目的:从"肺与大肠相表里"理论出发,探讨大黄对呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠的治疗效果.方法:42 只Balb/c小鼠随机分为空白对照组、利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组、病毒对照组,每组各 7 只.除空白对照组外,其余组小鼠通过滴鼻感染RSV造模,灌胃给药3d后通过Western bolt法检测小鼠肺组织中的病毒所带荧光蛋白(RSV-GFP)的表达;q-PCR检测小鼠肺组织病毒基因(RSV-G)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺病理学形态变化;冰冻切片观察肺组织病毒荧光情况;病毒空斑法检测小鼠肺匀浆病毒滴度.结果:与病毒对照组小鼠相比,大黄低剂量组小鼠RSV-GFP蛋白表达量降低(P＜0.05),差异有统计学意义;大黄各剂量治疗组的RSV-G、TNF-α mRNA相对表达量均低于病毒对照组小鼠(P＜0.05),差异有统计学意义;病毒对照组小鼠肺组织出现明显病理改变,肺间质增厚,组织毛细血管淤血,肺泡壁炎细胞浸润,各治疗组病理改变均有所减轻,肺泡壁炎细胞浸润减少;大黄低剂量组、利巴韦林组与病毒对照组相比,病毒荧光强度降低;大黄低剂量组、利巴韦林组小鼠肺部病毒滴度也较病毒对照组下降(P＜0.05),差异有统计学意义.结论:大黄免煎颗粒可抑制RSV在小鼠肺组织中复制,降低肺内炎症因子的表达,减轻炎症反应,提高小鼠生存质量.

目的:评估腋窝淋巴结清扫术(ALND)中施行识别并保护上肢淋巴系统技术(DEPART)对预防或减轻乳腺癌患者术后上肢淋巴水肿的效果。方法:采用随机对照研究方法。纳入2017年11月至2018年6月在武汉大学中南医院甲乳外科拟行乳腺癌手术的265例患者，通过随机数字表法，将患者随机分为ALND+DEPART组(132例)和标准ALND组(133例)。ALND+DEPART组患者术前注射示踪剂吲哚菁绿和亚甲蓝，术中清扫腋窝淋巴结时，采用分级显影方法示踪上肢淋巴系统，对长径>1 cm、质硬可疑转移的上肢淋巴结做1/4部分冰冻切片，选择性保留上肢淋巴结及淋巴管。标准ALND组患者行标准ALND。术后分别采用5点周径测量体积法和Norman问卷调查，对患者的上肢淋巴水肿情况进行客观和主观指标评估。结果:ALND+DEPART组132例乳腺癌患者中，121例(91.7 %)完成DEPART。ALND+DEPART组和标准ALND组患者的年龄、体质指数、病理类型、腋窝淋巴结清扫数目、N分期、TNM分期、分子分型、区域放疗差异均无统计学意义(均 P>0.05)。中位随访24个月，5点周径测量体积法评估显示，ALND+DEPART组和标准ALND组的淋巴水肿发生率分别为5.0%(6/121)和15.8%(21/133)，差异有统计学意义( P＝0.005)。Norman问卷调查法评估显示，ALND+DEPART组和标准ALND组的淋巴水肿发生率分别为5.8%(7/121)和21.8%(29/133)，差异有统计学意义( P<0.001)。两组患者均未出现局部区域复发。 结论:对腋窝淋巴结阳性的乳腺癌患者，ALND术中施行DEPART，能在保证肿瘤安全性的基础上，减少或避免上肢淋巴水肿的发生。

