目的:探讨紫草素对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测微小RNA(miR)-637的表达水平；噻唑蓝(MTT)检测Huh-7细胞增殖；Transwell实验检测Huh-7细胞的迁移和侵袭；蛋白质印迹法检测Huh-7细胞中增殖、迁移和侵袭相关蛋白的表达。两组间比较采用 t检验，多组件比较采用单因素方差分析，组内间比较采用SNK- q检验。 结果:肝癌组织中miR-637表达水平低于癌旁组织(0.43±0.05比1.00±0.11， t＝25.840， P<0.05)；1、2、3、4 μg/ml紫草素组Huh-7细胞存活率低于对照组(82.24±7.82、54.15±6.16、43.34±6.35、38.68±5.24比100.00±9.69， t＝4.279、11.980、14.670、16.700， P<0.05)；2 μg/ml紫草素处理组Huh-7细胞的增殖(0.81±0.07比1.46±0.18， t＝10.097， P<0.05)、迁移(79.28±8.12比137.19±14.36， t＝10.531， P<0.05)和侵袭(48.67±5.32比102.52±11.25， t＝12.982， P<0.05)能力低于对照组。过表达miR-637组Huh-7细胞的增殖(0.78±0.08比1.52±0.13， F＝96.865， P<0.05)、迁移(74.12±8.16比134.26±15.69， F＝77.227， P<0.05)和侵袭(74.12±8.16比134.26±15.69， F＝131.214， P<0.05)能力低于miR-NC组。2 μg/ml紫草素+抗miR-637组Huh-7细胞增殖(1.27±0.15比0.75±0.08， F＝65.743， P<0.05)、迁移(116.28±12.53比71.45±7.82， F＝58.264， P<0.05)和侵袭(86.41±9.23比46.32±4.92， F＝113.920， P<0.05)能力高于2 μg/ml紫草素+抗miR-NC组。 结论:紫草素可通过上调miR-637抑制Huh-7细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的:探索SOX13基因来源的环状RNA hsa_circ_0004777的特征分析及功能预测。方法:探究了hsa_circ_0004777的基本特征，包括验证反向剪接位点，RNase R消化实验，细胞内RNA的胞质胞核分布，蛋白翻译潜能的预测。此外，使用生物信息学方法，预测hsa_circ_0004777结合的微小RNA（microRNA，miRNA）以及miRNA的靶基因，并且构建了circRNA-miRNA-mRNA的网络图。再对预测到的miRNA的靶基因进行基因本体论（gene ontology，GO）功能富集分析和信号通路富集分析。结果:hsa_circ_0004777的形成是由SOX13基因第4号外显子反向剪接至第2号外显子，hsa_circ_0004777能抵抗RNase R处理，主要分布在细胞质。生信预测hsa_circ_0004777通过作为hsa-miR-1225-3p、hsa-miR-637、hsa-miR-139-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-384、hsa-miR-660-5p、hsa-miR-942-5p、hsa-miR-331-3p这8个miRNA的海绵来发挥作用；hsa_circ_0004777潜在结合的8个miRNA的靶基因在对聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、DNA模板、骨骼肌细胞分化等生物过程显著富集。结论:成功探索了SOX13基因来源的环状RNA hsa_circ_0004777的特征，并且从circRNA-miRNA-mRNA网络图中预测了它的功能，为进一步研究hsa_circ_0004777奠定了基础，也为更深入研究SOX13提供了思路。

目的 观察过表达微小RNA(miRNA,miR)-637对甲状腺癌细胞TPC-1生物学行为的影响.方法 采用慢病毒转染将过表达miR-637质粒(实验组)和空白质粒(阴性对照组)分别转入TPC-1细胞,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞凋亡率及周期分布,划痕实验和Transwell侵袭实验评价细胞迁移和侵袭能力.结果 实验组TPC-1细胞生长曲线趋势较为平缓,细胞生长速度较阴性对照组显著降低(t =5.840,P=0.028).与阴性对照组[(12.50±1.71)％]比较,实验组[(20.75±0.93)％] TPC-1细胞的凋亡率明显增加(t=19.674,P=0.003).与阴性对照组细胞比较,实验组细胞在48 h后S期下降至23.35％,Ge/M期下降至17.58％.划痕实验及TransweU侵袭实验表明,与阴性对照组细胞比较,实验组的细胞迁移数明显减少(t=-26.186,P=0.001).结论 过表达miR-637能降低TPC-1细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力.

