目的:评估改良磁珠筛选法富集胎儿游离DNA（cell-free fetal DNA，cffDNA）在无创产前检测（non-invasive prenatal testing，NIPT）中的应用价值。方法:从2017年10月至2019年12月在北京市海淀区妇幼保健院接受常规NIPT的11 000例孕妇中，回顾性纳入cffDNA浓度偏低（<6.00%），或首次检测Z值灰区（3.00~4.00），或产前介入性产前诊断确定假阳性或生后确定假阴性病例共31例。取首次常规NIPT留存的血浆标本，使用改良磁珠筛选法富集cffDNA进行NIPT（改良富集法NIPT）。采用Wilcoxon秩和检验比较改良富集法NIPT与常规NIPT测得的男胎cffDNA浓度变化。结果:31例孕妇中13例常规NIPT cffDNA浓度偏低，11例常规NIPT 13/18/21-三体假阳性（3例13-三体，4例18-三体，4例21-三体，均经介入性产前诊断证实），6例首次常规NIPT Z值灰区（复测为低风险），1例常规NIPT 21-三体假阴性（生后染色体检查证实）。使用改良富集法后，<150 bp的游离DNA（cell-free DNA，cfDNA）片段得到有效富集，21例男胎的cffDNA浓度由常规NIPT的4.43%（2.45%~17.61%）提升至改良富集法NIPT的13.46%（7.75%~36.64%），差异有统计学意义（Z=-14.22， P<0.01）。13例常规NIPT cffDNA浓度偏低者经改良富集法NIPT，均成功检出为低风险；6例Z值灰区病例及11例假阳性病例中的6例经改良富集法NIPT确定为低风险，与常规NIPT复测结果一致；1例假阴性病例确定为高风险。 结论:与常规NIPT相比，改良富集法NIPT降低了因cffDNA浓度偏低导致的检测失败率，降低了假阳性率，并成功检测出假阴性病例，显示出更高的检测成功率和更低的假阳性率。

结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis，Mtb)是一种生活在宿主巨噬细胞吞噬体内的细胞内细菌，其侵入人体后，可引起一系列免疫反应，一部分Mtb可经机体免疫作用消灭；但仍有一部分可经免疫逃逸机制存活，引发机体潜伏结核感染(latent tuberculosis infection，LTBI)或结核病(tuberculosis，TB)。外泌体是由活细胞分泌的、直径为30～100 nm的一种细胞外囊泡，其富含蛋白质、脂质和核酸，存在于人体多种体液中。Mtb感染后，机体所释放的外泌体的组分可以发生显著变化，并且可以在机体感染免疫中发挥作用，从而为结核感染的预防、诊治提供新的思路和理论依据。该文将对外泌体在Mtb感染中的作用及应用价值进行综述。

目的:分析无创产前检测（noninvasive prenatal testing，NIPT）在双胎消失（vanishing twin，VT）孕妇中的应用价值。方法:回顾性分析2017年1月至2020年12月在北京大学第三医院进行NIPT的VT孕妇164例，收集所有孕妇VT发生孕周、NIPT结果及采血时间、产前诊断结果以及妊娠结局等资料，采用两独立样本 t检验和 χ2检验进行统计学分析。 结果:（1）164例中，6例NIPT阳性，而核型分析及单核苷酸多态性芯片检测均未见异常，NIPT假阳性率为3.7%（6/164），均足月分娩；4例孕中期引产，包括2例胎儿畸形和1例不明原因胎儿宫内死亡病例的核型及单核苷酸多态性芯片均无异常，1例因胎膜早破发生难免流产，但拒绝行羊膜腔穿刺；余154例分娩（包括12例早产）均未发现异常表型。（2）VT发生孕周≤8周的NIPT假阳性率低于>8周［1.5%（2/134）与13.3%（4/30）， χ2=6.68， P=0.010］。发生VT孕周与NIPT采血孕周的间隔时间≤8周组的假阳性率为6.9%（4/58），间隔时间>8周组的假阳性率为1.9%（2/106），两者比较差异无统计学意义（ χ2=1.44， P=0.231）。 结论:尽管VT孕妇中存在NIPT假阳性，但仍可以在充分知情同意的基础上进行NIPT筛查，减少不必要的介入性产前诊断。VT发生的孕周越早，其NIPT假阳性率有下降趋势，但延长采样间隔时间是否降低假阳性风险有待进一步研究。