目的:探讨在前列腺穿刺活检组织中应用CK5/6抗体快速免疫组化辅助冰冻病理诊断的准确性与可行性。方法:回顾性分析2022年10月至2023年4月北京医院41例前列腺穿刺冰冻组织行CK5/6抗体快速免疫组化患者的资料。患者中位年龄76(69，79)岁，前列腺特异性抗原12.37(7.07，26.17)ng/ml。靶病灶的前列腺影像报告与数据系统(PI-RADS)评分均≥3分；其中3分9处(21.95%)，4分15处(36.59%)，5分17处(41.46%)。MRI检查病灶中位长径1.40(1.09，2.20)cm。病灶位于移行带14处(34.14%)，外周带23处(56.10%)，同时累及外周带和移行带病灶4处(9.76%)。采用经会阴认知融合靶向联合系统穿刺活检，术中于靶区和非靶区各额外取1针组织进行冰冻病理切片，并行HE染色和CK5/6抗体快速免疫组化染色，冰冻剩余组织行常规切片HE染色和CK5/6抗体常规免疫组化染色。记录冰冻病理和冰冻剩余组织常规切片的HE染色和免疫组化染色结果、国际泌尿病理学会(ISUP)分级分组，以及靶向联合系统穿刺的实际诊断结果等数据。以同一针穿刺组织的常规免疫组化结果为金标准，分析快速免疫组化冰冻病理诊断前列腺癌的敏感性和阳性预测值，及其病理分级分组的准确性。结果:在41例患者中，靶区组织冰冻切片HE染色诊断前列腺癌35例，阳性率85.37%(35/41)，其中ISUP分级分组1组17例(48.57%)，2组8例(22.86%)，3组4例(11.43%)，4～5组6例(17.14%)；同一针靶区冰冻剩余组织切片HE染色诊断前列腺癌35例，阳性率85.37%(35/41)，其中ISUP分级分组1组16例(45.71%)，2组9例(25.72%)，3组4例(11.43%)，4～5组6例(17.14%)。靶区组织快速免疫组化结果CK5/6表达阴性35例，阳性6例；常规免疫组化结果CK5/6阴性35例，阳性6例。非靶区组织快速免疫组化结果CK5/6表达阴性12例，阳性29例；常规免疫组化结果CK5/6阴性12例，阳性29例。靶区快速免疫组化诊断前列腺癌的35例与常规免疫组化诊断结果完全吻合，假阳性率为0，敏感性为100.00%(35/35)，阳性预测值为100.00%(35/35)。非靶区快速免疫组化诊断前列腺癌的12例与常规免疫组化诊断结果完全吻合，假阳性率为0，敏感性为100.00%(35/35)，阳性预测值为100.00%(12/12)。结论:本研究结果初步证实，在前列腺穿刺活检组织中应用CK5/6抗体快速免疫组化辅助冰冻病理诊断，具有较高的准确性，但快速免疫组化技术在穿刺术中辅助冰冻病理诊断的可靠性仍需要大样本前瞻性研究进一步验证。

目的:探究γ-氨基丁酸(GABA)能视网膜神经节细胞的中枢投射区域以及投射到上丘的GABA能视网膜神经节细胞在视网膜中的分布情况及其形态特点。方法:取6只GABA转运蛋白(vGAT)-cre转基因小鼠(实验1组)及6只野生型C57BL/6小鼠(对照1组)，于双侧眼内玻璃体腔注射腺相关病毒rAAV-EF1α-DIO-EGFP-EGFP；取6只vGAT-cre转基因小鼠(实验2组)及6只野生型C57BL/6小鼠(对照2组)，于脑内双侧上丘注射腺相关病毒rAAV-EF1α-DIO-EGFP-EGFP。注射病毒后42 d时，取6只实验1组、6只对照1组及3只实验2组、3只对照2组小鼠的视网膜、视神经、脑组织，行冰冻切片的免疫荧光双标染色以检测绿色荧光蛋白(GFP)和GABA的表达；对3只实验2组、3只对照2组小鼠的全视网膜铺片行免疫荧光双标染色以检测GFP和转录因子Brn3蛋白(BRN3A)的表达并统计阳性细胞数、细胞胞体大小。结果:实验1组小鼠的视网膜内核层、内网状层、神经节细胞层均可见到表达GFP的绿色荧光信号和表达GABA的红色荧光信号共标，视神经中可见表达GFP的绿色荧光信号沿轴突纤维呈线样排列，外侧膝状体和上丘区域的脑组织中也可见到表达GFP的绿色荧光信号；而对照1组小鼠视网膜上无绿色荧光信号。实验2组小鼠的视网膜上表达GFP的绿色荧光信号与表达GABA的红色荧光信号存在共标，投射至上丘的GABA能视网膜神经节细胞以中小型细胞(直径12~16 μm)为主，其数量占细胞总数的(37.70±5.33)%，占所有神经节细胞(BRN3A阳性)的(7.27±0.81)%。结论:GABA能视网膜神经节细胞向脑内外侧膝状体及上丘区域投射，在视网膜上呈均匀分布且以中小型细胞为主。

