目的:本研究旨在探讨炎性细胞因子在射频导管消融术治疗房颤大鼠中的表达及对心肌损伤的影响.方法:选择60只6周龄SPF级雄性SD大鼠,体重为180～200 g,随机将其分为空白组、模型组及射频导管消融术组各20只.其中空白组正常饲养1周;模型组及射频导管消融术组均建立房颤动物模型,空白组饲养1周后,经鼠尾注射50 μg/100 g生理盐水;模型组造模成功后,将氯化钙(10 mg/ml)与乙酰胆碱(66 μg/ml)混合后经鼠尾静脉注射;射频导管消融术组房颤造模方法与模型组相同,造模成功后3 d给予射频导管消融术,术后根据心肌肌钙蛋白T(CTnT)的水平超过0.08 ng/L则为心肌损伤组(7只),未超过则为未发生心肌损伤组(12只).结果:模型组及射频导管消融术组造模后,40只大鼠中2只大鼠死亡,造模成功率为95.00％(38/40).最终模型组19只大鼠、射频导管消融术组19只大鼠造模成功.空白组大鼠皮毛有光泽,饮食、水正常,呼吸均匀,活动灵敏;模型组大鼠毛色无光泽,眼睛充血,饮食、水减少,呼吸、心率加快,动作迟缓,乏力,目光呆滞;射频导管消融术组大鼠无明显食欲减退,心率、呼吸稍加快,眼睛充血,喜倦卧.模型组的房颤持续时间及房颤诱发时间均高于未发生心肌损伤组及心肌损伤组,心肌损伤组的房颤持续时间及房颤诱发时间均高于未发生心肌损伤组,差异具有统计学意义(均P＜0.05).空白组大鼠心肌细胞正常,排列整齐、致密,细胞形态正常;模型组大鼠心肌细胞间质增多,间隙增大,排列紊乱,存在大量炎症浸润;未发生心肌损伤组大鼠心肌组织间质稍增多,排列尚整齐,不存在明显的炎症细胞浸润;心肌损伤组:大鼠心肌细胞间质明显增多,间隙稍增加,排列稍乱,存在炎症浸润.心肌损伤组的白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)均高于空白组、未发生心肌损伤组,模型组、未发生心肌损伤组的IL-1β、IL-6、TNF-α均高于空白组,模型组的IL-1β、IL-6、TNF-α均高于未发生心肌损伤组,差异具有统计学意义(均P＜0.05).心肌损伤组的血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(iNOS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)水平均高于空白组、未发生心肌损伤组,模型组、未发生心肌损伤组的CK-MB、NO、iNOS、Caspase-3水平均高于空白组,模型组的CK-MB、NO、iNOS、Caspase-3水平均高于未发生心肌损伤组,差异具有统计学意义(均P＜0.05).结论:IL-1β、IL-6、TNF-α在房颤心肌损伤大鼠中呈高表达,其机制为上述炎性细胞因子能够调节心肌细胞功能及心肌细胞凋亡.

目的:采用多因素造模法联合链脲佐菌素(STZ)配合高糖高脂饲料建立脾胃气虚型糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠模型,并对该模型进行评价.方法:20只SPF级Wistar大鼠依据随机数字表随机分为空白组8只和造模组12只,以多因素造模法复制脾胃气虚型大鼠模型,制定脾胃气虚型模型评价量表,将符合条件大鼠纳入实验;采用小剂量多次注射STZ联合高糖高脂饲料复制DGP大鼠模型,于实验6周末取材.观察大鼠随机血糖、体质量、胃排空率、小肠推进率;Elisa法检测血清中血清淀粉样蛋白(SAA)、D-木糖、乳酸脱氢酶(LDH)的含量;光镜下观察脾脏病理结构改变.结果:与空白组比较,造模组大鼠一般情况(精神状态、粪便、饮食量)较差、体质量降低,差异有统计学意义(P<0.05);造模组随机血糖显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,造模组胃排空率、小肠推进率、SAA、D-木糖、LDH含量降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);光镜下显示造模组脾脏被膜增厚,红髓和白髓分界限不清,淋巴细胞减少.脾胃气虚型DGP证型评价:造模组大鼠有神疲倦怠、体质量降低、蜷缩、活动度差、眯眼、毛色暗淡、舌色偏暗等脾胃气虚证表现.结论:多因素造模法建立的大鼠模型符合脾胃气虚型DGP大鼠标准.

