不同生态因子与柔毛淫羊藿Epimedium pubescens药效成分及花、叶性状的相关性,前人并无系统报道.该研究选择了分布于不同地域的 21 个柔毛淫羊藿种群,测定了淫羊藿苷(I)和朝藿定C(C)2 种药效含量表型,以及 6 种叶和 12 种花形态表型,探究不同地域连续 5 年 11 种生态因子与上述表型的相关关系.结果表明:各主要生态因子与柔毛淫羊藿 2 种成分总量(I+C)无显著相关性,纬度和温度(包括年平均气温、年平均最低温度以及各土层的土壤温度)分别与 2 种成分含量比值(C/I)呈极显著正相关和负相关(P<0.01);生态因子与花表型显著相关,年平均各土层温度、年平均气温和年平均最低气温在多个年份与花的大部分表型呈极显著相关(P<0.01);生态因子与叶表型相关性小,仅年平均各土层温度和年平均湿度在少数年份与营养叶宽呈极显著正相关(P<0.01).因此,柔毛淫羊藿药效成分总量主要为遗传决定,生态因子影响较小,花表型主要与生态因子如年平均气温、年平均最低温度以及各土层的土壤温度相关,在不同的地域具有很大的不同,而叶表型没有呈现显著地域差异.该研究系统开展了生态因子与柔毛淫羊藿药效成分及花、叶性状的相关性分析,为柔毛淫羊藿的品质提升和引种驯化提供指导.

探究不同比例有机肥和化肥配施对柔毛淫羊藿产量和品质的影响,为柔毛淫羊藿的高产优质栽培提供科学的施肥依据.该试验采用田间小区试验,以CK(不施肥)为对照,设置 5 个不同比例有机肥和化肥配施处理组,OF0(100%化肥)、OF25(25%有机肥配施)、OF50(50%有机肥配施)、OF75(75%有机肥配施)和OF100(100%有机肥),测定不同施肥模式对柔毛淫羊藿农艺性状、产量、有效成分含量、养分积累量及土壤理化的影响,并采用CRITIC权重法对药材产量及品质进行综合评价.结果发现各施肥处理药材产量均较CK显著增加,尽管各有机肥配施化肥处理产量略低于OF0 处理,但无显著差异,表明有机肥配施化肥可以保证药材产量.随着有机肥配比的提高,药效成分朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C呈先增后降趋势,以OF25 处理含量最高,淫羊藿苷则呈不断上升趋势,以OF100 处理最佳,但总体来说,总黄酮醇苷ABCI以OF25 处理积累最多.CRITIC法结果显示药材情况综合得分前三的施肥处理为OF25、OF50、OF75.有机肥配施化肥有利于提高土壤的持肥能力和供肥能力,土壤指标以OF100 处理最优,土壤酶活以OF75 处理活性最高,同时有机肥配施化肥有助于植株对养分的吸收积累,以OF25 处理促进最明显.综合不同比例有机肥配施化肥对柔毛淫羊藿产量、有效成分含量及养分积累量等指标,建议在柔毛淫羊藿生产中第一年采用 25%比例(7 500 kg·hm-2)的有机肥和化肥配施,以促进柔毛淫羊藿产业增产提质.

目的:建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UHPLC-Q Exactive Orbitrap/MS)结合多元统计分析技术对5种不同基原淫羊藿化学成分差异分析的方法.方法:对5种基原30批淫羊藿样品的UH-PLC-Q Exactive Orbitrap/MS全扫描数据进行多元统计分析.利用SIMCA软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA).结果:5种基原淫羊藿的化学成分具有差异性,根据相关参考文献及谱图信息,共鉴定出27种化学成分.所建立的OPLS-DA模型具有良好的数据描述能力和预测能力.柔毛淫羊藿化学成分具有显著性差异,而朝鲜淫羊藿与箭叶淫羊藿,淫羊藿与巫山淫羊藿之间的化学成分及含量具有相似性.经过筛选与分析,确定8种差异化学成分.结论:建立的方法可分析出5种基原淫羊藿化学成分的差异性,操作简便,方法准确,可为不同基原淫羊藿的质量控制及开发应用提供理论依据.

