迄今，能够永久性封闭创面的皮肤替代物仍是以自体皮肤细胞作为种子细胞的自体组织工程皮肤。培养的自体表皮移植物的发展经历了漫长而曲折的历程；自体组织工程复合皮肤在结构、功能与疗效上更接近自体断层皮片，成为近年来研究的热点。本文从组织工程皮肤应用研究的实际现状出发，就自体组织工程皮肤作为永久性移植物的主要研究进展、存在的主要问题、研究开发与临床应用前景进行综述，以期为自体组织工程皮肤改进及应用提供参考。

目的:探讨去细胞心内膜作为新型生物材料构建小口径组织工程血管内膜层的可行性。方法:2018年1月至2019年12月，分离新鲜猪心内膜，用包含DNase Ⅰ、RNaseA的Triton X-100＋十二烷基硫酸钠(SDS)去细胞液进行消化，获得去细胞心内膜材料，并检测其形态学和力学特征。将去细胞心内膜内表面接种CD34 ＋骨髓干细胞构建小口径血管，连接脉冲生物反应器，研究其在模拟动态状态下对细胞的黏附力。 结果:去细胞液可完全去除材料中的细胞成分，去细胞心内膜与新鲜心内膜弹性模量分别为(2.35±0.41) MPa和(2.13±0.36) MPa( n＝3， P>0.05)，对比差异无统计学意义，显示了良好的力学顺应性。对CD34 ＋骨髓干细胞具有良好的黏附性。在脉冲生物反应器下培养，当灌注压为40 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)时脱落细胞数为(15.84±4.22)×10 2( n＝3， P>0.05)，对比10、20 mmHg时无显著增加，细胞在去细胞心内膜表面存留较好，并形成完整、融合的细胞单层。 结论:去细胞心内膜具有独特表面形态结构和良好的力学顺应性等特征，有利于提高其在动态血流下对CD34 ＋细胞黏附和存留，可作为有用的小口径组织工程血管内膜层材料。

目的:探讨真菌性角膜炎（FK）的临床特征及诊断和治疗方法。方法:回顾性系列病例研究。收集2006年1月至2016年10月于山东省眼科研究所青岛眼科医院就诊的1 414例（1 414只眼）真菌性角膜炎患者的资料，对其人口学特征、致病诱因、发病时间、实验室检查方法和结果、临床特征及治疗方案进行分析。结果:1 414例FK患者中，男性877例（62.0%），女性537例（38.0%）；年龄（53.71±11.72）岁，40~60者874例（61.8%）。1 174例（83.0%）患者来自山东省，其余主要来自长江以北各省。患者职业以农民（1 211例，占85.6%）为主，发病时间以秋冬季为主。从发病到于我院就诊的时间为1~74 d，942例（67.1%）患者在症状出现后8~30 d于我院就诊。角膜损伤为主要危险因素，其中以植物外伤最为多见（367例，26.4%）。1 365只患眼通过氢氧化钾湿片直接镜检法查出菌丝，诊断阳性率为96.5%，1 270只患眼通过共焦显微镜查出菌丝，诊断阳性率为89.8%。973只患眼（68.8%）的角膜溃疡灶刮取物和（或）术后的病变角膜组织培养出真菌，其中以镰刀菌属最多见595例（61.1%），其次为链格孢霉菌属184例（18.9%）、曲霉菌属119例（12.2%）。603例（42.7%）为浅中基质浸润者，614例（43.4%）为深基质浸润者，197例（13.9%）为全层浸润。角膜溃疡灶直径以4~6 mm最为多见725例（51.6%），其次为<4 mm 372例（26.4%）、>6 mm 302例（22.0%）。498例（35.2%）合并前房积脓，34例（2.4%）合并角膜穿孔，58例（4.1%）合并眼内炎。1 198例（84.8%）患者接受手术治疗，其中包括416例（29.4%）行穿透性角膜移植术，408例（98.1%）治愈；199例（14.1%）行板层角膜移植术，193例（97.0%）治愈；532例（37.6%）角膜溃疡清创术，494例（92.8%）治愈。215例（15.2%）患者接受了单纯药物治疗，147例（68.4%）治愈。56例（3.9%）最终失去眼球，包括54例眼内容物摘除术和2例眼球摘除术。结论:FK的发病人群多为在农村居住的中老年群体。镰刀菌仍是山东地区最主要的FK病原体。角膜刮片氢氧化钾涂片直接镜检法可早期、快速诊断FK。对浅中基质浸润的患者，角膜溃疡清创术是一种便捷有效的治疗手段。对深基质浸润的患者，角膜移植术是最有效的治疗手段。 （中华眼科杂志，2020，56：286-293）