目的 探讨miR-200b-3p通过血管内皮生长因子A(VEGFA)调控胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胰腺癌组织和细胞中miR-200b-3p表达水平;胰腺癌细胞PANC-1分为NC组、miR-200b-3p mimic组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组.CCK-8和Transwell检测胰腺癌PANC-1细胞增殖活力以及细胞迁移和侵袭能力;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡实验检测PANC-1细胞凋亡;Western blotting和双荧光素酶报告基因验证miR-200b-3p与VEGFA的靶向关系.结果 miR-200b-3p在胰腺癌组织和细胞中低表达.PANC-1细胞过表达miR-200b-3p 48 h后,NC组和miR-200b-3p mimic组细胞增殖活性分别为1.250±0.028、0.983±0.044;迁移细胞数分别为402.700±21.530、158.000±17.620,侵袭细胞数分别为478.300±31.050、170.000±32.470,细胞凋亡百分比为(5.280±0.352)％、(7.430±0.393)％;miR-200b-3p mimic组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均显著低于NC组(t=5.060,P=0.007;t=8.796,P=0.001;t=6.863,P=0.002),细胞凋亡百分比显著高于NC组(t=4.076,P=0.015).VEGFA-WT单独转染细胞荧光强度为1.000±0.027,显著高于VEGFA-WT+miR-200b-3p mimic共转染细胞(0.632±0.048;t=6.637,P=0.003).VEGFA-MUT单独转染细胞荧光强度为1.000±0.049,与VEGFA-MUT+miR-200b-3p mimic共转染细胞差异无统计学意义(0.868±0.047;t=1.944,P=0.124).PANC-1细胞过表达miR-200b-3p 48 h后,NC组和miR-200b-3p mimic组中VEGFA相对表达量分别为1.000±0.058、0.762±0.020,miR-200b-3p mimic组显著低于NC组(t=3.908,P=0.017).PANC-1细胞转染si-VEGFA或同时转染si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor 48 h后,NC组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组PANC-1细胞增殖活性分别为1.300±0.058、0.943±0.047、1.143±0.023,迁移细胞数分别为446.000±17.350、206.300±19.360、428.300±30.330,侵袭细胞数分别为510.300±24.550、175.700±24.290、473.700±35.530,组间差异具有统计学意义(F=15.830,P=0.004;F=33.530,P=0.001;F=38.860,P<0.001).si-VEGFA组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力均显著低于NC组(P=0.003,P<0.001,P<0.001),而si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组细胞增殖活性、迁移和侵袭能力与NC组差异无统计学意义(P=0.107,P=0.854,P=0.671).NC组、si-VEGFA组及si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组细胞凋亡百分比分别为(3.810±0.577)％、(7.373±0.482)％、(3.650±0.514)％,组间差异具有统计学意义(F=16.020,P=0.004),si-VEGFA组细胞凋亡百分比显著高于NC组(P=0.007),而si-VEGFA+miR-200b-3p inhibitor组与NC组差异无统计学意义(P=0.975).结论 miR-200b-3p通过靶向下调VEGFA表达,进而抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并促进细胞凋亡.

