目的:分析耳念珠菌的分离及对抗真菌药物的耐药性，为耳念珠菌感染的耐药性监测和院感防控提供参考。方法:采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统，对南方医科大学南方医院2023年9—12月10例临床患者分离的10株耳念珠菌进行鉴定，并分析其对多种抗真菌药物的耐药性、标本来源及患者预后。结果:分离的10株菌株质谱鉴定结果均为耳念珠菌，药敏试验提示10株耳念珠菌对氟康唑均耐药，3株对两性霉素B耐药，对棘白菌素类药物均敏感；样本来源多样；除2例状态良好、1例病情稳定出院、1例死亡外，其余6例患者因病情恶化主动出院。结论:质谱能够准确鉴定耳念珠菌，耳念珠菌对氟康唑耐药性高，对棘白菌素无耐药性。

耳念珠菌是近年来新发现的病原体，不仅鉴别困难、致死率高、易导致院内传播，还可对多种抗真菌药物产生耐药性。但其耐药机制尚不十分明确。本文综述了 ERG11的错义突变或过表达、外排泵、 TAC1 B突变、额外的5号染色体的获得、Hsp90及生物膜形成在耳念珠菌对唑类药物的耐药性产生中所起的作用，以及耳念珠菌对其他药物包括棘白菌素类、多烯类、核苷类似物及丙烯胺类的耐药机制。

目的:本研究旨在开发一种无需破坏细胞壁，准确、特异鉴别耳念珠菌及其近缘菌的新技术。方法:于2021年在军事科学院军事医学研究院进行本研究。以柠檬酸钠还原法制备表面增强拉曼光谱（SERS）基底材料，通过SERS检测，使用SIMCA 14.1（瑞典Umetrics公司）软件对采集的SERS指纹谱数据进行正交偏最小二乘判别（OPLS-DA）分析。对4株耳念珠菌、4株希木龙念珠菌、3株 Candida pseudohaemulonii和4株 Candida duobushaemulonii进行有效检测和鉴别。 结果:在95%可信区间内，样本分析结果呈椭圆形。本研究所测的4种念珠菌可以很好地分开。 R2X（cum）=0.629， R2Y（cum）=0.947， Q2（cum）=0.915， R2X、 R2Y、 Q2均为>0.5，且趋近于1，说明本研究的模型建立良好，且该模型具有较好的预测能力。拉曼光谱数据的十折交叉检验结果显示模型训练数据和测试数据的准确率均为100%，本研究建立的模型具有较好的分类能力，该方法能准确地检测和鉴别耳念珠菌及其近缘菌株。 结论:本研究开发了一种无需破坏细胞壁，准确、特异、快速鉴别耳念珠菌及其近缘菌的新技术，成本低，操作简单，在临床检验上具有良好的应用潜力。

2例患儿分别为7岁3月龄男童、1岁3月龄女童，分别以“反复咳嗽、咳痰、吞咽困难”和“发热、左侧腋下淋巴结肿大、口腔溃疡”起病。例1主要表现为反复肺炎、中耳炎、支气管扩张、慢性皮肤黏膜念珠菌病和身材矮小，例2主要表现为全身播散性结核病和口腔念珠菌病。2例患儿均有血液系统表现，例1既往有噬血细胞综合征病史，入院后血细胞分析示贫血，例2全血细胞减少，直接抗人球蛋白实验和抗血小板抗体阳性；2例患儿c-ANCA均阳性，例2胰岛素自身抗体及胰岛细胞抗体阳性。2例患儿基因检测均为STAT1基因杂合变异，核苷酸变化为c.1154 C>T，氨基酸改变p.T385M，诊断为STAT1基因功能获得性变异免疫缺陷。

儿童耳真菌病的发病率逐渐上升，多重耐药耳念珠菌广泛流行。然而儿童耳真菌病早期诊断相对困难，容易导致误诊和漏诊。本综述基于国内外相关研究，从儿童耳真菌病的流行病学、疾病诱因与危险因素、病原微生物、诊断与治疗等方面对该病进行综合评述，以提高对儿童耳真菌病的认识。

耳念珠菌(Candida auris)是一种2.5～5.0 μm的卵圆形芽殖酵母.在念珠菌属中,目前已知能引起人类感染的只有约10％,抗真菌药物的普遍使用导致除白念珠菌外的其他念珠菌感染在临床病例中的检出越来越多;耳念珠菌在近年来尤为瞩目,原因在于其多重耐药性和强大的环境生存能力,该菌会在易感人群间广泛播散,给临床治疗带来挑战[1].

