曲霉是广泛存在于自然界中的条件致病真菌,可导致侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA),常见的致病菌有烟曲霉、构巢曲霉、黄曲霉、黑曲霉等.近些年来 IA的发生率呈上升趋势,同时全球高达 20%的曲霉分离株对常用的抗真菌药物表现出耐药性.Rho-GTPases家族基因以rho1、cdc42 和rac1 的研究最为广泛,它作为"分子开关"调节真菌形态发生与侵袭力.该文主要综述了rho1、cdc42 和rac1 对烟曲霉和构巢曲霉细胞壁合成、菌丝形态建立、应激反应及毒力的影响,有助于厘清曲霉极性生长和致病性方面的分子机制,为抗真菌药物的研发提供新思路.

脂质组分在双分子膜中不对称分布是广泛存在于真核细胞中的现象,有助于膜系统的出芽和融合,从而促进胞吞胞吐、蛋白分选运输等生理过程.多种蛋白参与维持脂质不对称,其中P4型ATP酶是重要的脂质转运体.P4型ATP酶又称脂质翻转酶,主要介导氨基磷脂的转位.在酿酒酵母、新生隐球菌、白念珠菌和构巢曲霉中,多种P4型ATP酶亚基的缺失导致蛋白运输失常,对唑类药物的敏感性升高,细胞壁完整性受损,毒力减低,在巨噬细胞中生存能力减弱等表型,提示脂质翻转酶的重要性及其作为抗真菌靶点的潜力.

McrA为最近在构巢曲霉(Aspergillus nidulans)中发现的全局调控因子,具有调控丝状真菌生长发育和次级代谢的作用,利用生物信息学分析方法找到并克隆紫色红曲霉(Monascus purpureus)中mcrA基因,将其命名为MpMcrA.分析MpMcrA蛋白质理化性质、亲疏水性、亚细胞定位、信号肽、跨膜区域及磷酸化位点、转录因子结合位点以及蛋白质二级结构.利用ProtParam、ProtScale、PSORTII、SignalP4.1等生物信息学软件对MpMcrA进行系统分析.结果表明,MpMcrA基因长1 356 bp,其中含有3个外显子,2个内含子,编码410个氨基酸,与构巢曲霉序列比对蛋白相似性高达64％.预测结果显示,MpMcrA属于亲水蛋白,位于细胞核可能性大,不存在跨膜区域,不属于膜蛋白;不存在剪切位点,不属于分泌蛋白;基因含有54个潜在的磷酸化位点;可能存在5个转录因子结合位点;蛋白结构大部分为无规则卷曲,整体结构较松散.对MpMcrA基因进行了生物信息学分析,得到了基因特征和分析结果.初步确定MpMcrA基因为构巢曲霉同源mcrA 基因,在红曲霉中未见有报道.

目的 探讨构巢曲霉致肺曲霉病的临床及病原学特点.方法 收集首都医科大学宣武医院2017年1月2例住院慢性阻塞性肺疾病患者的病例信息,分析患者的临床资料和实验室对病原菌的分离鉴定并复习相关文献.结果 两例患者均有慢性阻塞性肺部疾病史及多种基础疾病,临床表现为发热、咳嗽、喘息等,胸部影像学显示肺部斑片状高密度影;实验室检测G试验和GM试验均为阳性;痰液直接涂片镜检可见隔菌丝,分支45°角,分离菌经质谱和测序分析确定为构巢曲霉.临床根据病原学结果改用伏立康唑治疗后患者症状及体征好转出院.结论 构巢曲霉致肺曲霉病相对少见,病原学诊断对临床早期有效治疗肺曲霉病很重要.

bHLH (Basic helix-loop-helix)转录因子广泛存在于真核生物中,它可以通过同源或异源二聚体的形式与基因启动子上的E-box结合来调控基因的表达.转录因子的bHLH家族由广泛涉及发育过程(包括细胞增殖和分化)的大量蛋白组成,在生物的生长发育调控过程中起着极为重要的作用.本文对包括构巢曲霉、烟曲霉、米曲霉等曲霉属中现已发现bHLH转录因子的调控过程和生物功能进行概述,以期为深入研究曲霉属的生长发育及bHLH转录因子的功能提供理论参考.