目的:观察新霉素对小鼠听功能及耳蜗毛细胞形态学变化的影响。方法:选取C57BL/6小鼠16只在出生后第8天开始连续10 d皮下注射硫酸新霉素，对照组（10只）皮下注射等量生理盐水。停药后1、4、8、12 w进行听性脑干反应（ABR）检测。每次ABR检测后，新霉素组随机取3只小鼠，对照组随机取2只小鼠，处死后，取耳蜗进行冰冻切片，用免疫荧光方法观察耳蜗Corti器及毛细形态学变化。结果:新霉素可造成小鼠耳蜗毛细胞严重损伤，且小鼠ARB阈值显著增高，不可恢复；新霉素对耳蜗Corti器毛细胞的损伤顶圈最轻，中圈次之，底圈最重，且随着时间推移Corti器形态结构破坏逐渐加重且不可自我修复。结论:硫酸新霉素造成小鼠Corit器毛细胞的损伤是不可逆的。

目的:探讨PDCA循环法在提高病理科冰冻报告完成及时率中的应用价值。方法:收集舟山医院病理科2019年1－8月应用PDCA循环法管理前的1 926例快速冰冻报告的基本资料，统计30 min内完成冰冻报告的例数及冰冻报告完成及时率，并与PDCA循环法实施后2019年9－12月1 051例快速冰冻报告完成及时率比较。结果:通过PDCA循环法管理，冰冻报告完成及时率从（84.51±3.61）%提高到（91.87±1.37）%，差异有统计学意义（ t=3.86， P < 0.05）。 结论:PDCA循环法应用于病理管理中可有助于发现冰冻报告完成情况，便于合理采取干预措施，从而提高冰冻报告完成及时率。

女，年龄54 d，52 d前体检时彩色多普勒超声提示：胰头部可及范围约17.0 mm×9.0 mm囊实性包块，周界清，形态规则，可见多发囊腔，考虑实性假乳头状瘤，患儿无黄疸、呕吐、哭闹、腹胀表现，入院后查上腹部增强CT提示：胰头处可见一囊实性包块影，大小约17.5 mm×12.5 mm，边界欠清，内壁欠光整，轻度强化。CT诊断：考虑胰母细胞瘤或实性假乳头状瘤(图1)，MRI检查提示：胰头部囊实性肿块影，实性部分呈稍短T2信号，大小约12.0 mm×13.0 mm×15.0 mm(前后径×左右径×上下径)，胆总管及胰管未见扩张(图2)。血淀粉酶为9 U/L，肿瘤标志物提示糖类抗原199为42.79 U/ml，甲胎蛋白为472.20 IU/ml，血胃泌素及胰岛素提示正常。考虑胰头占位为胰母细胞瘤或实性假乳头状瘤可能，遂在全身麻醉下行腹腔镜探查术，术中见肿物位于胰头背部表浅处(图3、4)。腔镜下沿肿物边界剥除胰头部肿物后行术中病理冰冻切片检查提示：纤维间质内增生的胰腺小叶，部分区域黏液变性，考虑为良性病变，遂行腹腔镜胰头部肿瘤剥除术。术中超声检查明确肿瘤完全切除。术后病理免疫组织化学结果示：CK7(+)、CK19(+)、CK-Pan(+)、CD56(－)、CgA(－)、Syn(－)、D2-40(－)，诊断：胰腺先天性囊肿(图5、6)，术后第2天，可见腹腔引流管内引流出胆汁样腹水，量约50 ml，考虑胆漏，患儿无发热及腹膜炎表现，感染指标正常，肝功能正常，血淀粉酶及血糖正常，继续给予禁食、静脉营养、抗感染、保肝治疗，胆汁样腹水量最多100 ml/d，行引流液生化检测，引流液淀粉酶含量正常，考虑胆总管胰腺段损伤，治疗第12天，胆漏停止，第14天复查肝功能提示：丙氨酸转氨酶(alanine transaminase，ALT)为289.2 U/L、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)为276.5 U/L、γ－谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyltransferase，GGT)为1 487.5 U/L、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)为198 U/L、直接胆红素(direct bilirubin，DBIL)为26.20 μmol/L，给予保肝、利胆治疗，效果可，术后第26天复查肝胆胰脾彩色多普勒超声示未见明显异常，肝功能较前明显好转后患儿顺利出院。术后随访1年半未见明显异常。

