目的 探讨温阳复元方对miRNA-137/线粒体铁死亡通路的调控作用,阐明该方对脑缺血再灌注损伤(CIRI)的神经保护作用机制.方法 线栓法制备大鼠CIRI模型,将144只SD大鼠随机分为假手术(SO)组、模型(I/R)组、补阳还五汤对照(BYHW)组、温阳复元方(WYFY)组、温阳复元方+miRNA-137模拟物(WYFY+mimic)组、温阳复元方+miRNA-137抑制物(WYFY+Inhibitor)组,每组按再灌注时间点分为3个亚组.采用Zea-Longa评分法进行神经功能缺损评分(NFS);TTC染色测量脑梗死体积;qRT-PCR和Western blot法观察miRNA-137、膜铁转运蛋白(FPN)和二价金属离子转运体1(DMT1)的mRNA及其蛋白表达水平.结果 ①NFS结果:I/R组NFS较SO组显著增加(P＜0.01),与I/R组相比,BYHW组NFS仅在12 h时评分降低(P＜0.05),而WYFY组在24 h和3 d的 NFS 明 显降低(P＜0.05或P＜0.01),WYFY+mimic组NFS显著下降(P＜0.01),WYFY+Inhibitor组在3 d时NFS降低(P＜0.05);与WYFY组相比,WYFY+mimic组NFS仅在12 h时明显降低(P＜0.05).②TTC染色结果:I/R组梗死体积较SO组显著增大(P＜0.01),BYHW组和WYFY组较I/R组明显减小(P＜0.05或P＜0.01),WYFY组梗死体积较BYHW组进一步减小(P＜0.01);相较于WYFY组,WYFY+mimic组能进一步减小其梗死体积(P＜0.05),而 WYFY+Inhibitor组梗死灶明显增大(P＜0.05).③miRNA-137 mRNA表达水平:I/R组miRNA-137 mRNA的表达较SO组显著下降(P＜0.01),WYFY治疗后其表达量显著增加(P＜0.01),且WYFY组其表达水平较BYHW组进一步增高(P＜0.01);与WYFY组同期比较,WYFY+mimic组miRNA-137 mRNA表达量均进一步升高(P＜0.01),WYFY+Inhibitor组抑制该表达(P＜0.01).④FPN mRNA及蛋白表达水平:I/R组FPN mRNA和蛋白表达水平较SO组均降低(P＜0.01),WYFY组能显著增加其表达(P＜0.01),该组在12 h和3 d时的表达量较BYHW组进一步增加(P＜0.05或P＜0.01);与WYFY组同期对比,WYFY+mimic组其表达水平在24 h及3 d时增加(P＜0.01),而WYFY+Inhibitor组其表达水平均降低(P＜0.01).⑤DMT1 mRNA及蛋白表达水平:I/R组DMT1 mRNA和蛋白表达量较SO组均显著增加(P＜0.01);与I/R组比较,WYFY能降低其表达水平(P＜0.01),且WYFY组在3 d时其表达量较BYHW组进一步降低(P＜0.05);与WYFY组同期相比,WYFY+mimic组其表达水平在24 h和3d时均降低(P＜0.01),而WYFY+Inhibitor组其表达水平均显著增加(P＜0.01).结论 温阳复元方可能通过上调miRNA-137的表达,进而上调铁转运蛋白FPN的表达,下调DMT1的表达,调节铁代谢,最终抑制线粒体铁死亡,发挥其神经保护作用,其疗效优于补阳还五汤.

目的 观察温阳复元方对脑缺血再灌注后大鼠铁调节蛋白1(IRP1)和96 序列相似家庭成员A(FAM96A)表达的影响,探讨其脑保护机制.方法 将 84 只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、温阳复元方组和补阳还五汤组,每组21 只.除假手术组外,其余组采用改良Longa线栓法建立脑缺血再灌注模型.温阳复元方组和补阳还五汤组大鼠在造模前30 min分别给予温阳复元方14.04 g/kg和补阳还五汤11.43 g/kg灌胃,大鼠清醒后1h继续予以原方灌胃,假手术组、脑缺血再灌注组给予生理盐水灌胃.分别于再灌注12 h、24 h、3 d时对各组大鼠进行神经功能缺损评分,随后处死大鼠取脑组织,分别采用RT-qPCR、免疫组化法检测缺血灶脑组织中IRP1、FAM96A mRNA和蛋白表达情况.结果 脑缺血再灌注组大鼠再灌注12 h、24 h、3 d时神经功能缺损评分均明显高于假手术组(P均<0.05);温阳复元方组大鼠再灌注12 h、24 h、3 d时神经功能缺损评分均明显低于同期脑缺血再灌注组(P均<0.05),且再灌注 3d时明显低于同期补阳还五汤组(P<0.05);补阳还五汤组仅在再灌注12h时神经功能缺损评分明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05).脑缺血再灌注组再灌注12 h、24 h、3 d时IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值均明显高于同期假手术组(P均<0.05);温阳复元方组IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值随再灌注时间延长逐渐降低,再灌注3d时最低,与脑缺血再灌注组相应时间点比较差异均有统计学意义(P均<0.05),且再灌注3d时IRP1 mRNA相对表达量和再灌注24 h、3 d时FAM96A mRNA相对表达量及IRP1、FAM96A蛋白表达平均光密度值均明显低于同期补阳还五汤组(P均<0.05);补阳还五汤组IRP1、FAM96A mRNA相对表达量和蛋白表达平均光密度值随再灌注时间延长逐渐升高,但再灌注12 h、24 h时均明显低于同期脑缺血再灌注组(P均<0.05),再灌注3d时与脑缺血再灌注组比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 温阳复元方可以通过下调IRP1 和FAM96A表达起到保护大鼠脑缺血再灌注损伤的作用.