目的 通过UPLC-Q-TOF-MS技术,探讨不同基原淫羊藿和巫山淫羊藿的药材体外化学成分的差异,为淫羊藿及巫山淫羊藿药材鉴定及质量控制奠定基础.方法 采用Agilent SB-C18(2.1 mm×100 mm,2.7 μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-甲醇(+)及水-甲醇(-)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1.质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下进行数据采集.通过保留时间、相对分子质量及二级碎片离子对巫山淫羊藿、淫羊藿、柔毛淫羊藿、箭叶淫羊藿及朝鲜淫羊藿药材中的化学成分进行鉴定,并基于所鉴定出的化合物对不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材的化学成分通过SIMCA软件进行差异分析.结果 不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材中共鉴定出朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷等 37 种化学成分,经过对比发现不同基原的淫羊藿及巫山淫羊藿药材中淫羊藿定L、2''-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、木兰花碱等12 种成分的相对含量具有明显差异,差异化合物经鉴定主要为黄酮类化合物.结论 本试验所发现的差异化合物可以作为区分不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材的指标,这5种药材的鉴别和质量控制奠定基础.

目的:通过HPLC法测定不同产区淫羊藿中淫羊藿总黄酮醇苷、淫羊藿总黄酮、浸出物的含量差异,同时结合计量统计学分析方法,科学的对不同区域淫羊藿进行质量评价.方法:采用HPLC法检测甘肃省不同产地淫羊藿、柔毛淫羊藿、制淫羊藿等37个品种的化学成分,并且结合化学计量学的分析方法[主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析(cluster analysis,CA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least square discriminate analysis,OPLS-DA)]对37个产地的淫羊藿进行质量评价研究.结果:SPSS软件对主成分进行分析,共得到3个主成分,其方差贡献率83.868%,依据主成分计算最后得分,得到定西的淫羊藿样品整体较好,其次是陇南、天水、平凉、庆阳及甘南;选择平方欧式距离作为测度进行聚类分析,同时运用多变量统计软件SIMCA14.1分析,结果CA和PCA结果基本一致;最后采用监督模式识别,偏最小二乘法得R2回归线截距0.00867,Q2截距为?0.196,R2>Q2,且Q2为负值,说明预测能力较好,说明产地分类的合理性.结论:HPLC含量测定法结合化学统计学可全面反映甘肃地产淫羊藿质量及品质特色的标准体系,为合理开发野生资源,建立淫羊藿生产加工基地,确保岷州淫羊藿的道地优质性提供技术支撑.

淫羊藿为常用补肝益肾中药材,目前仍以野生资源为主.近年来随着用量猛增,其资源在不断减少,市场品种的使用情况也在不断发生变化.该文在已有研究基础上,深入产区调研收集准确基原的植物标本和样品,总结概括了药典品5种基原(淫羊藿Epimedium brevicornu、箭叶淫羊藿E.sagittatum、柔毛淫羊藿E.pubescens、朝鲜淫羊藿E.koreanum和巫山淫羊藿E.wushanense)的产销现状,并对药典中淫羊藿药材基原规定进行了讨论;同时应用实体显微、光学显微及体式荧光显微等技术进行观察和比较,参考叶结构及解剖相关文献,归纳了药典品较为专属且实用的鉴别特征,从而为临床用药、市场监督、日常检验、标准起草等工作提供有益的参考.

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicomu、箭叶淫羊藿E.sagittatum、柔毛淫羊藿E.pubescens或朝鲜淫羊藿E.koreanum的干燥叶,在我国有着几千年的用药历史,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效.现代研究表明宝藿苷Ⅰ在淫羊藿中含量较低,但却有着广泛的药理作用,如抗骨质疏松、抗肿瘤、改善认知功能障碍、脑缺血再灌注损伤保护、神经保护等.鉴于宝藿苷Ⅰ诸多的生物学活性及药理作用,对其制备方法和药理作用的研究越来越成为关注的热点.该文对近年来宝藿苷Ⅰ的制备方法及药理作用的相关研究进行了汇总和整理,为更好的大量制备宝藿苷Ⅰ及合理开发利用提供参考.

柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)是中国淫羊藿属植物中分布较为广泛、形态变异较为丰富的物种,柔毛淫羊藿及其近缘种在分类中存在诸多争议.为研究柔毛淫羊藿及其近缘种变异规律和进行种的界限划分,该研究对柔毛淫羊藿31个居群和近缘种星花羊藿3个居群、镇巴淫羊藿1个居群、万源淫羊藿1个居群共36个居群的叶背非腺毛进行了显微观察.结果显示:(1)所观察到的非腺毛分为直毛、曲毛、伏曲毛、长伏毛、拟短伏毛、短伏毛、单细胞毛7个大类19个小类,并发现每个居群或每个个体的叶背面非腺毛是由多种类型构成.(2)共观察到1 3个居群具有乳突,且69.2％非腺毛较少(非腺毛密度少于50个/mm2)的居群具有乳突;而且共有27个居群中具有单细胞毛,占该研究36个居群的75％.(3)以非腺毛密度、主要类型构成进行居群归类,其中柔毛淫羊藿21个居群为直毛群(A),柔毛淫羊藿7个居群为曲毛群(B),柔毛淫羊藿2个居群、星花淫羊藿3个居群、镇巴淫羊藿1个居群为长伏毛群(D),柔毛淫羊藿1个居群为拟短伏毛群(E),万源淫羊藿1个居群为短伏毛群(F),所有居群均共有直毛类非腺毛,说明直毛类非腺毛为柔毛淫羊藿及其近缘种的核心类型非腺毛.(4)从居群内非腺毛类型组成的角度梳理出了居群间的演化关系,直毛群:AI→AⅡ→AⅢ→AⅣ→AV;曲毛群:B Ⅰ→BⅡ→BⅢ→BⅣ;长伏毛群:D Ⅰ→DⅡ→DⅢ;直毛群→曲毛群;短直毛群→短伏毛特化群;短直毛群→拟短伏毛特化群,且居群间的演化关系与地理分布呈现良好的相关性.(5)单细胞毛为淫羊藿属中首次发现.研究认为,单细胞毛可能与主流非腺毛类型(直毛和曲毛)和地理分布有关,但乳突则与叶背面的非腺毛密度可能存在负相关关系;该研究结果支持将星花淫羊藿归为柔毛淫羊藿种下等级的分类处理.

目的 建立测定不同采收期柔毛淫羊藿中淫羊藿苷含量的高效液相色谱(HPLC)法,为合理采收和开发利用提供参考.方法 色谱柱为Agilent C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(25:75,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为270 nm.结果 淫羊藿苷进样量在58.40～1168.00 ng范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999(n=5);平均加样回收率为95.59％,RSD为1.77％(n=6);不同采收期的柔毛淫羊藿中淫羊藿苷含量差异较大,其中7月最高(0.7239％),2月最低(0.2235％).结论 该方法操作简单、快速、准确,可为确定淫羊藿药材的最佳采收时间提供参考,以合理开发利用淫羊藿药材.

本研究旨在探讨柔毛淫羊藿愈伤组织的最佳诱导条件和愈伤组织中总黄酮、淫羊藿苷含量.采用正交试验设计方法研究不同外植体、培养基、培养温度和光照条件对柔毛淫羊藿愈伤组织诱导的影响,分光光度法测定愈伤组织中总黄酮含量,高效液相色谱法测定其中淫羊藿苷含量.结果 显示,以幼叶为外植体,培养基为N6+2,4-D 3 mg/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L,在黑暗或弱光(1 000 Lx)和(21±1)℃条件下愈伤组织诱导效果最好;愈伤组织中总黄酮和淫羊藿苷含量分别达5.24％和0.564％,与叶中含量无显著差异.初步建立了柔毛淫羊藿愈伤组织诱导的适宜培养条件,为高产淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷的组培苗生产和细胞悬浮培养体系的建立提供了依据.