细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）是一类大多数细胞皆可向胞外分泌的纳米级别颗粒，其外部为脂质双分子层结构，内部可携带蛋白质、核酸及miRNA等多种生物活性物质，在细胞间通讯中起重要作用 [1]。EVs不仅可由正常细胞所分泌，病原微生物及病理状态细胞同样可以向外释放EVs。在病原菌侵入宿主细胞后，宿主细胞释放的EVs可携带细菌毒力因子或病毒遗传物质，造成感染的扩散及加重 [2,3]。脓毒症是由于机体对感染的反应失调，进而造成危及生命的器官功能障碍，然而其发病机制尚未完全阐明 [4]。近年来研究表明EVs在脓毒症的发病过程中起重要作用 [5]，研究EVs为了解脓毒症的发生发展打开了全新的视角，本文就EVs在脓毒症中的研究进展综述如下。

目的:分析新型冠状病毒（新冠病毒）疫苗接种对成都市境外输入病例流行病学及临床特征的影响，为新型冠状病毒肺炎疫情防控提供参考依据。方法:截至2021年4月15日，经成都市入境的新冠病毒感染病例，根据新冠病毒疫苗接种史被分为疫苗接种组和疫苗未接种组。回顾性收集和分析病例的流行病学及临床特征资料。实验室检测项目包括新冠病毒核酸检测、临床指标、血清抗体和淋巴细胞检测。采用WPS 2019软件整理数据，采用R 4.0.3软件进行统计学分析。结果:75例新冠病毒感染病例包括疫苗接种组20例（出现临床症状4例）和疫苗未接种组55例（出现临床症状16例）。疫苗接种组的首针接种时间分布为2020年7-11月，其中接种2剂次疫苗采用一次性接种方式有10例，采取2次间隔接种方式有10例，2次接种间隔14~57 d，完成疫苗接种与发病时间间隔87~224 d。两组病例的分类和临床分型的差异有统计学意义（ P<0.05），其中，疫苗接种组病例分类为无症状感染者的比例较高（40.00%，8/20），而疫苗未接种组的临床分型以普通型的比例较高（76.36%，42/55）。两组病例的新冠病毒核酸检测2个靶标（ORF1ab和N基因） Ct值、淋巴细胞亚型、降钙素原及C反应蛋白的差异无统计学意义（ P>0.05），疫苗接种组的血清淀粉样蛋白A水平低于疫苗未接种组（ P<0.05），但新冠病毒血清抗体IgM、IgG及总抗体水平均明显高于疫苗未接种组（ P<0.05）。 结论:新冠病毒疫苗接种后，仍存在感染的风险，但新冠病毒侵入人体后，体内可迅速产生特异性IgM和IgG抗体，对感染者产生一定保护作用，已接种新冠病毒疫苗的病例分类以无症状感染者为主。

目的 探究妇科术后早期感染影响因素,分析微小核糖核酸(miR)-146a、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和C-反应蛋白/白蛋白(CRP/ALB)比值的临床价值.方法 选择2018年2月-2021年4月在广州花都时代妇产医院接受妇科手术的1 302例患者,根据术后病原学检查结果分为感染组60例和未感染组1 242例,分析病原菌分布特点,筛选妇科手术患者早期感染影响因素,评估miR-146a、NLR和CRP/ALB比值的诊断价值.结果 1 302例妇科手术患者术后早期感染60例,感染率为4.61％,感染部位占比较高的分别为呼吸道、泌尿道、生殖道;共分离98株病原菌,革兰阴性菌54株占55.10％,革兰阳性菌41株占41.84％,真菌3株占3.06％;手术类型、侵入性操作是妇科手术患者术后感染的影响因素(P＜0.05);感染组患者miR-146a、NLR、CRP/ALB表达水平均高于未感染组(P＜0.05);受试者工作特征(ROC)曲线显示miR-146a、NLR和CRP/ALB比值均对妇科手术患者术后感染有较高诊断价值,三者联合诊断曲线下面积(AUC)为0.955,敏感度和特异度分别86.67％和92.50％.结论 妇科手术患者术后感染多发生于呼吸道,病原菌以革兰阴性菌为主,miR-146a、NLR和CRP/ALB比值检测可作为妇科手术术后早期感染的辅助指标,三者联合诊断的效能更高.