为了解决高温极端环境下的磷素溶出问题,从高温堆肥中分离出具有耐高温能力的解磷微生物.该研究利用无机磷选择培养基,从添加磷矿粉和丢糟的高温堆肥样品中,分离筛选出5株耐高温解磷菌(细菌为GDB1-2;真菌为GDF1-3),并对这5株菌株进行形态学和分子生物学鉴定及解磷能力分析.研究结果表明,筛选获得的解磷菌株分别为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、多枝横梗霉(Lichtheimia ramosa)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)及构巢曲霉(Aspergillus nidulans).该5株菌具有较好的耐高温和耐pH性能,各菌株耐高温范围为40-60℃,在50℃条件下其解磷能力均达到最大值,当初始pH在5-9范围时各菌株均能保持一定的解磷能力.此外,通过解磷曲线发现各菌株的最高解磷量范围在136.85-174.33μg/mL.该研究结果为后续开发高温环境微生物资源提供了素材,具有良好的应用推广前景.

LaeA是在构巢曲霉中首次鉴定的一种全局调控因子,其同源蛋白在丝状真菌中广泛存在,具有高度的保守性.LaeA及其同源蛋白序列存在S-腺苷甲硫氨酸结合基序,是一种甲基转移酶,可能影响组蛋白修饰,导致染色体结构的改变,进而调控一系列基因的表达.大量研究表明,LaeA及其同源蛋白参与调控丝状真菌多种次级代谢产物的生物合成,影响丝状真菌的生长发育和形态分化,甚至在丝状真菌生产有机酸和一些工业酶的过程中也发挥着重要作用.本文综述了LaeA及其同源蛋白的作用机制,以及该蛋白在丝状真菌次级代谢、生长发育和其他重要生物过程中的作用,并对存在的问题及应用前景进行讨论与展望.

烟曲霉是最常见的一种致病菌,多发生于免疫抑制的患者,如实体肿瘤患者、血液病患者、长时间系统使用糖皮质激素和免疫抑制剂的患者等,其次是黄曲霉、黑曲霉,而土曲霉、构巢曲霉、棒曲霉、灰绿曲霉、花斑曲霉等偶有报道.在众多曲霉病中耳曲霉病的报道比较少见,现报道土曲霉致外耳道感染 1 例并文献复习.

目的 开展一项由河北地区多所医院参与的临床实验室丝状真菌检测研究,促进实验室丝状真菌检测能力提升.方法 共收集丝状真菌菌株,采用沙堡弱培养基和乳酸酚棉兰染色直接镜检进行菌种常规鉴定;中心实验室采用Vitek MS质谱进行复核鉴定,对MS不能有效鉴定的菌种进行核糖体DNA内转录间隔区ITS和/或钙调蛋白CaM测序分析.结果 参与研究的15家三级医院2016～2017年共收集到丝状真菌225株.其中烟曲霉133株(59.11％)、黄曲霉/米曲霉28株(12.44％)、黑曲霉复合群18株(8.00％)、聚多曲霉6株(2.67％)、构巢曲霉6株(2.67％)、其他丝状真菌34株(15.11％).样本类型包括下呼吸道痰标本203株(90.22％),耳道分泌物10株(4.44％),肺泡灌洗液4株(1.78％),其他样本8株(3.56％).菌株鉴定正确率(148/225)65.78％,错误率(77/225)34.22％.结论 丝状真菌感染中最常见的是曲霉菌属,主要以烟曲霉菌、黄曲霉菌和黑曲霉菌为主.传统的鉴定方法错误率高达30％以上,采用微生物质谱鉴定结合ITS/CaM区测序方法可以有效提高丝状真菌的鉴定正确率,为临床丝状真菌的治疗提供病原学依据.