目的:构建竞争性内源核糖核酸(ceRNA)以揭示尿酸盐肾沉积分子调控机制.方法:复制尿酸盐肾沉积大鼠模型,采用高通量核糖核酸(RNA)测序技术分析尿酸盐肾沉积大鼠肾组织中微小核糖核酸(miRNA)的表达,并筛选出差异表达的 miRNA.利用 TargetScan、StarBase、miRDB、miRWalk 4 个数据库预测 miRNA 的靶基因,通过 DAVID 和 Metascape 数据库对靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.运用Cytoscape构建主要信号通路的ceRNA调控网络.结果:测序共检测到14个差异miRNA(均为上调),该差异miRNA的靶基因主要富集在细胞衰老和癌症相关信号通路;构建获得的ceRNA调控网络含47个长链非编码RNA(lncRNA)节点、10个miRNA节点、27个信使RNA(mRNA)节点,该调控网络中 miR-155-5p、miR-132-3p、miR-503-5p、miR-146b-5p 和 miR-212-5p 为排名前 5 的 HUB 基因.结论:本研究通过筛选尿酸盐肾沉积差异miRNA,构建了尿酸盐肾沉积ceRNA网络,为尿酸盐肾沉积机制探讨提供了新思路.

目的 探讨血清微小核糖核酸-503(miR-503)和微小核糖核酸-520h(miR-520h)对妊娠期糖尿病(GDM)患者并发子痫前期(PE)的诊断价值.方法 选取2019年12月至2021年12月于唐山中心医院产科定期产检并建档的GDM患者102例作为研究对象,根据疾病类型分为GDM+PE组(53例)、GDM组(49例).另选取同期于唐山中心医院进行定期产检并分娩的57例健康孕妇作为正常妊娠组.比较3组糖脂代谢相关指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)]水平及血清miR-503、miR-520h表达水平、血清胱抑素C(CysC)、同型半胱氨酸(Hcy)水平;比较3组不良妊娠结局.采用多因素Logistic回归分析GDM患者并发PE的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-503、miR-520h单独及2项指标联合检测对GDM并发PE的诊断价值.结果 3组孕周、年龄、孕前体质量指数、LDL-C水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).GDM+PE组TC、TG、FFA水平均明显高于GDM组和正常妊娠组,HDL-C水平明显低于GDM组和正常妊娠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).GDM组TC、FFA水平均明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).GDM+PE组和GDM组FINS、FBG、2 h PG、HbA1c水平均明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).GDM+PE组血清miR-503、miR-520h表达水平、CysC和Hcy水平均明显高于GDM组和正常妊娠组,差异均有统计学意义(P＜0.05),GDM组血清miR-503、miR-520h表达水平及CysC和Hcy水平均明显高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P＜0.05).GDM+PE组不良妊娠结局总发生率为62.26％(33/53),GDM 组为40.82％(20/49),正常妊娠组为10.53％(6/57),GDM+PE组不良妊娠结局总发生率明显高于GDM组和正常妊娠组,差异均有统计学意义(x2=4.692、32.125,P＜0.05),GDM组不良妊娠结局总发生率明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义(x2=13.059,P＜0.05).3组孕妇不良妊娠结局中产后出血、早产或过期产、胎盘早剥、新生儿窒息、宫内生长受限的发生率比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,CysC水平升高、Hcy水平升高、miR-503表达水平升高和miR-520h表达水平升高均为GDM并发PE的危险因素(P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-503、miR-520h单独及2项指标联合检测诊断GDM 并发PE的曲线下面积(AUC)分别为0.755、0.847、0.935,2 项指标联合检测的 AUC 大于 miR-503、miR-520h 单独检测(Z2项联合miR503=4.210、Z2项联合-miR-520h=2.708,P＜0.001、0.007).结论 GDM 并发 PE 患者血清 miR-503、miR-520h 表达水平升高,与妊娠不良结局呈正相关,二者联合检测对诊断GDM并发PE具有重要意义.

目的:探究心脏死亡器官捐献(DCD)大鼠模型肝脏和血清微小RNA(miRNA)表达特征。方法:采用随机数字表法将30只SD大鼠分为DCD组和对照组，每组15只。采用4%水合氯醛腹腔注射进行麻醉后，经腹正中切口剪断膈肌，诱导大鼠低血压和缺氧，进而诱发心脏停跳，构建DCD大鼠模型。对照组未剪断膈肌，麻醉与手术方法同DCD组。模型构建成功后经下腔静脉采血并获取肝脏组织。采用miRNA芯片检测肝脏和血清miRNA表达。采用随机数字表法从DCD组与对照组肝脏差异表达的miRNA中选取部分miRNA，通过实时定量PCR(qRT-PCR)进行验证。选取经qRT-PCR验证的肝脏组织中差异表达的miRNA以及DCD组与对照组肝脏和血清差异表达最显著的部分miRNA，通过miRDB数据库分析预测其靶基因，并进行功能分析。组间正态分布计量资料比较采用成组t检验或单因素方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。结果:DCD组血清ALT、AST和乳酸脱氢酶分别为(76±12)、(286±56)和(2 539±122)U/L，对照组分别为(44±11)、(124±48)和(1 658±126)U/L，差异均有统计学意义(t＝4.622、16.916和16.315，P均<0.05)。DCD组大鼠肝脏组织中38个miRNA表达均高于对照组(Fold Change均>2，P均<0.05)；90个miRNA表达下调(Fold Change均<0.5，P均<0.05)。DCD组大鼠血清10个miRNA表达均高于对照组(Fold Change均>2，P均<0.05)；11个miRNA表达下调(Fold Change均<0.5，P均<0.05)。miR-100-5p、miR-540-3p和miR-10b-5p在肝脏与血清中同步表达上调(Fold Change均>2，P均<0.05)；miR-1843a-5p和miR-342-5p同步表达下调(Fold Change均<0.5，P均<0.05)。qRT-PCR检测结果示：DCD组肝脏组织miR-183-3p、miR-10b-5p、miR-487b-5p、miR-100-5p、miR-503-5p、miR-540-3p和miR-219a-2-3p相对表达均高于对照组，差异均有统计学意义(t＝2.808、6.860、10.106、20.594、3.697、10.433和5.828，P均<0.05)；miR-3559-3p、miR-150-5p、miR-223-3p、miR-340-3p、miR-342-5p、miR-664-2-5p、miR-219b和miR-224-3p相对表达均低于对照组，差异均有统计学意义(t＝-2.726、-3.318、-5.257、-4.845、-4.300、-5.082、-4.546和-3.481，P均<0.05)。miRNA靶基因预测分析显示，上述miRNA的靶基因包含一系列与DCD诱导肝损伤相关的重要生物学过程相关基因。结论:DCD大鼠肝脏和血清miRNA呈现特异性表达谱，这些失调的miRNA可能成为无创评估DCD供肝损伤的潜在生物标志物。