目的:探讨靶向羧酸酯酶1f（Ces1f）基因敲减对脂多糖/D-半乳糖胺(LPS/D-GalN)诱导的急性肝衰竭小鼠枯否细胞（KC）极化活性的影响。方法:将携带靶向Ces1f干扰序列的小RNA（siRNA）与多肽转运载体（Endoporter）结合形成的复合物siRNA-EndoPorter包裹在β-1, 3-D葡聚糖壳中形成复合体颗粒(GeRPs)。将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组（LPS/D-GalN）、预处理组(GeRPs)、预处理模型组（GeRPs+LPS/D-GalN）、空载体组（EndoPorter）。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹（western blot）技术检测各组小鼠肝组织Ces1f mRNA及蛋白表达水平；采用实时荧光定量PCR技术检测各组小鼠KC M1极化表型分化簇86（CD86）mRNA以及KC M2极化表型分化簇163（CD163）mRNA表达水平；采用免疫荧光双染技术检测KC中Ces1f蛋白以及M1/M2极化表型CD86/CD163蛋白表达情况；采用苏木精-伊红染色观察肝组织病理损伤情况。多组间均数比较采用单因素方差分析，或方差不齐时采用独立样本非参数秩和检验。结果:正常对照组与模型组、预处理组和预处理模型组肝组织Ces1f mRNA/蛋白相对表达水平分别为：1.00±0.00、0.80±0.03/0.80±0.14、0.56±0.08/0.52±0.13、0.26±0.05/0.29±0.13，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为9.171/3.957、20.740/9.315、34.530/13.830， P值均< 0.01）。正常对照组与模型组、预处理组和预处理模型组KC Ces1f阳性细胞百分比分别为91.42%±3.79%、73.85%±7.03%、48.70%±5.30%、25.68%±4.55%，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为6.333、15.400、23.700， P值均< 0.01）。正常对照组与模型组、预处理模型组CD86 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、2.01±0.04、4.17±0.14，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为33.800、106.500， P值均< 0.01）。正常对照组与模型组、预处理模型组CD163 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、0.85±0.01、0.65±0.01，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为23.360、55.350， P值均< 0.01）。正常对照组与模型组、预处理模型组（F4/80 +CD86 +）百分比和（F4/80 +CD163 +）百分比分别为10.67%±0.91%和12.60%±1.67%、20.02%±1.29%和8.04%±0.76%、43.67%±2.71%和5.43%±0.47%，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为11.130/8.379、39.250/13.190， P值均< 0.01）。正常对照组与模型组、预处理模型组肝损伤评分分别为0.22±0.08、1.32±0.36、2.17±0.26，各组间差异均有统计学意义（ F值分别为12.520、22.190， P值均< 0.01）。 结论:Ces1f可能是一个肝脏炎症抑制分子，其抑制效应的产生可能来自于该分子对KC极化表型稳态的维持。

目的:探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响.方法:选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干扰素(干扰素)组、联合组.除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模.建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5 μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水.酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXR-FGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化.结果:与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低.与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBeAg、ALT、AST、TBIL含量、iNOS、CD163阳性表达率显著降低.肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著升高,联合组比干扰素组降低显著.结论:核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素,可显著激活FXR-FGF19通路,并抑制枯否细胞M1极化,促进枯否细胞M2极化,对慢性乙型肝炎大鼠具有改善作用.

化学性肝损伤主要是由化学毒物或某些药物引起的肝损伤,发病急,可迅速导致肝衰竭.枯否细胞作为肝脏内的常驻巨噬细胞,可释放促炎或抗炎性细胞因子.枯否细胞具有不同的极化形态:经典促炎的M1型与替代激活的M2型,其极化形态影响着肝损伤的进程.笔者综述了乙醇、对乙酰氨基酚以及四氯化碳诱导的枯否细胞极化在肝损伤中的作用机制及其最新进展,为化学性肝损伤的预防和新药研发提供新思路.

肝脏的巨噬细胞在维持肝脏稳态以及肝损伤发病机制中占有重要的地位,在不同刺激下,肝脏巨噬细胞发生极化并发挥多重作用.肝脏巨噬细胞与丙型病毒性肝炎之间关系密切.本文介绍了肝脏巨噬细胞的起源、分类以及其在维持肝脏稳态中的作用,综述了肝脏巨噬细胞在丙型肝炎病毒(HCV)感染中发生的变化与发挥的作用,并简要介绍靶向肝脏巨噬细胞治疗肝脏疾病的药物研究进展,以便更好地了解肝脏巨噬细胞多样性和可塑性,为丙型病毒性肝炎感染疾病的创新诊断和治疗方法提供新的视野.

长期的慢性肝脏损伤 ,如大量饮酒、胆汁淤积和病毒或寄生虫感染等 ,使肝细胞不能及时地进行再生性修复 ,而出现以细胞外基质(extracellular ma-trix ,ECM )过度沉积引起的纤维化为主的修复.静息的肝星状细胞因反复的损伤刺激转分化为肌成纤维细胞样的过程 ,是肝纤维化的启动和进展的关键因素.同时 ,肝内其他细胞 ,特别是枯否细胞也会影响肝纤维化.HIPPO 信号通路主要发挥限制器官大小的生理功能 ,并与细胞增殖、极化、转分化和凋亡等过程密切相关. HIPPO 信号可通过影响肝星状细胞的转分化、增殖和凋亡 ,进而影响药物及胆汁淤积引起的肝纤维化的发生和进展.本文就 HIP-PO信号通路及其在肝纤维化发生发展过程中的作用进行综述.

