对41份木豆(Cajanus cajan)种质资源进行种子萌发期抗旱性综合评价,测定发芽特性、活力指数、根系表面积和根系体积等10项指标,通过变异系数分析、相关性分析、主成分分析、隶属函数分析和聚类分析,对其进行萌发期抗旱性综合评价,同时分析干旱胁迫下不同抗旱性木豆的生理响应的差异.结果表明:41份木豆种子萌发期抗旱性差异显著,可将41份木豆种质资源划分成高抗旱型(1份)、抗旱型(10份)、中间型(28份)和敏感型(2份)4个类别.相对活力指数、相对根冠比、相对鲜重和相对根系平均直径可作为木豆萌发期抗旱性评价指标.高抗旱型木豆幼苗的SOD、POD和CAT酶活能力优于其他类别.通过综合评价,筛选出 11 份(D21024、D21035、D21022、D21094、D21031、D21030、D21061、D21134、D21136、D21009、D21023)萌发期抗旱性强的木豆种质,有望在干旱地区进行推广种植.

目的 观察木豆叶芪类提取物对维甲酸导致大鼠骨质疏松的影响.方法 60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、仙灵骨葆阳性药组、木豆叶芪类提取物低、高剂量组.除对照组外,其他各组灌胃给予70mg/kg维甲酸2周制备大鼠骨质疏松模型,造模同时,各给药组均给予相应的药物,连续4周.观察大鼠脏器指数、骨矿含量及骨组织形态学的变化.结果 与模型组比较,木豆叶芪类提取物各剂量组大鼠的肾上腺指数明显升高(P＜0.05,P＜0.01),低剂量组大鼠脾脏指数降低(P＜0.05);高、低剂量组大鼠股骨和椎骨骨钙、磷、骨灰化率增加(P ＜0.05,P＜0.001);低剂量能明显增加维甲酸所致骨质疏松大鼠的骨小梁面积、骨小梁体积,高剂量无明显的统计学意义,但亦有一定的改变趋势.结论 木豆叶芪类提取物对维甲酸造成的大鼠骨质疏松有防治作用.

以1/2MS为基本培养基,研究了蔗糖、IBA、茉莉酸甲酯(MJ)及水杨酸(SA)对木豆不定根生物量和次生代谢产物合成的影响.研究结果表明,蔗糖浓度对木豆不定根的生物量和次生代谢产物合成有显著影响,蔗糖浓度为30g·L-1时,木豆不定根的生物量和次生代谢产物的含量均达到最大值.低浓度的IBA有利于木豆不定根的生长和次生代谢产物的积累,高浓度的IBA表现出抑制作用.IBA浓度为0.1 mg· L-1时,生物量、染料木素及芹菜素含量均为最大值,分别为对照组的1.1、1.1和2.8倍.在0～ 200μmol·L-1浓度范围内,MJ对不定根的生长几乎无影响(P＞0.05),但对次生代谢产物的合成有重要影响.MJ浓度为100 μmol·L-1时,染料木素和芹菜素的含量均达到最大值,分别为对照组的1.9和2.1倍.SA抑制木豆不定根的生长和染料木素的合成,但对芹菜素的合成有一定促进作用,SA浓度为100 μmol·L-时,芹菜素的含量最高,为对照组的1.5倍.木豆不定根的悬浮培养是获得次生代谢产物的一条有效途径,为大规模生产染料木素和芹菜素提供了很好的思路.

目的:探讨木豆素单体对骨质疏松症(OP)等类溶骨性疾病的防治作用及具体机制.方法:提取并培养小鼠BMM和RAW264.7细胞,进行MTS、TRAcP染色、荧光素酶基因报告、PCR、Western blot、ROS清除、钙离子震荡等体外实验;建立OVX小鼠模型,观察Micro-CT形态学,HE、TRAcP染色等组织形态学试验,探讨木豆素预防OVX小鼠的骨丢失作用;最后通过木豆素胶囊治疗40例OP患者(时间0.5-1.1年),观察治疗前后患者骨密度的改变情况.结果:木豆素可抑制RANKL诱导的破骨细胞形成和骨吸收;抑制破骨标志基因以及NF-κB和NFAT通路上下游中的蛋白表达水平.另外,还可抑制活性氧(ROS)以及钙离子震荡反应.此外,通过小鼠卵巢切除动物模型实验,发现木豆素能够扭转由卵巢切除术引起的骨丢失,实验组Micro-CT见骨量增加、TRAcP染色中破骨细胞减少、HE染色中骨量增多等表现.临床研究发现,木豆素胶囊可改善OP患者的骨密度(P＜0.01).结论:木豆素通过抑制RANKL诱导的破骨细胞形成和破骨细胞的功能来减少OVX小鼠的骨丢失,从而预防骨质疏松.

为了解木豆(Cajanus cajan)叶片的氨基酸含量的变化,对19份种质资源和1～3叶龄的木豆叶片氨基酸含量进行研究.结果表明,不同种质资源和叶龄的木豆叶片中均含有17种氨基酸,必需氨基酸以苏氨酸、异亮氨酸和赖氨酸的含量最高,分别为0.67％、0.70％和0.48％,非必需氨基酸以丝氨酸、酪氨酸和组氨酸的含量最高,分别为0.69％、0.66％和0.44％.除赖氨酸和丙氨酸外,其余15种氨基酸含量在木豆叶片中总体上随着叶龄的增加呈现上升趋势.不同种质资源的木豆叶片中总氨基酸含量差异明显.聚类分析可将19个木豆种质资源划分为低氨基酸型(I)、中氨基酸型(II)、中高氨基酸型(III)、高氨基酸型(IV)等4大类型.这为高品质木豆叶茶的加工与高氨基酸木豆品种选育提供了理论依据.