乳腺癌已成为全球女性癌症之首，有高度的肿瘤异质性，因结构和表达水平差异有不同组织类型、分化程度和分子亚型等，临床亟待个体化的治疗。类器官是在3D培养基础上建立的临床前模型，将患者来源的健康组织或肿瘤组织进行体外3D培养，用于体外模拟肿瘤特性，进行基础及临床研究，因其高度还原且保持原肿瘤组织的生物学特性、病理特征及药物反应性，极大地满足了当下精准医疗的需要，成为继三维细胞培养及患者源性肿瘤异种移植物后又一肿瘤研究模型。本文将综述乳腺癌原代细胞类器官培养的条件、培养成分及其机制和功能。

皮片移植和皮瓣移植是整形外科应用最广泛的修复重建方式，如何避免移植后皮片和皮瓣的坏死，提高皮片和皮瓣的存活质量一直是整形外科基础与临床研究中的基本问题之一，脂肪来源干细胞(ADSCs)的出现为解决这一问题带来了新的思路。该文从ADSCs的分离、鉴定和生物学特性，ADSCs在皮片移植和皮瓣移植中的应用研究等方面进行综述；同时提出了ADSCs应用中存在的问题，并对其未来进行了展望。

目的:研究膀胱平滑肌细胞与膀胱脱细胞基质(BAM)的生物相容性。方法:分离培养兔膀胱平滑肌细胞，采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体进行鉴定。将以1×10 5个/mL的单细胞悬液均匀接种于制备BAM支架上，通过与单独培养的膀胱平滑肌细胞作对照，绘制两组细胞生长曲线图，对比观察两条生长曲线的差异性。 结果:第4代兔膀胱平滑肌细胞形态为典型的"长梭样"，免疫荧光显示α-SAM表达阳性。膀胱平滑肌细胞能够在BAM上很好地黏附生长，两组细胞生长曲线基本相似。结论:膀胱平滑肌细胞与BAM生物相容性好，可用膀胱平滑肌细胞作为种子细胞，以BAM作为支架材料构建组织工程化尿路移植物。

目的:探讨血液病患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后诺卡菌肺部感染的诊治方法。方法:回顾性分析2019年9月菏泽市立医院收治的1例诺卡菌肺部感染患者诊治经过及预后，并复习相关文献。结果:患者为33岁女性。2013年4月患者诊断为骨髓增生异常综合征，2014年7月行allo-HSCT，2016年头部出现包块，病理检查诊断为弥漫大B细胞淋巴瘤，R-COP方案化疗获完全缓解。2019年3月诊断为肝脏慢性移植物抗宿主病（GVHD），予糖皮质激素治疗期间出现高热，常规抗菌药物治疗无效；经病变部位组织培养及聚合酶链反应法检测，诊断为诺卡菌感染。给予复方磺胺甲噁唑联合硫酸异帕米星及美罗培南抗感染治疗后好转。继续口服复方磺胺甲噁唑1年，肺部诺卡菌感染未复发。结论:对于allo-HSCT后防治GVHD期间出现常规抗生素治疗无效的感染，需考虑诺卡菌感染可能，含复方磺胺甲噁唑的治疗方案对其有效。