目的:探讨口腔鳞癌细胞Tca-8113中miR-637靶向RING1对其细胞增殖活性的影响.方法:培养人口腔鳞癌细胞Tca-8113作为对照组,应用Lipofectamine 2000试剂将转染miR-637 NC、miR-637 mimics的Tca-8113细胞分别作为miR-637 NC组、miR-637 mimics组,倒置荧光显微镜检测转染效率,实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)法检测转染后各组miR-637表达情况,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法以及平板克隆法检测各组miR-637细胞增殖情况,通过双荧光素酶报告基因检测miR-637与RING1间的靶向关系,应用免疫印迹法(WB)检测各组RING1蛋白以及增殖相关蛋白PCNA表达水平.结果:qRT-PCR显示,与对照组、miR-637 NC组相比,miR-637 mimics组miR-637表达显著升高(P<0.05);CCK-8实验显示,与对照组、miR-637 NC组相比,miR-637 mimics组转染后48、72、96 h后OD值显著降低(P<0.05);平板克隆法显示,与对照组、miR-637 NC组相比,miR-637 mimics组转染后克隆形成率显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因检测显示共同转染miR-637+WT-RING1后,荧光素酶活性表达受抑制,而转染Neg-miR637+WT-RING1、Neg-miR637+MT-RING1、miR-637+MT-RING1组荧光素酶活性无明显变化;WB结果显示,与对照组相比、miR-637 NC组相比,miR-637 mimics组RING1蛋白显著降低(P<0.05);与对照组相比、miR-637 NC组相比,miR-637 mimics组PCNA蛋白表达显著降低(P<0.05).结论:miR-637可能通过下调RING1表达抑制口腔鳞癌Tac-8113细胞增殖.

目的:探究长链非编码RNA PANDAR(long-chain non-coding RNA PANDAR,PANDAR)促进甲状腺癌生长转移的分子机制.方法:首先运用实时荧光定量PCR测定甲状腺癌患者血清和癌组织中PANDAR表达情况,再通过MTT、流式、Tran-swell等方法测定PANDAR对甲状腺癌细胞生长、凋亡、迁移能力的影响,通过双荧光素酶报告基因实验确定PANDAR的作用靶点为miR-637,最后再测定miR-637在PANDAR对甲状腺癌细胞生长、凋亡和迁移能力中的作用.结果:PANDAR在甲状腺癌患者血清和癌组织中表达明显升高,且PANDAR能明显促进细胞生长和迁移,并抑制细胞凋亡,且PANDAR的作用靶点为miR-637,miR-637能逆转PANDAR诱导的细胞增殖、转移和凋亡减少.结论:PANDAR通过靶向miR-637调节甲状腺癌的增殖和转移.

目的:探讨甲状腺乳头状癌TPC-1细胞中miR-637和AKT3基因的靶向关系,及miR-637对TPC-1细胞侵袭转移能力的影响.方法:利用生物信息学软件预测miR-637与AKT3之间的靶向关系,并采用双荧光素酶报告实验进行验证.TPC-1细胞分别转染miR-637 mimic(miR-637组)和miR-637阴性对照(阴性对照组),以不转染细胞作空白对照.Western blot法检测3组细胞中AKT3蛋白的相对表达量.利用划痕实验及Transwell侵袭实验检测空白对照和miR-637组细胞的迁移及侵袭能力.结果:双荧光素酶报告实验证实miR-637能够结合AKT3 mRNA 3'UTR(P<0.001).miR-637组细胞中AKT3蛋白相对表达量显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.001);miR-637组细胞迁移率和穿膜细胞数均低于空白对照组(P<0.001).结论:miR-637通过靶向负调控AKT3基因的表达,抑制TPC-1细胞的侵袭和迁移能力.