目的 探讨复方地黄颗粒通过调节泛素-蛋白酶体系统相关蛋白变化治疗帕金森病(PD)阴虚动风证的分子机制.方法 随机选取 26 只SPF级雄性SD大鼠作为正常对照组、假手术组,每组 13 只,其余大鼠采用 6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑部偏侧注射损毁黑质法制备PD阴虚动风证大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,美多芭组(150 mg·kg-1),复方地黄颗粒低、中、高剂量组(1.75、3.5、7 g·kg-1),每组 13 只.各组连续灌胃给药 28 d.观察各组大鼠一般情况及神经行为学表现;免疫组化法、Western blot及 qPCR 法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体组织中泛素(UB)、泛素激活酶(UBE1)、泛素结合酶(UBE2A)、泛素羧基末端水解酶(UCH-L1)阳性细胞表达、蛋白及mRNA表达水平;ELISA法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体中多巴胺(DA)含量变化.结果 正常对照组与假手术组一般情况无明显差异,旋转圈数、悬挂时间及移动格数差异无统计学意义,与假手术组比较,模型组大鼠精神差,易激惹,肢体震颤,行动迟缓,毛色黯黄,饮食少,体质量减轻,旋转圈数增加、悬挂时间及移动格数减少(P<0.01),损毁侧纹状体中UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1 阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),DA含量明显减少(P<0.01);与模型组比较,美多芭组及复方地黄颗粒各剂量组大鼠一般情况有所改善,旋转圈数减少、悬挂时间及移动格数增加(P<0.05,P<0.01),UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1 阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平提高(P<0.05,P<0.01),DA含量增加(P<0.01);行为学检测及各指标表达水平以美多芭组和复方高剂量组改善最明显(P<0.05,P<0.01),此二者无统计学意义(P>0.05).结论 复方地黄颗粒可能通过调控泛素-蛋白酶体系统相关蛋白的表达,减少异常蛋白聚集,从而减轻DA含量缺失,发挥治疗PD阴虚动风证的作用,并以复方地黄颗粒高剂量效果最佳.

哺乳动物的毛色在自我保护、求偶和调控体温上有着重要作用(章誉兴等,2021).野生动物中白化个体广泛存在,白化主要是由于体内酪氨酸功能减退或缺失,可分为完全白化和局部白化(Obara,1983;Buchanan,1985;陈清西,宋康康,2006).

目的 通过比较两种不同的压力性损伤大鼠模型的建立方法,探索更合适的压力性损伤动物模型制备方法.方法 将18只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=6)、模型A组(n=6)和模型B组(n=6).对照组对模拟造模部位脱毛后进行碘伏处理.模型A组采用单纯深部组织异物植入法进行纵向加压;模型B组使用磁铁加压法进行横向加压,记录制备各组大鼠产生压力性损伤模型的全程时间及各分期时间,观察大鼠的一般情况,并进行成模率、死亡率、感染率的比较.结果 肉眼观察到模型A组和模型B组均逐渐出现受压部位红肿、溃烂,出现渗血、渗液并伴有坏死现象.模型A组与模型B组产生压力性损伤全程时间比较:两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).模型A组与模型B组产生压力性损伤各期时间比较:Ⅰ期两组之间差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅱ期两组之间差异有统计学意义(P＜0.05);Ⅲ期两组之间差异有统计学意义(P＜0.05);Ⅳ期两组之间差异有统计学意义(P＜0.05).对照组大鼠精神、运动评分与模型A组、模型B组比较有显著性差异(P＜0.05).模型A组大鼠与模型B组大鼠一般状态有明显区别,均出现毛色黯淡、活跃度下降的现象.模型A组大鼠与模型B组成模率为100％.模型A组死亡率、感染率高于模型B组,分别为33.34％、16.70％.结论 两种方式均可成功制备压力性损伤Ⅳ期模型,二者既有共性也有各自特点,磁铁加压法用时短,大鼠一般状态良好,死亡率和感染率低,适合短时间内干预性研究;单纯深部组织异物植入法用时长,需要大鼠有一定耐受性,感染率高,死亡率高,可运用于长期的观察类压力性损伤大鼠的研究.

