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利用冰冻切片机快速制作木质茎的显微切片技术
编辑人员丨1个月前
[目的]植物的木质茎因次生维管组织含量多、细胞壁木质化程度高、质地较硬,所以徒手切片和石蜡切片均难以获得满意的切片效果.冰冻切片机可对一定硬度的组织进行切片,是植物木质茎制片的有效工具之一.[方法]利用冰冻切片机对一些质地均匀、含水量较高的幼小木质茎直接切片;对木质坚硬、含水量较少的茎,经过FAA固定液固定、OCT包埋后(-30)~(-25)℃冰冻切片,再用0.1%甲苯胺蓝染色,显微镜观察并拍照染色效果.[结果]来源于乔木或灌木,直径不超过6 cm的木质茎,利用冰冻切片均可快速获得结构完整、图像清晰、色彩丰富的显微结构图像.[结论]冰冻切片机可用于幼小木质茎的显微切片制作,结合甲苯胺蓝染色,具有简便、高效、易操作的优点.
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编辑人员丨1个月前
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壮药两粤黄檀木质茎的指纹图谱研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立壮药两粤黄檀木质茎的HPLC指纹图谱分析方法,为其开发和利用提供质量控制依据和技术支持.方法:采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5μm),以乙腈-甲醇-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为256 nm;并对结果进行聚类分析和主成分分析.结果:12批两粤黄檀木质茎有14个共有峰,指认其中4个成分分别为甘草酸、土甘草A、4'-羟基-6-羟甲基-5,7-二甲氧基异黄酮、甘草次酸;12批两粤黄檀样品的相似度均>0.900,所有样品可大致分为3类.结论:建立的两粤黄檀HPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析方法可用于其质量评价,为今后该药材开发及质量控制提供了一定的科学依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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广藿香锌指蛋白基因PatGIS2调控广藿香醇生物合成
编辑人员丨2023/8/5
广藿香醇(Patchouli alcohol)是广蕾香特异的代谢倍半萜类成分,具有很好的神经保护、抗流感病毒等生物活性,是评价广藿香药材及广藿香油质量的指标成分.广藿香植物中法尼基焦磷酸在广藿香醇合酶(Patchouli alcohol synthase,PatPTS)催化下直接合成广蕾香醇等倍半萜.本研究以PatPTS基因启动子为诱饵,由酵母单杂筛选鉴定到1个与之结合的新蛋白PatGIS2.其序列含有多个CCHC锌指结构,基序为CX2CX4HX4C,属于CCHC锌指家族.应用RT-qPCR检测发现PatGIS2在成熟叶、老叶以及木质茎中表达量最高,原生质体亚细胞定位检测PatGIS2主要定位于细胞核.在广藿香原植物中瞬时过表达PatGIS2基因,发现PatGIS2表达上调导致PatPTS表达量显著下降约40.34%,瞬时过表达PatGIS2的叶片广藿香醇含量为2.10mg/g,相比对照(3.40 mg/g)降低了 33.39%.综上结果表明PatGIS2的功能主要是通过直接结合并降低PatPTS的启动子活性,抑制PatPTS的基因表达,从而负调控广藿香醇的生物合成.
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编辑人员丨2023/8/5