目的 建立一种病毒性脑炎脑膜炎病原体多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测方法.方法 针对几种重要的脑炎脑膜炎病毒(东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、流行性乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和尼帕病毒)保守区基因设计引物,进行多重PCR反应、核酸侵入反应及纳米金显色反应,对多种脑炎脑膜炎病毒同时进行检测,以森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒4种病原核酸评价其检测特异性,以体外转录的病毒RNA或扩增的PCR片段评价其检测敏感性,并对流行性乙型脑炎患者临床标本进行检测.结果 成功建立了一种脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测技术.建立的检测方法可特异的检测目的病原体,且与森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒无交叉反应.该方法对不同靶标的检测灵敏度均为103拷贝/μL,临床标本检测结果均为阳性.结论 建立的脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色技术的检测方法,具有较高的检测特异性及灵敏度,检测通量高,肉眼即可观察结果,在传染病病原体检测方面具有广阔的应用前景.

细胞、组织及器官移植是治疗器官功能衰竭、癌症等重大疾病直接有效的治疗策略.免疫排斥是同种及异种移植研究领域中难以彻底攻克的难题,因此对移植受体免疫排斥反应的实时监测尤为重要,针对同种及异种移植开发具有特异度高、早期灵敏度高、非侵入、快速等优点的生物标志物及其监测方法非常迫切.微小核糖核酸(miRNA)在免疫细胞的生成、发育以及免疫性功能中发挥重要的作用.本文对常规免疫排斥监测方法的局限性、miRNA的生物学特性以及miRNA在同种和异种移植免疫排斥中的应用进行总结,以探讨miRNA在同种和异种移植免疫排斥监测中的应用前景.

伊立替康(irinotecan)不良反应与UGT1A1*6单核苷酸多态性相关,目前应用的单核苷酸多态性检测方法具有耗时长、开盖易污染、操作繁琐等缺点,因此需建立一种操作简便且不易污染的适合临床应用的新方法.本研究利用3种已知基因型的DNA样本建立基于级联核酸侵入反应的real-time PCR法检测UGT1A1*6多态性的最佳反应体系,并对其检测口腔咽拭子样本的灵敏度和准确性进行了考察.结果显示,本文成功建立了基于级联核酸侵入反应的UGT1A1*6基因多态性检测方法,可用于咽拭子样本的分型检测,其灵敏度达到6 ng DNA,分型准确性达到100%.因其取样方便对人体无创,单管闭管检测不易产生交叉污染,具有用于临床检测伊立替康的个体化用药相关UGT1A1*6基因多态性的潜力.

液体活检( liquid biopsy)以相对非侵入方式对血液及体液中的具有反映疾病标志的细胞、生物大分子的检测,涉及肿瘤、感染、自身免疫、妊娠等.由于其在肿瘤领域的广泛开展,液体活检通常主要指对血液中肿瘤细胞及相关肿瘤分子标志进行检测.包括:循环肿瘤细胞( circulating tumor cells,CTC) 、亚细胞(外泌体/微囊泡、血小板)以及循环核酸分子的检测[1-2].随着研究和实际运用的进展,可以发现液体活检的对象也正在不断拓展,循环组学( circulome)正在被提出[3].液体活检是血清学、脱落细胞学检测的延续,但其意义则更加注重对肿瘤的非创伤、动态的检测,及治疗反应、进展、耐药的确定.同时,液体活检的相关技术也与传统的血清学、细胞学的检测有很大不同.因此,液体活检是分子医学或者精准医学发展中诞生的新领域.在临床病理领域液体活检是组织病理诊断的拓展与延伸.尽管有关液体活检的许多尝试已经具有悠远的历史,但从相应的基础研究、应用意义到检测技术则是全新的探索,并且处于不断丰富和发展之中.在2018年2月美国临床肿瘤学会( ASCO)和美国病理学家学院( CAP )联合发表了对于循环肿瘤 DNA (circulating tumor DNA, ctDNA)检测应用的总结,对于其取得成果、存在问题及瓶颈进行了全面总结,为进一步优化液体活检要点、框架提供了参考[4].