目的 探讨阿萨希毛孢子菌与西弗射盾子囊霉的实验室鉴定与体外抗真菌药敏特点,为临床用药、准确鉴定和流行病学研究提供依据.方法 收集2017年1月-2022年9月广东省人民医院临床分离的2种少见酵母样真菌,其中阿萨希毛孢子菌54株,西弗射盾子囊霉23株,复苏后进行形态学鉴定、生化鉴定和质谱鉴定,同时采用FUNGUS-3 MIC法测定5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的最小抑菌浓度(MIC).结果 阿萨希毛孢子菌主要感染65岁以上人群(46.30％),感染部位以创面感染(27.78％)与尿路感染为主(22.22％),主要分布于外科(35.19％)和内科(35.19％);而西弗射盾子囊霉感染患者主要以18～40岁(39.13％)和41～65岁(47.83％)两个年龄段为主,感染部位以耳道为主(78.26％),分布于耳鼻喉外科病区(60.87％)和耳聋专科门诊(26.09％);在形态学鉴定方面,2种真菌菌落均为白色凸起,呈镶嵌生长,其中阿萨希毛孢子菌生长速度快于西弗射盾子囊霉,菌落革兰染色可见关节孢子、关节菌丝、真假菌丝及芽生孢子,而西弗射盾子囊霉可见分枝分隔菌丝和单细胞、卵圆形的芽生孢子.在生化鉴定方面,阿萨希毛孢子菌尿素酶阳性,可水解七叶苷,同化多种糖类化合物,而西弗射盾子囊霉尿素酶阴性、不水解七叶苷,但可同化多种碳水化合物.微生物质谱对阿萨希毛孢子菌和西弗射盾子囊霉的鉴定率分别为96.30％和91.30％,具有良好鉴定效果;在体外药敏结果方面,两种真菌对5-氟胞嘧啶均表现出高MIC值,其中54株(100％)阿萨希毛孢子菌MIC值均≥4 μg/mL,23株(100％)西弗射盾子囊霉MIC值均≥4 μg/mL;同时也需警惕2种真菌对氟康唑出现高MIC值的情况,其中7株(12.97％)阿萨希毛孢子菌MIC值均≥4 μg/mL,16株(69.56％)西弗念珠菌MIC值≥16 μg/mL;两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑则整体上表现出较低的MIC值(≤2 μg/mL),表现出较好的体外活性.结论 阿萨希毛孢子菌和西弗射盾子囊霉的实验室鉴定与体外药敏结果具有不同特点,对其实现准确鉴定和进行抗真菌药敏试验,对临床用药、实验室鉴定和流行病学的研究具有重要意义.

