目的:本研究旨在开发一种无需破坏细胞壁，准确、特异鉴别耳念珠菌及其近缘菌的新技术。方法:于2021年在军事科学院军事医学研究院进行本研究。以柠檬酸钠还原法制备表面增强拉曼光谱（SERS）基底材料，通过SERS检测，使用SIMCA 14.1（瑞典Umetrics公司）软件对采集的SERS指纹谱数据进行正交偏最小二乘判别（OPLS-DA）分析。对4株耳念珠菌、4株希木龙念珠菌、3株 Candida pseudohaemulonii和4株 Candida duobushaemulonii进行有效检测和鉴别。 结果:在95%可信区间内，样本分析结果呈椭圆形。本研究所测的4种念珠菌可以很好地分开。 R2X（cum）=0.629， R2Y（cum）=0.947， Q2（cum）=0.915， R2X、 R2Y、 Q2均为>0.5，且趋近于1，说明本研究的模型建立良好，且该模型具有较好的预测能力。拉曼光谱数据的十折交叉检验结果显示模型训练数据和测试数据的准确率均为100%，本研究建立的模型具有较好的分类能力，该方法能准确地检测和鉴别耳念珠菌及其近缘菌株。 结论:本研究开发了一种无需破坏细胞壁，准确、特异、快速鉴别耳念珠菌及其近缘菌的新技术，成本低，操作简单，在临床检验上具有良好的应用潜力。

目的:分析新生儿侵袭性真菌感染(invasive fungal infection，IFI)的临床表现和病原体情况，为防治新生儿真菌感染提供依据。方法:回顾性分析2009年7月至2018年12月温州医科大学附属第二医院新生儿重症监护治疗病房收治的90例新生儿IFI的流行病学资料、病原学检查、临床特点和治疗转归等。研究期间总住院病例数为23 179例，以院内开始对高危新生儿实施真菌感染预防措施的时间为界限，将2009年7月1月至2014年12月31日收治住院的患儿设为A组，2015年1月1日至2018年12月31日收治的患儿设为B组，比较两组患儿的IFI发病率。计数资料比较采用 χ2检验。 结果:90例IFI患儿发病主要集中于6月至8月，共55例(61.1%)。早产儿(胎龄<37周)75例(83.3%)，出生体质量<1 000 g的患儿有23例(25.6%)，1 000～<1 500 g的患儿有36例(40.0%)。23 179例患儿中，A组8 239例，B组14 940例。IFI总发病率为0.39%(90/23 179)，超低出生体质量儿(<1 000 g)和极低出生体质量儿(1 000～<1 500 g)IFI发病率分别为5.64%(23/408)、1.99%(36/1 805)。A组患儿IFI总发病率为0.72%(59/8 239)，高于B组的0.21%(32/14 940)，差异有统计学意义( χ2＝35.517， P<0.01)。A组中出生体质量<1 000 g的患儿IFI发病率为9.66%(17/176)，高于B组的2.59%(6/232)，差异有统计学意义( χ2＝9.412， P＝0.020)。发生IFI前的危险因素暴露包括使用广谱抗菌药物89例(98.9%)、肠外静脉营养89例(98.9%)、经外周静脉穿刺的中心静脉导管置管74例(82.2%)、有创机械通气59例(65.6%)、有外科手术史26例(28.9%)等。IFI的临床表现不典型，74例(82.2%)表现为精神反应差，65例(72.2%)氧饱和度频繁波动，37例(41.1%)频发呼吸暂停，36例(40.0%)发热。69例(76.7%)C反应蛋白升高，32例(35.6%)发生血小板计数下降。90例IFI患儿标本共培养出92株真菌菌株，病原菌主要为念珠菌(87.0%，80/92)，其中34株(37.0%)为希木龙假丝酵母菌，18株(19.6%)为近平滑假丝酵母菌，10株(10.9%)为白念珠菌。经抗真菌感染治疗后，治愈或好转72例(80.0%)，死亡4例(4.4%)，放弃治疗或自动出院14例(15.6%)。 结论:IFI好发于早产儿，尤以超低出生体质量儿和极低出生体质量儿为主，临床表现无特异性，且发病主要集中在炎热的夏季。非白念珠菌感染逐年增多，成为主要致病菌。应针对高危因素进行早期识别、预防和治疗IFI。

目的 克隆希木龙念珠菌中药外排泵基因(CDR1),为探讨希木龙念珠菌的耐药机制奠定基础.方法 首先从NCBI基因数据库中找到已知的白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌Cdr1蛋白的氨基酸保守序列,并设计简并引物,PCR扩增获得希木龙念珠菌CDR cDNA部分片段,接着使用RACE方法分别扩增其5'和3'端序列得到完整的CDR1编码序列(CDS).结果 简并PCR扩增得到预期2 210bp大小的片段;5'RACE和3'RACE分别得到CDR1 cDNA 5'和3'端片段,经纯化、克隆、测序、比对和拼接分别得到两株菌完整的CDR1 cDNA序列;其编码的蛋白序列经比对发现与其它念珠菌的Cdr1蛋白高度同源.结论 利用简并PCR联合RACE方法能够有效、准确地克隆出希木龙念珠菌CDR1基因.