目的:基于单细胞转录组测序(scRNA-seq)探讨小鼠脉络膜新生血管(CNV)中内皮细胞(EC)的分子表达与病理特征。方法:取6只6~8周龄C57BL/6小鼠按照随机数字表法随机分为2个组，每组3只，处死后摘取双眼眼球，分别采用剪碎脉络膜巩膜复合体法和刮取脉络膜法分离脉络膜组织，采用胰蛋白酶/Ⅰ型胶原酶37 ℃连续消化制得单细胞悬液，流式细胞术检测细胞活率及EC比例，确定单细胞悬液制备方法。选取6只小鼠随机分为正常对照组和CNV组，每组3只，其中CNV组小鼠建立激光诱导的CNV模型；于造模后7 d制备单细胞悬液，采用10xGenomics进行单细胞分离并构建测序文库，Illumina Novaseq6000进行高通量测序，获得基因表达矩阵；根据文献报道并参考Cellmarker数据库定义细胞亚群；选取EC亚群进行拟时序分析，生成各个细胞分化状态(State)的基因表达矩阵，筛选CNV-EC并初步分析表达特征。另选取6只小鼠建立CNV模型，于造模后7 d取小鼠眼球制备冰冻切片，免疫荧光染色检测EC标志物Pecam1与线粒体外膜蛋白Tomm20、mt-Co1和毛细血管标志物Kdr、Plvap的共定位及面积占比情况，并统计血管直径。结果:剪碎复合体和刮取脉络膜所制备单细胞悬液的细胞活率分别为99.4%和99.1%，符合测序要求；流式细胞术检测EC占比约为1.58%。scRNA-seq结果显示，正常对照组和CNV组小鼠脉络膜均包含13个细胞亚群，与正常对照组比较，CNV组视锥/视杆细胞、EC和造血系细胞比例增加，视网膜色素上皮(RPE)细胞和施万细胞比例相应减少。在所有细胞亚群中，EC比例为18.40%。EC拟时序分析显示，脉络膜EC可分为4个State，CNV组中位于State 2状态的EC比例为29.1%，较正常对照组的9.5%明显升高；差异基因分析显示，State 2 EC中线粒体相关基因 mt-Nd4和 mt-Atp6等表达上调而毛细血管基因 Kdr和 Esm1等表达显著下调。免疫荧光染色结果显示，CNV区域内Tomm20和mt-Co1在Pecam1阳性EC内表达分布面积比例分别为(19.50±4.68)%和(4.64±2.82)%，明显高于正常区域的(3.00±2.09)%和(0.18±0.34)%，差异均有统计学意义( t＝7.88、3.84，均 P<0.01)。CNV区域内Kdr和Plvap在Pecam1阳性EC内表达面积比例分别为(1.50±0.29)%和(0.79±0.97)%，明显低于正常区域的(31.30±5.44)%和(10.43±2.28)%，差异均有统计学意义( t＝13.40、9.48，均 P<0.01)。CNV区域血管直径为(5.52±1.85)μm，明显大于正常区域的(4.21±1.84)μm，差异有统计学意义( t＝9.57， P<0.001)。 结论:CNV发生时，脉络膜组织中EC比例增加，CNV-EC呈现线粒体代谢活化和毛细血管特性丢失的病理特征，提示EC线粒体活化可能在CNV生成中具有一定的作用。

