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壳寡糖上调SRBI核心岩藻糖基化修饰水平减弱小鼠动脉粥样硬化斑块形成
编辑人员丨2024/5/11
目的 从蛋白糖基化修饰角度探讨壳寡糖(COS)减弱动脉粥样硬化(AS)斑块形成的机制.方法 将 40 只ApoE-/-小鼠随机分为对照组和COS组.对照组饲给予高脂饲料 12 周,COS组给予高脂饲料+COS(每天灌胃,500 mg/kg)12 周.全自动生化分析仪检测两组小鼠的血脂水平并对主动脉斑块切片进行HE和油红O染色.凝集素芯片、液相色谱-串联质谱、酶联免疫吸附试验检测血清中糖蛋白变化.胆固醇酯流出实验和游离胆固醇酯测定实验评价清道夫受体B类成员 1(SRBI)糖基化修饰位点改变对巨噬细胞胆固醇流出量的影响.结果 COS显著降低小鼠TC和LDL-C水平(P<0.05),但对TG、HDL-C、ApoA1 和ApoB100 无影响.与对照组相比,COS组主动脉内膜厚度和斑块大小明显变薄、变小(P<0.05).两组小鼠血清中变化最明显的小扁豆凝集素(LCA)结合蛋白分子量为 80~90 ku,清道夫受体B类成员 1 为其中之一.COS促进了细胞内胆固醇的流出,抑制了游离胆固醇酯的积累(P<0.05).SRBI敲低或N108 糖基化位点突变可抑制COS引起的胆固醇流出,增加细胞内游离胆固醇的积累(P<0.05).结论 COS通过增加SRBI糖基化水平促进脂质外排,从而减少动脉粥样硬化的形成.
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编辑人员丨2024/5/11
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下调清道夫受体B类成员1表达对胃癌细胞AGS增殖、迁移及侵袭的影响
编辑人员丨2024/2/3
目的 探讨清道夫受体B类成员1(SCARB1)对胃癌细胞(AGS)增殖、迁移及侵袭的影响及其机制.方法 采用RT-qPCR和Western blot检测SCARB1在人胃黏膜上皮细胞GES1和人胃癌细胞AGS中的表达水平;将AGS细胞随机分为空白对照组、阴性对照组和实验组,在实验组中使用RNA干扰技术下调SCARB1表达,阴性对照组使用siRNA阴性序列进行转染,空白对照组不转染siRNA;克隆形成实验和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法评估各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,细胞划痕实验和Transwell实验分析各组细胞横向迁移、纵向迁移和侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)及PI3K/AKT通路相关蛋白的表达.结果 与GES1细胞比较,SCARB1在AGS中表达升高(P<0.05),AGS细胞SCARB1干扰效率为(68.06±2.04)%;实验组细胞克隆形成率下降,在转染24 h、48 h及72 h时细胞活力均低于阴性对照组,实验组细胞凋亡率高于阴性对照组(P<0.05),阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义;实验组在24 h和48 h的平均划痕宽度大于阴性对照组,48 h时细胞迁移和侵袭数量少于阴性对照组(P<0.05),阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义;实验组MMP2、MMP9、AKT、p-AKT(ser473)、PI3K(p110)表达下降,p-AKT/AKT减少(P<0.05),阴性对照组与空白对照组比较,差异无统计学意义.结论 SCARB1在AGS中高表达,下调SCARB1表达作用于PI3K/AKT信号通路和MMP2、MMP9蛋白而抑制胃癌细胞AGS增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡.
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编辑人员丨2024/2/3
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脑白质高信号伴认知功能障碍患者环状RNA的差异性表达
编辑人员丨2023/8/5
目的:脑白质高信号(white matter hyperintensity,WMH)是导致认知功能障碍的重要因素,机制目前仍未阐明.近年来研究发现环状RNA(circular RNA,circRNA)在脑血管疾病中存在差异性表达.本研究旨在分析circRNA在WMH伴认知功能障碍患者外周血单个核细胞中的表达谱,筛选其中差异性表达的circRNA,探讨circRNA在WMH伴认知功能障碍中的作用.方法:利用circRNA基因芯片检测WMH伴认知障碍者、WMH不伴认知障碍者及正常对照者(各纳入3例,男女比为2?1)外周血单个核细胞circRNA表达谱.筛选WMH伴认知障碍者的差异性表达circRNA,差异性表达circRNA的筛选标准为表达差异倍数变化(fold change,FC)≥2.0(|log2FC≥1)且P<0.05.采用TargetScan和miRanda靶基因分析软件预测相关靶miRNA,Genespring软件预测靶基因.结果:与对照组比较,WMH伴认知障碍组显著上调的circRNA有5条,下调的有3条;WMH不伴认知障碍组显著上调的circRNA有8条,下调的有2条.WMH伴认知障碍组的circRNA表达谱分别与WMH不伴认知障碍组、对照组比较,未发现共同差异表达的circRNA;与对照组比较,WMH伴认知障碍组、WMH不伴认知障碍组的circRNA表达谱中hsa_circ_0092222均表达上调,hsa_circ_0000662和hsa_circ_0083773均表达下调,且它们在2组间的表达差异无统计学意义(均P>0.05).预测到hsa_circ_0092222有2个靶miRNA(hsa-miR-19a-3p、hsa-miR-19b-3p),靶基因为核糖体蛋白S4,Y连锁1(ribosomal protein S4,Y-linked 1,RPS4Y1);hsa_circ_0000662有1个靶miRNA(hsa-miR-194),靶基因为轴抑制因子1(axis inhibitor 1,AXIN1);hsa_circ_0083773有7个靶miRNA,靶基因为重组清道夫受体A类成员3(recombinant scavenger receptor class A member 3,SCARA3).结论:WMH患者的circRNA表达谱发生了显著变化;差异性表达的circRNA可能是导致脑白质出现高信号的原因;hsa_circ_0092222、hsa_circ_0000662、hsa_circ_0083773可能靶向吸附靶miRNA,调节靶基因的表达,通过Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)/信号转导与转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription,STAT3)信号通路、Wnt信号通路导致脑白质的损伤.未发现circRNA表达谱在WMH伴与不伴认知障碍患者中的显著差异,WMH患者出现认知障碍可能有其他发病机制.
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编辑人员丨2023/8/5