目的 了解念珠菌血症的病原菌和科室分布及药敏结果,为临床念珠菌血症病原学诊断和合理使用抗真菌药物提供依据.方法 对我院2014年1月至2017年6月间血培养分离的念珠菌进行菌谱分布及耐药性分析,对相关患者进行临床资料的回顾性分析.结果 从17 391份送检的血培养标本中共分离培养念珠菌326株(1.9％).我院念珠菌血症好发于＞65岁的老年患者(39.6％),男性居多(61.35％).念珠菌血症患者主要来自外科重症监护病房(23.93％)和胃肠肿瘤外科(15.03％)等外科手术科室.病原菌主要为近平滑念珠菌(133株,40.80％)、季也蒙念珠菌(120株,36.81％)和白念珠菌(33株,10.12％),少见念珠菌包括克柔、葡萄牙和希木龙念珠菌.所有念珠菌对5-氟胞嘧啶和两性霉素B均敏感,而白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和希木龙念珠菌对唑类药物出现不同程度耐药.结论 念珠菌血症在医院感染中呈增多趋势,且部分菌株出现了对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑耐药的情况,应引起临床医生的足够重视.

目的 评估中国医院侵袭性真菌监测网(CHIF-NET)2010-2015年收集的希木龙念珠菌复合体原始鉴定、Vitek MS和Bruker MS基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定结果.方法 收集CHIF-NET 2010-2015年40株希木龙念珠菌和5株假希木龙念珠菌,所有菌株均经过分子生物学方法进行复核鉴定确认.以复核鉴定结果作为"金标准",评估各医院原始常规方法鉴定结果,并评估Vitek MS和Bruker MS对希木龙念珠菌复合体的鉴定性能.结果 与分子生物学复核鉴定结果相比,希木龙念珠菌的原始鉴定准确率为47.5％,分别有15％ 的菌株被显色培养,ATB Rapid ID32C,API 20C或Vitek 2 Compact错误鉴定为奥默毕赤酵母和新型隐球菌;常规鉴定方法无法鉴定假希木龙念珠菌,其中3株被错误鉴定为希木龙念珠菌;与分子生物学鉴定结果相比,Vitek MS IVD2.0和Bruker MS DB 5989对希木龙念珠菌的鉴定准确率分别为100.0％ 和57.5％.Vitek MS IVD 2.0数据库中无假希木龙念珠菌的参考谱图,故将5株菌全部错误鉴定为希木龙念珠菌,且可信度>90％.Vitek MS RUO数据库中无希木龙念珠菌复合体参考谱图,故无鉴定结果.Bruker MS DB 5989对假希木龙念珠菌的菌种鉴定准确率为20％.Bruker MS自建库后对所有菌株均能正确鉴定到种水平.结论 该研究率先在国内评估了Vitek MS与Bruker MS鉴定希木龙念珠菌复合体的性能,对于少见菌种的鉴定可通过增加数据库质谱谱图提高质谱的鉴定能力.

目的 分析酵母菌血流感染菌种分布和抗真菌药物的敏感性,为临床诊治提供依据.方法 回顾性分析北京协和医院2014年1月～2018年12月血培养鉴定结果为酵母菌的临床资料,对菌种分布、抗真菌药的敏感性、阳性报警时间、科室分布等进行分析.结果 血培养中共分离非重复酵母菌206株.真菌瓶、需氧瓶和厌氧瓶酵母菌的阳性检出率分别为1.32％(79/6003),0.43％(371/85855)和0.06％(47/77168).排在前3位的念珠菌分别为白念珠菌72株(34.95％),热带念珠菌42株(20.39％)和光滑念珠菌39株(18.93％);少见菌包括季也蒙念珠菌、毕赤酵母菌、葡萄牙念珠菌、酿酒酵母、郎比可念珠菌、尼瓦利亚念珠菌、红酵母和希木龙念珠菌.我院酵母菌血流感染好发于>60岁的老年患者(42.23％),男性115例(55.83％).酵母菌血流感染前3位科室为急诊科41株(19.90％),内科ICU和外科ICU均为36株(17.48％).阳性报警时间从长到短依次为:光滑念珠菌(55.36±26.87)h,近平滑念珠菌(52.58±45.94)h,白念珠菌(49.17±35.37)h和热带念珠菌(23.38±19.32)h.白念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌对氟康唑敏感率分别为98.61％、97.44％、89.66％和71.43％.结论 本院酵母菌血流感染以白念珠菌为主,绝大多数念珠菌对抗真菌药具有较高敏感性,热带念珠菌的耐药率相对较高.