目的:比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用，探讨最佳抗原修复法。方法:选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象，其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例。分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片。按照标本来源和抗原修复方法分为6组：对照组（冰冻切片标本）、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复（高压热联合胰酶）组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复（微波热联合胰酶）组、高压热修复（高压热）组、微波热修复（微波热）组、胃蛋白酶消化（胃蛋白酶）组。分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异。结果:高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致，与对照组比较，两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义（均 P>0.05）。高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高，免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法。

目的:评价右美托咪定（dexmedetomidine, Dex）对内毒素血症小鼠血清炎症因子及心肌NOD样受体相关蛋白3 (Nod-like receptor pyrin domain 3, NLRP3）炎症小体的影响。方法:96只ICR雄性小鼠按随机数字表法分为4组（每组24只）：对照组（C组）、脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）组（L组）、LPS+Dex组（LD组）、LPS+Dex+阿替美唑组（LDT组）。L组、LD组和LDT组小鼠分别腹腔注射LPS 10 mg/kg构建内毒素血症模型。LDT组小鼠在腹腔注射LPS即刻腹腔注射阿替美唑750 μg/kg，每24 h给药1次，共2次。造模30 min后，LDT组和LD组小鼠腹腔注射Dex负荷剂量1.0 μg/kg。随后各组小鼠于左侧背部皮下置入胶囊渗透压泵，LDT组和LD组小鼠泵入Dex 1.0 μg·kg -1·h -1，L组和C组泵入生理盐水。造模48 h后收集血液和心脏组织。采用全自动生化分析仪检测肌酸激酶同工酶（creatine kinase-MB, CK-MB）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）活性，ELISA法检测血清肌钙蛋白I (cardiac troponin I, cTnI）、TNF-α、IL-6和IL-1β水平，试剂盒检测心肌总抗氧能力（total antioxidant capacity, T-AOC），心肌冰冻切片，二氢乙啶（dihydroethidium, DHE）染色法观察活性氧（reactive oxygen species, ROS）水平，Western blot法检测NLRP3、胱天蛋白酶-1活性亚基p20 (caspase-1 p20）、凋亡相关点样蛋白（apotosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC）和Sestrin2蛋白水平，TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，H-E染色观察心肌病理学结果。 结果:与C组比较：L组、LD组和LDT组血清CK-MB、LDH活性和cTnI、TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高（ P<0.05），心肌T-AOC水平降低、ROS水平升高（ P<0.05），心肌细胞凋亡率升高（ P<0.05），心肌NLRP3、caspase-1 p20和Sestrin2表达上调（ P<0.05），心肌存在病理学损伤；L组和LDT组ASC表达上调（ P<0.05），LD组ASC表达差异无统计学意义（ P>0.05）。与L组比较：LD组血清CK-MB、LDH活性和cTnI、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低（ P<0.05），心肌T-AOC水平升高、ROS水平降低，心肌细胞凋亡率降低（ P< 0.05），心肌NLRP3、caspase-1 p20和ASC表达下调（ P<0.05），Sestrin2差异无统计学意义（ P>0.05），心肌病理学损伤减轻。与LD组比较：LDT组血清CK-MB、LDH活性和cTnI、TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高（ P<0.05），心肌T-AOC水平降低、ROS水平升高，心肌细胞凋亡率升高（ P<0.05），心肌NLRP3、caspase-1 p20和ASC表达上调，Sestrin2表达下调（ P<0.05），心肌病理学损伤有所加重。 结论:Dex减轻内毒素血症小鼠心肌损伤的机制可能与激活Sestrin2有关，Sestrin2通过抑制ROS产生，进而抑制NLRP3炎症小体激活及其介导的炎症反应，来发挥内毒素血症小鼠的心肌保护作用。