目的 观察木豆素于抗抑郁方面的作用,并初步探讨其可能的作用机制.方法 采用小鼠慢性不可预见温和应激模型(chronic unpredictable mild stress,CUMS),进行糖水偏好实验评价经木豆素处理的小鼠的快感缺失情况,采用酶联免疫吸附测定法测定小鼠血清皮质酮的含量,采用LC-MS/MS法检测小鼠皮层和海马中多种神经递质的含量.结果 木豆素可以逆转CUMS引起的糖水偏爱指数降低和血清皮质酮水平升高.并且与正常组相比,模型组小鼠皮层和海马中相关神经递质的含量发生了显著的改变,而木豆素给药对于CUMS小鼠体内相关神经递质具有明显的调节作用.结论 木豆素可能通过降低血清皮质酮水平和调节脑内神经递质来实现抗抑郁作用.

目的 设计并合成新型木豆素衍生物,研究其体外抗肿瘤活性和对ERα蛋白表达水平的影响.方法 通过Horner-Wadsworth-Emmons反应、选择性去甲基反应、异戊烯基化反应等得到目标化合物;采用MTT法测试目标化合物对人结肠癌细胞HT-29、人乳腺癌细胞MCF-7和人卵巢畸胎瘤细胞PA-1的体外抗增殖活性,采用Western blot实验检测部分化合物对MCF-7细胞ERα蛋白表达水平的影响.结果与结论 共合成23个木豆素衍生物,其中,18个化合物未见文献报道,目标化合物的结构经1H-NMR、13 C-NMR谱和高分辨质谱确证.目标化合物的体外抗肿瘤细胞增殖测试结果表明,受试化合物对PA-1细胞的抑制活性明显强于对HT-29和MCF-7细胞.其中,B环引入羟基的衍生物对3种测试细胞株均有较好的抑制活性,且与木豆素和他莫昔芬相比,化合物11下调ERα蛋白表达水平作用更明显,值得进一步深入研究.

为获得具有抗肿瘤活性的甲醚化先导化合物, 对树豆 (Cajanus cajan) 叶中的二苯乙烯类成分进行甲醚化, 并测定其对人肿瘤细胞的细胞毒性.将木豆素C、树豆酮酸A、Cajanotone和木豆素与碘甲烷-碳酸钾反应制备O-甲基产物, 通过波谱数据分析产物结构分别鉴定为:2-异戊烯基-3, 5-二甲氧基二苯乙烯 (1) 、树豆酮酸A甲醚 (2) 、5-O-methylcajanotone (3) 和3-O-甲基木豆素 (4) , 其中化合物3是新化合物.肿瘤细胞增殖抑制实验 (CCK-8法) 结果表明, 木豆素C对乳腺癌MDA-MB-231、宫颈癌HeLa、肝癌Hep G2、结肠癌SW480及3种非小细胞肺癌细胞 (A549, NCI-H460和NCI-H1299) 的半数抑制浓度IC50分别为14.4、16.1、19.6、17.4和25.7～29.6μmol L–1;木豆素对宫颈癌和结肠癌之外的5种肿瘤细胞有弱抑制作用, IC50为44.9～78.3μmol L–1;而对照的3, 4′, 5-三甲氧基二苯乙烯 (三-O-甲基白藜芦醇) 对乳腺癌MDA-MB-231、宫颈癌HeLa、结肠癌SW480和肝癌Hep G2细胞有较强抑制作用 (IC50为3.0～14.5μmol L–1) .树豆叶二苯乙烯甲醚化衍生物1～4对7种肿瘤细胞系无明显细胞毒活性.

为探讨茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MJ)对木豆不定根影响,研究了茉莉酸甲酯的不同浓度及处理时间对木豆不定根中染料木素的含量及抗氧化系统的影响.研究结果表明,诱导子的浓度和处理时间对不定根中染料木素的含量有重要影响.在MJ浓度为100 μmol·L-1,处理时间为48 h时,染料木素的含量最高,为1.38 mg·g-1,是对照组的4.03倍.在此基础上,研究了100 μmol·L-1的MJ处理对木豆不定根抗氧化系统的影响,结果表明,MJ处理的木豆不定根明显发生了氧化胁迫,O2-速率、H2O2和MDA含量明显升高,同时不定根中SOD和POD活性明显升高,但是抗氧化酶活性的提高并未消除不定根的氧化胁迫,这种氧化胁迫导致了木豆不定根次生代谢产物合成能力提高.

目的 研究桑科榕属植物无花果Ficus carica果实的化学成分.方法 综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等技术进行系统分离,根据化合物的理化性质及波谱数据鉴定化合物的化学结构.结果 从无花果果实的90％乙醇提取物中分离得到了16个化合物,分别鉴定为怀特酮(1)、甘草宁G(2)、4,-羟基-5,7-二甲氧基-6-(3-甲基-丁烯基)-异黄酮(3)、猫尾草异黄酮(4)、indicanine C(5)、木豆素(6)、美迪紫檀素(7)、高丽槐素(8)、4-羟基-3-甲氧基-8,9-亚甲二氧基紫檀烷(9)、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷(10)、松脂素(11)、杜仲树脂酚(12)、丁香树脂醇(13)、8-羟基松脂醇(14)、3-羟基-1-(4-羟基-3-甲氧基苯)-1-丙酮(15)和4-羟基-3-甲氧基苯乙醇(16).结论 所有化合物均为首次从无花果中分离得到.