目的 探讨杜仲改善大鼠产后抑郁的作用机制.方法 受孕雌鼠随机分为正常组、产后抑郁组和杜仲低、高剂量组(1.34、2.68 g/kg,以生药计),每组10只.除正常组外其余各组大鼠运用孕期旁观电击法建立产后抑郁大鼠模型;造模的同时,给药组大鼠灌胃相应药物,正常组及产后抑郁组大鼠灌胃生理盐水,持续21 d.观察各组大鼠实验期间的一般情况,通过旷场实验、Morris水迷宫实验和糖水偏好实验进行行为学评价,检测各组大鼠血清中皮质酮(CORT)、下丘脑中促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)和尿皮质素(UCN)、垂体中促肾上腺皮质激素(ACTH)水平,以及海马组织中CRF受体1(CRFR1)、CRFR2及电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)蛋白表达水平,海马组织凋亡细胞比例及JC-1高电位细胞比例,并观察海马组织形态.结果 与产后抑郁组比较,杜仲高剂量组大鼠食欲、精神、毛色均有所改善,体重有所增加;垂直运动、水平运动、自我梳理得分均显著升高(P＜0.05);第2～4天逃避潜伏期均显著缩短;穿越平台次数显著增加,每次穿越时间显著延长(P＜0.05);孕20 d及产后30 d糖水消耗比率显著升高(P＜0.05);CRF、UCN、ACTH、CORT水平,噬仔率,CRFR2、VDAC1蛋白表达水平,海马组织凋亡细胞比例均显著降低(P＜0.05);JC-1高电位细胞比例显著升高(P＜0.05);神经元细胞周围水肿现象明显改善.结论 杜仲可能通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴的过度激活,降低CRFR2的表达水平,进而抑制VDAC1的表达,并减少神经元细胞的凋亡,从而改善产后抑郁症状.

目的 探讨人参皂苷Rg1延缓X射线颅脑照射后小鼠海马衰老的可能机制.方法 将40只C57BL/6J小鼠随机均分为空白对照组(Con组)、颅脑照射组(IR组)、人参皂苷Rg1预处理组(Rg1组)、人参皂苷Rg1预处理颅脑照射组(Rg1+IR组).观察各组小鼠体质量、进食情况、活动状态、精神状态、毛色与大小便评估健康状况;采用Morris水迷宫评估小鼠认知能力;采用SA-β-Gal染色检测海马齿状回衰老细胞数量;采用转录组测序分析确定Rg1抗辐射衰老的靶点;采用qRT-PCR和蛋白免疫印迹检测靶点的表达水平.结果 与Con组相比,IR组小鼠体质量减轻、进食量减少、活动减少、精神倦怠、毛发灰暗、大便稀溏,出现明显的认知能力下降,海马齿状回衰老细胞增多(P＜0.05).与IR组相比,Rg1+IR组小鼠上述指标均有改善(P＜0.05).甲状腺素视黄质运载蛋白(TTR)为筛选出的最显著靶点.IR组小鼠海马中TTR表达较Con组升高(P＜0.05),而Rg1+IR组TTR表达较IR组降低(P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1可能通过抑制TTR延缓X射线颅脑照射后小鼠的海马衰老,从而保护认知能力.

以小鼠毛色为教学背景,通过"小鼠基因型相同、毛色不同的可能原因""小鼠毛色受什么因素影响""小鼠毛色是否可遗传"3个问题的驱动,尝试构建表观遗传的概念;最后以"小鼠毛色基因是否只控制毛色这一性状"揭示基因与性状的关系,梳理表观遗传学与经典遗传学的关系.本教学探究对生物学的概念教学具有一定的参考意义.

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响.方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只.检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达.结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善.与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P＜0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P＜0.05).模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P＜0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P＜0.05).与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P＜0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P＜0.05).结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻.

为研究肉桂醛对利血平诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠模型的神经保护作用机制,72只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(美多芭)组以及肉桂醛高、中、低剂量组.除空白组外,其余各组每隔1 d上午腹腔注射利血平1次(0.1 mg·kg-1),同时每天下午灌胃肉桂醛和美多芭溶液.实验过程中进行旷场实验、转棒实验及口腔咀嚼运动评估.实验结束时取脑并固定,地高辛荧光原位杂交法检测多巴胺受体D1(dopamine receptor D1,DRD1)的阳性表达;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测脑中多巴胺(dopamine,DA)、3,4-二羟基苯乙酸(3,4-dihydroxypheny-lacetic acid,DOPAC)等神经递质含量的变化;RT-PCR和Western blot检测黑质区酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)mRNA和蛋白表达水平.结果显示,注射利血平后,模型组大鼠毛色变黄变脏,拒捕行为减弱,体质量减少,自发活动行为与探索行为减少,协调运动能力下降,口腔咀嚼次数增多,认知能力下降,中脑黑质(substantia nigra,SN)区DRD1阳性表达面积占比下降,TH蛋白及mRNA表达下调,α-Syn蛋白及mRNA表达上调.肉桂醛干预后,对PD模型动物有明显疗效,大鼠自发运动行为、在棒停留时间、运动时间及运动距离、站立次数增加,口腔咀嚼次数减少;黑质中DRD1阳性表达面积占比增多,α-Syn蛋白及mRNA表达下调,TH蛋白及mRNA表达上调,且脑中DA、DOPAC和高香草酸(homovanillic acid,HVA)神经递质水平上调.该研究可为临床治疗及预防PD提供新的实验依据.