目的 观察参柏祛毒袋泡剂抗炎镇痛抑菌药效学和药物安全性情况.方法 (1)抗炎实验:采用小鼠耳廓肿胀法,选取昆明小鼠60只,体质量18～24 g,按体质量分层使用随机数字表分为空白组、参柏高剂量组(1.750 g生药/ML)、参柏中剂量组(0.875 g生药/ML)、参柏低剂量组(0.438 g生药/ML)、阿司匹林组(100 mg/kg)5组,每组12只.涂抹70 μL二甲苯在预先给药的小鼠右耳上,处死后对比左右耳片重量,计算肿胀度.(2)镇痛实验:采用热板致痛法,选取昆明小鼠48只,雌性,体质量18～24 g,按体质量分层使用随机数字表随机分成空白组、参柏高剂量组(1.750 g生药/ML)、参柏中剂量组(0.875 g生药/ML)、参柏低剂量组(0.438 g生药/ML)4组,每组12只.测定小鼠基础痛阈,再以40℃药浴各组分别泡足20 min,测量给药后5个时间点小鼠痛阈,计算痛阈提高百分率.(3)体外抑菌实验:将观察药制备成原液、1∶1、1∶2、1∶4、1∶8 5个浓度梯度,分别加入5种共25菌株,培养后读取各组最低抑菌浓度值.(4)安全性实验:采用家兔皮肤刺激性实验,选取健康大耳白家兔16只,使用随机数字表随机分为单次给药正常皮肤组、破损皮肤组及多次给药正常皮肤组、破损皮肤组4组,造模破损皮肤组,一侧去毛区涂参柏祛毒袋泡剂0.5 Ml,另一侧对照区涂等量蒸馏水作空白对照,单次给药(1次/d)和多次给药(1次/d,连续7 d)进行对比,观察皮肤刺激性.采用实验家兔皮肤急毒实验,选取新西兰家兔24只,使用随机数字表随机分为完整组和破损皮肤组,每组再随机分为参柏高、低剂量及空白组,共6组,药物均匀涂抹于家兔背部除毛区,于去掉受试药物后1、24、48、72 h至14 d,每日观察动物皮肤及全身情况做出评价.结果 (1)抗炎实验结果提示,参柏祛毒袋泡剂对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有显著抑制作用,参柏高、中剂量组小鼠耳廓肿胀度低于空白组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).(2)镇痛实验结果提示,参柏祛毒袋泡剂对热刺激所致小鼠疼痛有明显的镇痛作用,参柏高剂量组给药后0.5～4.5 h较空白组小鼠痛阈高(P＜0.05,P＜0.01),参柏中剂量组给药后1.5～3.5 h较空白组小鼠痛阈高(P＜0.05).(3)体外抑菌实验结果提示,参柏祛毒袋泡剂对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌有不同程度的抑制作用,且对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用最强.(4)安全性实验结果提示,参柏祛毒袋泡剂对家兔正常皮肤和破损皮肤,单次给药和多次给药均无皮肤刺激性,与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05);对家兔完整皮肤和破损皮肤组给药,观察至14 d,均无不良反应,参柏高、低剂量组与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 参柏祛毒袋泡剂具有明显的抗炎、镇痛、抑菌作用,且药物外用安全.

目的 探讨依维莫司单独及联合伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑和氟康唑对耐药念珠菌及耳念珠菌的体外作用.方法 于2022年3-6月,采用美国临床实验室标准研究所M27-A3微量稀释法和微量肉汤稀释棋盘技术研究依维莫司联合伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑及氟康唑对耐药念珠菌及耳念珠菌的体外治疗作用.通过测定最低抑菌浓度(MIC)和部分抑菌浓度指数来确定协同效应.结果 依维莫司单药治疗22株耐药念珠菌及10株耳念珠菌的MIC为0.250～4.000 mg/L、1.000 mg/L,伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟康唑单独使用对22株耐药念珠菌MIC范围分别为0.125～4.000 mg/L、<0.125～2.000 mg/L、0.063～2.000 mg/L、1.000～64.000 mg/L,伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑单独使用对10株耳念珠菌MIC范围分别为0.500～2.000 mg/L、0.125～8.000 mg/L、0.125～1.000 mg/L.当依维莫司与伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟康唑联合使用时,对耐药念珠菌的协同作用分别是9株(40.90%)、4株(18.18%)、8株(36.36%)、9株(40.90%).当依维莫司联合唑类作用于耳念珠菌,未发现任何拮抗作用.结论 依维莫司单独使用对耐药念珠菌及耳念珠菌菌株具有明显抗真菌作用,同时依维莫司联合唑类作用于耐药念珠菌时,表现出良好的协同作用,且没有拮抗作用,其进一步提升其抗耐药念珠及耳念珠菌的作用.

目的 优化细辛精油水蒸气蒸馏法提取工艺,并分析其组分及抑菌效力.方法 在单因素、Plackett-Burman、最陡爬坡试验基础上,以蒸馏时间、液料比和粉碎度为影响因素,出油率为评价指标,响应面法优化提取工艺.GC-MS法分析组分.参照2020 年版《中国药典》检测抑菌效力.结果 最佳条件为蒸馏时间3.9 h,液料比20∶1,粉碎度 20 目,出油率为3.5%.细辛精油主要组分为酚类、醚类等化合物,当浓度分别为9、9、29 μL/mL时对大肠杆菌、白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果可达 2020 年版《中国药典》规定的耳用、鼻用、皮肤给药和吸入制剂抑菌效力"A"标准.结论 优化后的提取工艺及抑菌效力研究结果有助于细辛精油的进一步开发利用.