希木龙念珠菌Candida haemulonii是一种与耳念珠菌亲缘关系十分相近的物种.近年来,由其引发的侵袭性真菌疾病的发病率不断升高.作为一种多重耐药真菌,希木龙念珠菌对常见抗真菌药物的耐药性甚至超过耳念珠菌.体外药敏试验证实大部分希木龙念珠菌菌株对唑类、多烯类以及棘白菌素类等抗真菌药物耐药,尤其是对两性霉素B具有天然抗性.不仅如此,临床传统的生化方法难以对该菌准确鉴定,常用的商品化鉴定产品往往将其错误鉴定为毕赤酵母或者新型隐球菌.为了进一步加深对希木龙念珠菌的认识,本文结合国内外的流行病学数据与研究进展,从感染现状、生物学特征、耐药性进行综述,同时总结该菌目前诊断、治疗和预防措施.

目的 探讨腹部大手术后希木龙念珠菌血症的临床表现、感染特点、危险因素、治疗效果及转归等情况.方法 收集2018年3月—2021年8月平顶山市第一人民医院普外三科腹部大手术后13例希木龙念珠菌血症患者的临床特点、血培养结果、药敏结果、治疗转归等资料进行回顾性分析.结果 13例患者平均年龄66岁,男6例、女7例,11例(84.6％)患恶性肿瘤,平均手术时间187 min,平均住院时间28.9 d.所有患者均有经外周静脉穿刺中心静脉置管(PICC)、肠外营养及腹腔引流管.13例希木龙念珠菌血症患者术后感染前均使用抗生素,其中11例使用3种抗生素,2例使用4种抗生素,使用时间5～17 d,平均8.5 d.12例患者出现低热,11例纳差、乏力,5例腹胀、呕吐.7例患者真菌G试验结果明显升高.希木龙念珠菌体外对5-氟胞嘧啶、氟康唑、伏立康唑、两性霉素B耐药率高达76.9％,对卡泊芬净、米卡芬净的敏感率较高,分别为92.3％、100％.结论 腹部大手术后希木龙念珠菌血症临床表现、辅助检查无特异性,发生的危险因素可能为腹腔引流管的置入、手术时间长、PICC的置入、肠外营养、低蛋白血症、恶性肿瘤、抗菌药物使用等,对高危患者应关注希木龙念珠菌感染的可能.

耳念珠菌(Candidaauris)可导致人体严重的侵袭性感染,自2009年日本首次报道以来,全球呈快速流行趋势,甚至暴发多次院内感染[1-3].按照美国疾病预防控制中心(Centers for Disease Con-trol and Prevention,CDC)暂定的耳念珠菌耐药折点(氟康唑MIC≥32 mg/L、两性霉素B MIC≥2 mg/L、卡泊芬净MIC≥2 mg/L),临床分离的耳念珠菌对这3类常用抗真菌药物往往表现出耐药,甚至泛耐药,故可选择的治疗方案非常有限[4].

目的 探讨早产儿多重耐药希木龙念珠菌血流感染的临床特征、治疗及预后.方法 选择2017年10月间本院新生儿重症监护病房(NICU)在住院期间发生的多重耐药希木龙念珠菌血流感染早产儿的临床资料进行回顾性分析,并复习相关文献.结果 共3例患儿,为极早/超早产儿,出生胎龄分别为25周+1、30周、30周,出生体重分别为725 g、1000 g、1070 g,发生感染时间为入院45 d、24 d、28 d,均行经外周静脉穿刺中心静脉置管(PICC),发生感染前使用过广谱抗细菌药物和低剂量氟康唑预防真菌感染.血液培养共检出4株和PICC导管尖端检出2株希木龙念珠菌,均对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、5-氟胞嘧啶耐药,但对米卡芬净敏感,3例用氟康唑和/或伏立康唑临床病情无改善,最终均改用米卡芬净治疗痊愈,且未见明显肝肾、血液毒副作用.结论 应警惕极早/超早产儿在氟康唑预防真菌感染的过程中耐药非白念珠菌血症的发生,多重耐药希木龙念珠菌血流感染应用米卡芬净治疗安全有效.