目的 探讨甲状腺癌组织中长链非编码RNA(LncRNA)PANDAR与微小RNA-637(miR-637)的表达水平,并分析其与临床病理参数及预后的关系.方法 选取2015年1月—2017年2月广州中医药大学第三附属医院收治的82例甲状腺癌患者,检测甲状腺癌组织和癌旁组织(距肿瘤组织边缘超过5 cm)中LncRNA PANDAR与miR-637的相对表达量,分析两个指标与患者临床病理特征及预后的关系.结果 甲状腺癌组织中LncRNA PANDAR的相对表达量高于癌旁组织,miR-637的相对表达量低于癌旁组织(P<0.05).LncRNA PANDAR与miR-637的表达呈负相关(r=-0.634,P<0.05).甲状腺癌组织中LncRNA PANDAR、miR-637的表达与肿瘤TNM分期、细胞分化程度、淋巴转移有关(P<0.05).LncRNA PANDAR高表达组3年总生存率低于LncRNA PANDAR低表达组(P<0.05).miR-637高表达组与低表达组3年总生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 甲状腺癌组织中LncRNA PANDAR相对表达量高于癌旁组织,miR-637相对表达量低于癌旁组织,与肿瘤TNM分期、细胞分化程度及淋巴转移有紧密联系,有望成为甲状腺癌诊断、治疗以及评估预后的新的生物学指标.

目的:探究丙泊酚介导微小RNA-637/信号转导及转录活化因子3(miR-637/STAT3)调控肝癌细胞的生长及其机制.方法:正常培养人肝癌细胞株HepG2,随机分为对照组和丙泊酚低、中、高剂量(10、25、50 μg·ml-1)处理组,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,转移小室实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,蛋白质印迹法检测细胞中切割后天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、STAT3及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-637表达水平.结果:与对照组比较,丙泊酚处理组增殖抑制率、凋亡率、cleaved caspase-3及miR-637表达升高,侵袭细胞数、迁移率、Bcl-2/Bax、MMP-2、MMP-9及p-STAT3/STAT3表达降低(P＜0.05),具有剂量依赖性.结论:丙泊酚可介导miR-637/STAT3轴,抑制肝癌细胞的增殖、侵袭与迁移,并诱导其凋亡.

目的 研究小白菊内酯是否通过调控微小RNA-637(miR-637)表达抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移和侵袭.方法 分离培养瘢痕疙瘩成纤维细胞和正常皮肤成纤维细胞.瘢痕疙瘩成纤维细胞分为对照组(未处理)、低、中、高剂量实验组(5,10,20μmol·L-1小白菊内酯)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-637组(转染miR-637 mimic)、PTL+anti-miR-NC组(20μmol·L-1小白菊内酯+转染anti-miR-NC)、PTL+anti-miR-637组(20μmol·L-1小白菊内酯+转染miR-637 inhibitor).用噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,用Transwell法检测细胞的迁移和侵袭情况,用实时定量聚合酶链反应检测miR-637的表达情况.结果 低、高剂量实验组和对照组、miR-NC组、miR-637组、PTL+anti-miR-NC和PTL+anti-miR-637组的增殖能力(光密度值)分别为0.71±0.04,0.39±0.03,0.84±0.05,0.82±0.07,0.44±0.03,0.38±0.03和0.73±0.05,迁移细胞数分别为(93.75±7.35),(58.18±3.57),(124.31±9.87),(125.05±8.08),(63.15±5.04),(57.57±3.23)和(103.79±6.68)个,侵袭细胞数分别为(81.60±6.16),(42.40±3.09),(105.75±7.80),(106.41±9.96),(52.82±4.19),(40.27±4.11)和(90.51±6.96)个,miR-637表达水平分别为1.78±0.15,3.36±0.28,1.00±0.05,1.00±0.07,2.77±0.20,1.00±0.05和0.29±0.03.低、高剂量实验组的上述指标与对照组比较,miR-637组的上述指标与miR-NC组比较,PTL+anti-miR-637组的上述指标与PTL+anti-miR-NC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).正常皮肤成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞中miR-637表达水平分别为1.00±0.08和0.45±0.04,差异有统计学意义(P<0.05).结论 小白菊内酯通过增加miR-637的表达水平,抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移和侵袭.