巨噬细胞是人体免疫系统中最重要的固有细胞,具有吞噬、抗原提呈、防御微生物,分泌细胞因子、趋化因子等功能.巨噬细胞大致可分为两类:经典M1型和替代M2型巨噬细胞.M1型巨噬细胞参与炎症反应、清除病原体以及抗肿瘤免疫;M2型巨噬细胞则影响抗炎反应、伤口愈合并具有促瘤特性.巨噬细胞在大多数类型肿瘤中大量存在,在促进肿瘤发生发展中具有重要作用,这可能成为临床抗肿瘤治疗的良好靶点.现就肝转移瘤微环境各部分组成,以及巨噬细胞极化、功能以及其作用机制最新研究进展进行综述.

目的:阐明肝脏枯否细胞、单核巨噬细胞在2,4-二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠肝纤维化中的作用,揭示肝宝胶囊逆转肝纤维的作用机理,为临床应用提供依据.方法:雄性SD大鼠分为正常对照组和DMN肝纤维模型组.在腹腔注射DMN四周复制肝纤维化模型后,将DMN肝纤维化大鼠分成枯否细胞剔除组和非剔除组.枯否细胞剔除组尾静脉注射二氯亚甲基二磷酸盐(Cl2 MDP-L),其余动物给予等体积溶媒.随后分别灌胃肝宝胶囊4、8 g原生药/kg及双环醇0.2 g/kg或同体积溶媒治疗4w.末次给药后24h,取血测定生化指标,取肝脏测定羟脯氨酸含量等指标.结果:与正常对照组比较,DMN肝纤维化大鼠血清ALP、ALT活性、肝组织胶原容积百分比(CVF)及羟脯氨酸(Hyp)含量明显升高,肝组织纤维化程度严重,肝内CD68+、CD204+、CD206+表达明显增多(P＜0.05或P＜0.01);与模型对照组比较,肝宝胶囊可降低DMN肝纤维化大鼠血清ALT活性、肝组织CVF、Hyp含量以及肝组织纤维化程度,减少肝内CD68+、CD204+、CD206+巨噬细胞数,增加CD163+巨噬细胞数(P＜0.05或P＜0.01).与正常对照组比较,枯否细胞剔除DMN肝纤维化大鼠血清ALP、ALT活性,肝脏CVF及Hyp含量明显升高,肝组织纤维化明显,肝内CD68+、CD204+、CD206+巨噬细胞明显增加,CD163+巨噬细胞数量减少(P＜0.05或P＜0.01);肝宝胶囊可明显降低枯否细胞剔除DMN肝纤维化大鼠血清ALT活性,减少肝内CD163+、CD204+巨噬细胞,但对肝脏纤维化程度改善作用不明显.结论:枯否细胞是肝纤维的主要促进因素,外源性单核巨噬细胞有利于肝纤维化的逆转;肝宝胶囊通过抑制枯否细胞等M1型巨噬细胞的活化,选择性地抑制CD204+活化所引起的免疫反应,提高CD163+活化,促进组织重塑,促进肝纤维的逆转.其详细作用机制有待进一步深入研究.

目的 研究扶正化瘀片对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠枯否细胞极化的影响,并进一步探讨相关机制.方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,低、高剂量中药组和罗格列酮组,每组10只.除正常组外,其余4组经高脂喂养20周后,模型组以等体积蒸馏水灌胃干预,低、高剂量中药组分别予浓度750、1500 mg/(kg·d)扶正化瘀片混悬液灌胃,罗格列酮组给予浓度30 mg/(kg·d)混悬液灌胃,6次/周,共4周;HE染色观察肝组织病理变化并计算NAFLD活动度积分(NAS);全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6及IL-10含量;免疫组织化学染色法及Real-time PCR测定肝组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、甘露糖受体(CD206)蛋白及mRNA表达水平;Western Blot法测肝组织核转录因子-kappaB(NF-κB)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-y蛋白表达水平.结果 与正常组比较,模型组肝组织显示典型NASH组织学特征,出现明显脂肪变性,不同程度的炎细胞浸润和坏死灶;血清TC、TG、ALT、AST、TNF-α、IL-6表达均升高而IL-10表达下降(P＜0.05);肝组织iNOS、CD206 mRNA及蛋白表达均升高(P＜0.05);肝组织NF-κB、PPAR-γ蛋白表达均升高(P＜0.05).NAS及血清ALT、AST、TNF-α、IL-6表达、肝组织iNOS mRNA及蛋白、NF-κB蛋白表达各药物组较模型组均降低(P＜0.05),高剂量中药组较罗格列酮组均降低(P＜0.05).血清IL-10表达、肝组织CD206 mRNA及蛋白、PPAR-γ蛋白表达各药物组较模型组均升高,高剂量中药组较罗格列酮组均升高(P＜0.05).结论 扶正化瘀片对NASH大鼠治疗效应确切,可能与扶正化瘀片增强PPAR-γ信号通路表达并抑制NF-κB信号通路表达,从而促进M2型枯否细胞极化有关.

随着外科手术技术的成熟,肝移植手术成功率逐渐提高,然而术后长期免疫耐受的建立仍然面临着许多问题.枯否(Kupffer)细胞是一种组织驻留型巨噬细胞,常驻于肝脏当中,其可在肝移植术后向着不同方向极化,形成M1型Kupffer细胞和M2型Kupffer细胞.M1型Kupffer细胞具有促炎功能,M2型Kupffer细胞具有免疫调节功能.通过抑制M1型Kupffer细胞数量和功能,或者促使M2型Kupffer细胞数量增加和功能增强,有助于免疫耐受的建立.Kupffer细胞的极化受到诸多细胞因子和信号的调节,这为通过干预Kupffer细胞极化来建立肝移植免疫耐受的疗法提供了机会.本文将就Kupffer细胞极化状态与肝移植免疫耐受的关系、Kupffer细胞极化机制进行综述,旨在为建立肝移植免疫耐受提供参考.