目的:明确年龄因素对人脂肪来源干细胞(ASCs)生物学特性的影响，比较不同年龄人ASCs辅助脂肪移植于裸鼠皮下的效果。方法:收集2018年10月至2019年12月就诊于中国医学科学院整形外科医院乳房整形美容中心，行腹部脂肪抽吸术的60例健康女性的剩余脂肪组织，年龄18～65岁。按供体年龄分为3组，每组20例，A组18～29岁，B组30～49岁，C组50～65岁。各年龄组的脂肪采用胶原酶分离获得血管基质成分(SVF)，应用Muse细胞分析仪检测各组脂肪中SVF的产量和活力；体外培养获得第2代ASCs，采用流式细胞仪检测各年龄组ASCs干细胞表面标志物表达水平；通过CCK-8法检测各年龄组ASCs的增殖能力，细胞划痕法检测各组细胞的迁移能力，体外成脂诱导分析各年龄组ASCs成脂分化潜能，通过RT-PCR检测成脂关键基因 PPAR-γ和 CEBP-α的表达水平。建立体内细胞辅助脂肪移植动物模型：应用随机数字表法将40只6周龄雌性BALB/c裸鼠随机分为4组，每组10只，包括3个实验组和1个空白对照组。实验组：分别将3个不同年龄组的1×10 6个ASCs和0.3 ml的脂肪颗粒混合后，注射于裸鼠背部脊柱两侧皮下；空白对照组：注射10 μl PBS与脂肪颗粒混合物。移植后3个月取材，比较各组脂肪移植物的重量和体积，HE染色评估脂肪细胞的完整性和坏死组织所占比例，通过围脂滴蛋白(perilipin)免疫荧光染色分析移植物内脂肪细胞的存活情况，通过CD31免疫组织化学染色评价脂肪移植后新生血管密度。使用SPSS 21.0软件进行数据分析，多组间样本比较应用one-way ANOVA， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:Muse细胞分析仪结果显示，A、B、C 3组SVF计数分别为(7.06±1.28)×10 5/ml、(6.90±0.32)×10 5/ml、(6.40±0.62)×10 5/ml，活力分别为82.46%±2.81%、82.01%±3.85%、77.82%±3.45%，各年龄组SVF的含量未见差异，SVF细胞活力随年龄增长呈下降趋势，组间比较差异有统计学意义( F＝5.671， P＝0.008)。各组ASCs的间充质干细胞阳性表面标志物CD90、CD44、CD105、CD73表达均在95%以上，阴性表面标志物表达均在2%以下。ASCs细胞增殖能力和迁移能力随年龄增长，逐渐减缓。体外成脂分化诱导结果：油红O染色显示A、B、C 3组的吸光度值无差异，并且成脂相关基因 PPARγ和 CEBPα表达水平无明显差异。ASCs辅助脂肪移植于裸鼠皮下后3个月，A、B、C 3组移植物重量分别为(0.18±0.02) g、(0.17±0.02) g、(0.15±0.01) g，均大于空白对照组的(0.13±0.03) g，差异有统计学意义( F＝9.274， P<0.001)。A、B、C 3组移植物剩余体积分别为(262.88±17.69) mm 3、(263.83±25.96) mm 3、(240.06±25.08) mm 3，均大于空白组的(201.81±31.48) mm 3，差异有统计学意义( F＝12.95， P<0.001)。不同年龄组间移植物重量和剩余体积分别相比较，差异有统计学意义( F＝5.231、 P＝0.012， F＝3.364、 P＝0.049)。HE染色结果显示，移植后3个月，与空白对照组相比，各年龄组ASCs辅助移植脂肪可见脂肪细胞分布均匀，纤维结缔组织及坏死组织较少，各组间脂肪细胞完整性和坏死组织比例比较，差异有统计学意义( F＝3.434、 P＝0.027， F＝9.314、 P<0.001)；不同年龄组间移植物内的脂肪细胞完整性和坏死组织占比差异无统计学意义( F＝0.282、 P＝0.756， F＝0.421、 P＝0.661)；免疫荧光染色结果显示，与空白对照组相比，不同年龄ASCs辅助脂肪移植组均可观察到较多的perilipin阳性脂肪细胞，分布均匀。CD31免疫组织化学染色结果显示：A组新生血管数为(15.70±4.16)个/mm 2，B组(17.03±8.30)个/mm 2，C组(16.68±6.71)个/mm 2，空白对照组(11.50±4.04)个/mm 2，组间比较差异有统计学意义( F＝3.523、 P＝0.019)。各年龄组新生血管密度相近，差异无统计学意义( F＝0.218、 P＝0.805)。 结论:人ASCs的增殖和迁移能力随年龄的增长出现下降趋势，但年龄因素不影响ASCs的成脂分化潜能。人不同年龄ASCs均有效地提高了裸鼠移植脂肪的存活率，年轻人群ASCs辅助脂肪移植的效果优于老年人群。

