脂质的反应、炎症反应和细胞群体增殖负调控等；MF主要包括膜筏、膜微区、细胞外基质、外部封装结构和质膜蛋白复合物等。KEGG分析显示晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体（AGE-RAGE）、TNF、IL-17、Toll样受体、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、核因子-κB（NF-κB）、表皮生长因子受体（EGFR）、Janus激酶-信号转导子与转录激活子（JAK-STAT）、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）等信号通路与黄连治疗龋齿相关。动物实验结果显示，黄连治疗后血清Bcl-2蛋白表达增加，血清AKT1、JUN、IL-6、TNF等蛋白表达减少。结论:黄连可以通过多种通路参与调控龋齿的靶点，具有良好的治疗效果和广泛的作用机制，有望成为开发治疗龋齿的中成药的重要组分。

目的:探讨铁死亡在骨髓间充质干细胞(BMMSCs)调控肝星状细胞(HSCs)活化和肝纤维化中的作用。方法:选取5只SD雄性大鼠(北京军事医学科学院动物实验中心提供)腹腔注射橄榄油12周作为对照组；选取15只SD大鼠腹腔注射含40%CCl 4的橄榄油8周建立大鼠肝纤维化模型，采用随机数表法分为模型组、BMMSCs治疗组和小檗碱组，每组5只；将大鼠肝星状细胞(HSC-T6)分为对照组(Ctrl)、血小板衍生因子(PDGF-BB)激活组、PDGF-BB＋BMMSCs共培养组、PDGF-BB＋爱拉斯汀(erastin)组及PDGF-BB＋BMMSCs＋铁死亡抑制剂(fer-1)组。通过苏木精-伊红和天狼猩红染色评估肝脏病理，检测不同组别的丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量，通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光检测细胞纤维化和铁死亡指标水平。两组间数据比较采用独立样本 t检验；3组及以上数据比较采用单因素方差分析。 结果:BMMSCs组肝细胞变性、坏死及胶原纤维沉积明显减轻；BMMSCs共培养组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平低于PDGF-BB激活组(0.80±0.10比1.13±0.06， F＝32.914， P<0.05)。BMMSCs组大鼠肝脏MDA含量高于模型组[(0.37±0.02) μmol/mg比(0.23±0.02) μmol/mg， F＝56.360， P<0.05]。BMMSCs共培养组MDA含量高于PDGF-BB激活组[(1.54±0.18) nmol/mg prot比(1.14±0.06) nmol/mg prot， F＝16.397， P<0.05]，GSH含量低于PDGF-BB激活组[(0.63±0.05) μg/10 6 cells比(0.96±0.03) μg/10 6 cells， F＝50.638， P<0.05]。fer-1预处理组细胞活力高于BMMSCs共培养组[(78.50±2.73)%比(24.07±8.92)%， F＝89.533， P<0.05]，并且fer-1抑制BMMSCs介导的诱导细胞发生铁死亡和减轻纤维化作用。 结论:铁死亡参与BMMSCs抑制HSCs活化和减轻肝纤维化过程。

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对肝硬化大鼠肠道菌群的影响。方法:2019年3月至9月，选取115只SD大鼠(军事医学科学院实验动物中心提供)腹腔注射四氯化碳(CCL 4)建立肝硬化模型后，采用随机数表法分组方式分为模型组、BMSCs组及小檗碱组，分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、BMSCs及小檗碱灌胃处理，另选取10只大鼠作为对照组，干预后处死各组大鼠，苏木精-伊红(HE)及天狼星红染色检测肝脏组织病理学改变，生化分析仪检测血清白蛋白(ALB)与总胆红素(TBIL)，酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清层黏连蛋白(LN)含量变化；采集各组大鼠粪便标本，对细菌16S rDNA基因V3～V4区进行聚合酶链式反应(PCR)扩增，并进行高通量测序，两组间数据比较采用独立样本 t检验，3组数据间比较采用单因素方差分析。 结果:BMSCs组大鼠肝组织Ishak评分及分期[(4.00±0.63)分、4.50±0.55]均低于模型组[(7.83±0.75)分、5.83±0.41]，差异有统计学意义( t＝3.833、1.333， P<0.05)；BMSCs组大鼠血清ALB含量[(29.65±1.38) g/L]高于模型组[(22.76±2.67) g/L]，差异有统计学意义( t＝6.882， P<0.05)；TBIL及LN的含量[(3.09±0.25) μmol/L、(45.19±1.86) ng/ml]均低于模型组[(10.75±1.14) μmol/L、(56.69±2.00) ng/ml]，差异有统计学意义( t＝7.658、11.497， P<0.05)；BMSCs组大鼠肠道菌群中脱硫弧菌科及脱硫弧菌属丰度明显高于模型组，梭菌科及梭状芽胞菌属丰度明显低于模型组。 结论:BMSCs移植治疗可以有效改善肝硬化大鼠的肝功能及肝纤维化程度，其机制可能与调节其肠道菌群有关。

