目的:分析长链非编码RNA（LncRNA）浆细胞瘤变异易位基因1（PVT1）通过靶基因调控乳腺癌细胞分化、增殖、侵袭和迁移的机制及临床意义。方法:2018年1月至2019年12月采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌细胞株MCF-7和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A LncRNA PVT1、微小RNA（miR）-1207-5p表达水平；转染PVT1过表达质粒、PVT1慢性干扰质粒和阴性对照质粒至人乳腺癌细胞，检测转染后PVT1和miR-1207-5p表达水平；CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各转染乳腺癌细胞的增殖分化、迁移、侵袭能力；qRT-PCR和Western blotting法检测转染miR-1207-5p后信号传导及转录激活蛋白6（STAT6）和P21 mRNA和蛋白表达水平。结果:乳腺癌细胞PVT1和miR-1207-5p表达水平均明显高于正常乳腺上皮细胞（1.271 ± 0.305比0.023 ± 0.006和1.679 ± 0.347比0.031 ± 0.009），差异有统计学意义（ P<0.01）。转染PVT1过表达质粒乳腺癌细胞PVT1和miR-1207-5p表达水平明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞（2.357 ± 0.271比1.000 ± 0.000和0.103 ± 0.021、3.265 ± 0.375比1.000 ± 0.000和0.265 ± 0.024），转染阴性对照质粒乳腺癌细胞明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染PVT1过表达质粒后48、72、96和168 h乳腺癌细胞增殖能力明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，转染阴性对照质粒乳腺癌细胞增殖能力明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染PVT1过表达质粒后24 h乳腺癌细胞迁移能力和侵袭能力明显高于转染阴性对照质粒和PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，转染阴性对照质粒乳腺癌细胞迁移能力明显高于转染PVT1慢性干扰质粒乳腺癌细胞，差异均有统计学意义（ P<0.05）。转染miR-1207-5p过表达物后STAT6和P21 mRNA均明显低于转染模拟对照物（0.476 ± 0.102比1.000 ± 0.000和0.429 ± 0.097比1.132 ± 0.236），差异有统计学意义（ P<0.01）；转染miR-1207-5p过表达物后STAT6和P21蛋白明显低于转染模拟对照物（0.396 ± 0.104比1.062 ± 0.002和0.434 ± 0.067比1.141 ± 0.218），差异有统计学意义（ P<0.01）。 结论:LncRNA PVT1可能为miR-1207-5p调控的宿主基因，协同通过调控靶基因STAT6影响乳腺癌细胞增殖、分化、侵袭及转移，抑制该基因转录可能为乳腺癌治疗的研究新方向。

目的 探究环状RNA同源域相互作用蛋白激酶3(circ-HIPK3)通过调控微小RNA-1207-5p(miR-1207-5p)促进结直肠癌(CRC)细胞增殖和转移的作用机制.方法 体外培养人CRC细胞系HCT166细胞,分别以pcDNA3.1-NC(空白组)与pcDNA3.1-circ-HIPK3(研究组)转染HCT166细胞48 h,于倒置荧光显微镜下观察转染效率,以不做任何处理的HCT166细胞作为对照组;采用荧光定量PCR检测细胞circ-HIPK3及miR-1207-5p mRNA表达,采用MTT实验及划痕实验分别检测细胞增殖及迁移能力,双荧光素酶实验检测circ-HIPK3与miR-1207-5p的靶向作用,Western blot法检测Wnt/β-catenin通路蛋白表达情况.结果 研究组细胞增殖促进率、划痕愈合率、细胞中circ-HIPK3、miR-1207-5p mRNA相对表达水平及Wnt、β-catenin蛋白表达水平均高于对照组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05),而对照组与空白组上述各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05);双荧光素酶实验结果显示circ-HIPK3上存在miR-1207-5p的结合位点.结论 circ-HIPK3通过下调CRC中miR-1207-5p的相对表达,促进细胞增殖和转移,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin通路有关.

目的 探讨Rh血型系统RHD基因表达相关微小RNA(miRNA),及其在干预RHD基因表达中的作用.方法 利用生物信息学软件TargetScan、PicTar和miRWalk预测靶向作用于RHD基因的miRNA,综合3个数据库的结果选取靶标率最高的5个miRNA进行研究.聚合酶链反应(PCR)扩增RHD基因3'-非编码区(3'-UTR)序列,插入到双酶切的双荧光素酶报告基因载体中,将报告基因载体与miRNA共转染细胞,通过相对荧光素酶活性分析测定miRNA对RHD基因的靶向作用.采用实时荧光定量PCR检测miRNA在RhD阳性及"弱D"表型样本中的表达.结果 成功构建RHD基因3'-UTR双荧光素酶报告基因载体.该报告基因载体与miRNA-566、miR-1183和miR-1207共转染细胞的相对荧光素酶活性与对照比较分别下降了37％(P<0.05)、13％(P<0.05)和14％(P<0.05),提示miRNA-566、miR-1183和miR-1207潜在靶向调控RHD基因.miRNA-566和miR-1183在"弱D"表型样本中的相对表达量显著高于RhD阳性样本(P<0.05).结论 RHD基因3'-UTR双荧光素酶基因报告载体构建成功.miR-566和miR-1183对RHD基因有靶向抑制作用.

目的 探讨长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(LncRNA PVT1)对HL-60细胞生物学行为及柔红霉素敏感性的影响.方法 将HL-60细胞分为对照组、miR-NC组、PVT1-siRNA组、miR-1207-5p inhibitor组和miR-1207-5p mimic组.除对照组细胞不处理外,其余各组细胞分别将miR-NC,PVT1-siRNA,miR-1207-5p inhibitor,miR-1207-5p mimic转染到HL-60细胞中.采用萤光素酶检测试剂分析LncRNA PVT1对微小RNA-1207-5p(miR-1207-5p)和同源形成素样蛋白2(FMNL2)的调控作用,CCK-8法检测细胞存活率,改良Matrigel Boyden室测定法测定细胞侵袭性,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率,MTT法检测细胞对柔红霉素敏感性,实时逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测miR-1207-5p和FMNL2 mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)法检测FMNL2蛋白表达水平.结果 萤光素酶分析结果显示,LncRNA PVT1与miR-1207-5p、miR-1207-5p与FMNL2均存在靶向调节作用;与对照组比较,PVT1-siRNA组LncRNA PVT1表达水平显著降低(P<0.05),miR-1207-5p表达水平显著升高(P<0.05).与对照组比较,miR-1207-5p inhibitor组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著降低,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);miR-1207-5p mimic组细胞存活率、迁移率、侵袭数均显著升高,细胞凋亡率、FMNL2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).与对照组比较,相同质量浓度(0,0.5,1,2,4,8μg/mL)柔红霉素作用下PVT1-siRNA组HL-60细胞活力均显著升高(P<0.05).结论 沉默LncRNA PVT1可使miR-1207-5p表达增加,从而抑制FMNL2表达,导致HL-60细胞恶性生物学行为概率升高,同时降低细胞对柔红霉素的敏感性.