目的:利用膀胱脱细胞基质(BAM)和膀胱上皮细胞构建组织工程管状移植物(TETG)，在兔模型上验证其进行尿流改道的可行性。方法:选取雄性新西兰大白兔48只，将其分为对照组和实验组，各24只，首先制作兔的BAM，体外培养扩增兔膀胱上皮细胞，观察上皮细胞在BAM上的生长情况。将复合物包绕尿管制作成长为4 cm、长径为0.8 cm的TETG，使膀胱上皮细胞位于管腔内面，将TETG移植到兔模型上验证其进行尿流改道的可行性。分别于尿流改道术后1、2、4、8周进行组织学、免疫组化检查，术后12周进行静脉尿路造影(IVU)检查流出道的通畅情况。结果:BAM行HE检测染色显示未见细胞生长；膀胱上皮细胞种植到BAM上的生长曲线结果显示细胞生长良好。将TETG移植到动物体内进行尿流改道，结果显示，实验组均存活，取材时发现移植物与盆腔脂肪轻度粘连，未见明显尿瘘、狭窄及严重的肾积水。组织学检查揭示了有管腔上皮的生长。免疫组化检查也证实了管腔内上皮的再生情况，TETG移植到体内，随时间增长，内腔覆盖多层的成熟上皮细胞，并可见新生血管形成。术后12周行IVU和膀胱镜检未见梗阻发生。相反，对照组术后1个月内均死亡，尸体解剖见流出道有瘢痕形成、闭锁及双肾重度积水。结论:利用种植有尿路上皮细胞的BAM制作成TETG，并用于动物体内进行尿流改道是可行的，能使流出道的内腔有成熟上皮覆盖，具有防止尿外渗的功能。

目的:探讨静置后脂肪颗粒提取脂肪干细胞(PLA-ADSC)和静置后下层滤液提取的脂肪干细胞(LAF-ADSC)诱导裸鼠成脂的机制，为细胞辅助的脂肪颗粒移植提供思路。方法:2019年6月至2021年3月，于成都八大处医疗美容医院整形外科和成都市第三人民医院医学美容部手术室行正常人体的脂肪抽吸手术，将通过手术获得的脂肪组织抽吸物静置，得到上层脂肪颗粒组织进行消化、分离培养PLA-ADSC并鉴定；得到下层液体组织离心后取沉淀物，沉淀物进行消化、分离培养LAF-ADSC并鉴定；比较PLA-ADSC和LAF-ADSC分化特性及其生长能力。动物实验分实验1组和实验2组，将基质胶Matrigel移植至裸鼠体内设为对照组，比较3组裸鼠体内的成脂能力。结果:细胞实验结果显示，静置后脂肪颗粒及下层滤液沉淀物提取细胞均能贴壁生长并顺利传代，上述两种不同来源细胞均表达CD44、CD73、CD105，阳性率分别为99.5%、99.99%、99.7%，CD19、CD31、CD45则为阴性表达。成脂诱导分化结果显示，胞质内有脂滴形成，细胞油红O染色后可见脂滴呈橘红色。动物实验结果显示，移植后3个月，实验1组移植物体积均值(0.070±0.009) cm 3，实验2组移植物体积均值(0.067±0.007) cm 3，对照组移植物体积均值(0.009±0.005) cm 3，实验1组和实验2组移植物体积与对照组比较，差异均有统计学意义( t＝26.52、37.18，均 P<0.01)。实验1组移植物湿重(0.200±0.021) g，实验2组移植物湿重(0.175±0.019) g，分别与对照组组间比较差异有统计学意义( t＝11.60、9.98， P<0.05)。3个组经油红O染色后可见实验1组及2组移植物呈大体橙黄色，对照组呈散在分布的淡黄色；实验1组及2组新生组织中CD31表达呈阳性，对照组新生组织中CD31表达呈阴性。 结论:静置后脂肪抽吸物中脂肪颗粒层及下层滤液均能提取有活性ADSC，且两种来源ADSC在裸鼠体内均有良好的成脂能力。