目的:通过转录组测序（RNA-seq）分析小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌USA300基因组表达谱的影响，研究小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的抑菌机制。方法:基础研究。本研究使用标准菌株USA300，该菌株为中科院上海药物所蓝乐夫课题组2019年所赠送。用1/2最低抑菌浓度（MIC）（64 mg/L）和1/8MIC（16 mg/L）浓度的小檗碱处理和无小檗碱处理耐甲氧西林金黄色葡萄球菌USA300，分析USA300差异基因表达情况。将差异基因筛选条件设为： P值<0.05，且差异倍数>2。采用SPSS 20.0进行统计分析。 结果:通过测序结果发现，高浓度组与正常对照组相比，共有754个差异基因表达，其中上调基因主要为lukD、lukE、ssaA等，下调基因主要为lukF-PV、lukS-PV、clfA、splB~splF、sspA等；低浓度组与正常对照组相比，仅有19个差异基因表达，其中上调基因为speG、scpB、rpsQ等，下调基因为betA、bccT等。结论:本研究USA300转录组基因表达情况，了解经小檗碱作用后差异基因表达情况，推测小檗碱主要通过调控细菌细胞壁水解功能、白细胞毒素及其他毒力因子的表达发挥对MRSA的抑菌作用。

目的:探讨中药单体小檗碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）细胞膜完整性、通透性的影响以及细菌细胞壁结构的改变，为中药单体成分小檗碱在抗菌中的临床应用奠定基础。方法:本研究采用非随机同期对照试验。收集上海市第八人民医院检验科2019—2020年老年科患者下呼吸道样本分离培养的MRSA菌株3株。采用梅里埃VETEK MS全自动快速微生物质谱检测系统及VETEK 2 Compact全自动微生物鉴定仪鉴定细菌药敏实验检测细菌菌种及药敏；采用微量肉汤稀释法测定小檗碱对MRSA的最低抑菌浓度（MIC）；采用培养基电导率实验观察不同浓度小檗碱对MRSA细胞膜通透性的改变；透射电子显微镜观察不同浓度小檗碱作用后MRSA细胞壁结构的变化。通过GraphPad Prism5统计软件，对电导率实验结果进行差异性分析。结果:小檗碱对MRSA的MIC为64 μg/ml；8 μg/ml（1/8 MIC）、16 μg/ml（1/4 MIC）、32 μg/ml（1/2 MIC）、64 μg/ml（1 MIC）、128 μg/ml（2 MIC）小檗碱作用菌体4 h后，电导率分别增加了24.49%、34.59%、208.92%、196.40%及208.68%。透射电子显微镜观察发现低浓度（8 μg/ml；1/8 MIC）小檗碱对细菌无明显破坏作用，MRSA菌体结构完整；中浓度（64 μg/ml，1 MIC）小檗碱作用于MRSA后发现MRSA的细胞壁变薄；高浓度（512 μg/ml；8 MIC）小檗碱诱导MRSA的细胞壁结构大量破坏溶解，菌体内容物大量外泄，导致细菌裂解死亡。结论:小檗碱通过改变MRSA细胞膜通透性及破坏和溶解细胞壁的结构，达到杀灭细菌的作用。

目的:研究铁死亡是否参与大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)减轻肝硬化的过程。方法:2021年6月至12月，选取10只SD大鼠(军事医学科学院动物实验中心提供)腹腔注射橄榄油12周作为对照组，另30只SD大鼠腹腔注射含40%四氯化碳(CCl 4)的橄榄油混合液8周建立大鼠肝硬化模型，采用随机数表法分为模型组、BMMSCs组及小檗碱组( n＝10)，分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、BMMSCs及小檗碱灌胃处理4周，干预结束后检测肝脏功能，苏木精-伊红(HE)及天狼星红染色检测肝脏病理，实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝脏组织Ⅳ型胶原蛋白基因α1(COL4a1)、透明质酸酶1(Hyal1)mRNA，RT-qPCR、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及免疫组织化学检测长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA及蛋白表达，检测丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及Fe 2+含量变化，两组间比较采用 t检验。 结果:采用符合标准的BMMSCs，并成功建立大鼠肝硬化模型。BMMSCs组Ishak评分及分期均低于模型组[评分：(4.00±1.00)比 (11.33±2.08)分、分期：(2.33±0.58)比 (5.67±0.58)， t＝－5.500、－7.071， P<0.05]，肝功能较模型组显著改善[ALT：(44.07±0.60) U/L比 (897.47±14.25) U/L、AST：(65.83±1.39) U/L比 (2 158.73±36.85) U/L、ALB：(39.13±1.29) g/L比 (29.47±1.62) g/L， t＝－103.610、－98.309、8.096， P<0.05]。铁死亡相关结果显示，BMMSCs组较模型组ACSL4、FTH1蛋白表达均升高[ACSL4：(1.17±0.14)比 (0.49±0.12)、FTH1：(0.94±0.07)比 (0.38±0.07)， t＝6.458、9.667， P<0.05]，但GPX4蛋白表达升高[(0.75±0.06)比 (0.41±0.09)， t＝5.253， P<0.05]，mRNA水平与蛋白表达呈现一致；BMMSCs组较模型组MDA及Fe 2+的生成均增加[MDA：(0.41±0.03) μmol/mg比 (0.21±0.03) μmol/mg、Fe 2+：(5.84±0.26) nmol/mg比 (2.64±0.14) nmol/mg， t＝8.464、18.700， P<0.05]，GSH的生成减少[(102.08±1.30) μg/ml比 (220.11±1.68) μg/ml， t＝－96.163， P<0.05]，差异均有统计学意义，铁死亡指标表达上小檗碱组与BMMSCs组相似。 结论:铁死亡参与了BMMSCs改善大鼠肝硬化过程，其机制可能与BMMSCs破坏过氧化与抗过氧化平衡相关。

目的 探索经方四妙丸防治高尿酸血症痛风的药效物质.方法 建立高尿酸血症药理模型,采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive-MS)分析四妙丸体内外化学成分;以入血成分为基础,采用网络药理学构建四妙丸调控高尿酸血症痛风"活性成分-靶点-通路"网络;以关键活性成分与高尿酸血症痛风关键靶点尿酸生成酶(XDH),尿酸转运体(ABCG2、GLUT9、OAT1、URAT1)及炎症靶点(PTGS2、TLR2、TLR4)进行分子对接,根据对接结果进行实验验证,探讨四妙丸防治高尿酸血症痛风的关键药效物质.结果 UPLC-Q-Exactive-MS法共鉴定四妙丸 89 个成分,包含 74 个入血成分,即候选成分;网络药理学构建了"入血成分-靶点-通路"网络,入血成分匹配 116 个高尿酸靶点和 173 痛风靶点,涉及调节糖脂代谢、氧化应激、炎症反应、ERK1、ERK2 和MAPK级联反应、PI3K信号传导等生物过程;调节血脂与动脉粥样硬化、凋亡、AGE-RAGE、TNF、PI3K-Akt、MAPK、TLRs、JAK-STAT、NF-κB等信号通路,发挥多途径调控高尿酸血症痛风疾病网络的作用.分子对接研究表明小檗碱、黄柏碱、木兰花碱、药根碱、巴马汀、黄柏酮、柠檬苦素、苍术素、花旗松素、白术内酯Ⅲ及β-蜕皮甾酮等成分与尿酸合成酶、尿酸转运体及炎症靶点的亲和力良好,Western Blot验证发现花旗松素具有负调节尿酸盐转运蛋白 1(URAT1)表达的作用,其是四妙丸防治高尿酸血症痛风的主要药效物质.结论 该研究阐述了四妙丸调控高尿酸血症痛风的主要药效物质,可为四妙丸临床应用、质量评价和标准提升提供科学依据.

卵巢癌是妇科肿瘤中最具威胁性的疾病,其繁多的病因和冗杂的机制协同推进疾病发生,可凭借自身独特的微环境模式介导肿瘤细胞增殖、转移的全过程.现阶段卵巢癌的临床治疗以肿瘤细胞减灭术联合铂类化疗药物为主,但药物的副作用及多药耐药性导致复发率居高不下.为了探寻具有较少副作用或减少传统化疗药物副作用的新方法,研究者尝试在肿瘤诊治过程中采取中药联合治疗.经证实,中药单体可借助对微环境内肿瘤细胞、免疫细胞、缺氧诱导因子、血管内皮生成因子、炎性介质及相应信号通路的调节来延缓肿瘤进展,发挥抑癌功能.小檗碱作为众多中草药所含有的一种常见活性成分,具有的肿瘤细胞敏感性使其通过不同机制发挥抗肿瘤作用,可逆转铂类耐药,降低卵巢癌的复发率.本文通过回顾文献,梳理和总结小檗碱作用于肿瘤微环境的实验研究,认为小檗碱能遏制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,主要依靠调控核转录因子-κB(NF-κB)和Janus激酶/信号转导及转录激活因子(JAK/STAT)、改善炎性及缺氧微环境、诱导细胞凋亡与细胞周期停滞;同时,对小檗碱在卵巢癌微环境中的作用位点和机制进行整合讨论,以期延伸对前沿药物研发的新思路,为卵巢癌临床治疗和预后提供理论依据.