目的:阐明大鼠脑缺血再灌注(I/R)后miR-137对转铁蛋白受体(TFR)和胸腺癌抵抗蛋白(BCRP)表达的调控作用及温阳复元方的干预效应.方法:75只SD大鼠分为五组,假手术组和模型组予0.9％氯化钠溶液灌胃,余组予温阳复元方灌胃,miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠使用脑立体定位法分别将miR-137模拟剂和miR-137空载体注射到缺血侧MCA区,成模后再灌注24 h、7 d、14 d大鼠取材;评价各组大鼠的神经功能缺损评分以及TTC染色;分别通过RT-qPCR、Western blot检测各组大鼠脑组织中相关蛋白和mRNA的表达情况.结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺陷评分较高(P＜0.01);成模后大鼠脑组织出现明显的白色梗死灶.与模型组比较,温阳复元方组、miR-137模拟组和miR-137模拟对照组大鼠脑组织中miR-137以及TFR mRNA和蛋白表达量均明显降低,其中miR-137模拟组降低最为显著(P＜0.01);同时,大鼠脑组织中BCRP mRNA和蛋白表达均明显升高,其中miR-137模拟组升高最为明显(P＜0.01).结论:miR-137可能通过下调TFR、上调BCRP的表达,从而达到对大鼠神经元的保护作用,温阳复元方能进一步增强其保护作用.

目的:观察扶阳复元汤对缺血性中风恢复期患者临床疗效及S-100B蛋白、神经肽Y的影响.方法:将60例缺血性中风恢复期患者随机分为对照组和治疗组各30例,对照组在西医常规治疗的基础上采用补阳还五汤治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上采用扶阳复元汤治疗,两组患者均以4周为1个疗程,1个疗程后观察两组患者治疗前后NIHSS评分,S-100B蛋白、神经肽Y含量变化.结果:对照组有效率为70.00％,治疗组有效率为83.33％,两组有效率比较,差异有统计学意义(P＜0.05);两组缺血性中风恢复期患者治疗后NIHSS评分较治疗前显著升高(P＜0.05),且组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);两组缺血性中风恢复期患者治疗后S-100B蛋白、神经肽Y含量均显著下降(P＜0.05),且组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:温阳复元方可以明显改善缺血性中风恢复期患者的生活质量,其机制可能与其下调血清S-100B蛋白、血浆NPY含量相关.

目的 观察温阳复元方治疗缺血性脑卒中恢复期患者临床综合疗效及其对血清S-100B蛋白、血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和血浆神经肽(NP)Y表达水平的影响.方法 采用多中心、随机对照的原则,将广西3家医院(广西中医药大学第一附属医院、广西中医药大学附属瑞康医院及南宁市中医医院)入选的230例缺血性脑卒中恢复期患者分为治疗组(温阳复元方+西医常规治疗)和对照组(补阳还五汤+西医常规治疗),每组115例.治疗4 w后,观察两组临床综合疗效及治疗前后两组血清S-100B、hs-CRP和血浆NPY的表达水平.结果 治疗组临床疗效总有效率(90.8％)明显高于对照组(76.4％,P<0.05),与脑损伤密切相关的血清S-100B、hs-CRP和血浆NPY表达水平下降程度明显大于对照组(P<0.05).结论 温阳复元方可以明显改善缺血性脑卒中恢复期患者的临床综合疗效,其机制可能与其下调血清S-100B、hs-CRP和血浆NPY水平有关.

目的:探讨温阳复元方对缺血性脑卒中患者的疗效及对运动功能、生存质量影响.方法:选取缺血性脑卒中患者88例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,各44例.对照组采取卒中病常规用药治疗,观察组在对照组基础上给予温阳复元方治疗.比较两组临床疗效,治疗前、治疗1个及两个疗程后中医证候积分、神经功能、运动功能、生活自理能力、脑血流动力及生存质量情况.结果:观察组1个疗程、两个疗程后中医证候积分、FMA评分、Barthel指数、QOL-BREF评分均高于对照组、NIHSS评分均低于对照组(P<0.05);两个疗程后,观察组R水平低于对照组,DR及Vmin均高于对照组(P<0.05);观察组总有效率93.18％ 高于对照组72.73％(P<0.05).两组患者治疗期间均未发生明显的药物不良反应情况(P>0.05).结论:温阳复元方可显著改善缺血性脑卒中患者运动功能和生活活动能力,提高生存质量,临床疗效确切,未见明显不良反应.

目的 系统归纳分析中药治疗胸腰椎压缩骨折患者便秘的组方用药规律,为临床治疗该病提供参考依据.方法 计算机检索中国知网、万方数据库和维普数据库中有关中药治疗胸腰椎压缩骨折患者便秘的临床随机对照研究文献,采用IBM SPSS Modeler 18.0和IBM SPSS Statistics 26.0等软件对文献中的中药进行频数、性味归经及功效分析,并通过关联规则及聚类分析等方法探讨药物的内在规律.结果 最终纳入文献74篇,涉及药物77味,药物累及使用频次678次;使用频率≥6次的药物有30味,使用频率最高的前5味药物分别是大黄(9.59％)、甘草(6.93％)、当归(6.64％)、厚朴(6.49％)、桃仁(6.49％).共有15种药物类别,其中补虚药(22.48％)、活血化瘀药(19.76％)、泻下药(17.35％)使用频率较高.高频药物关联规则分析结果显示,大黄与甘草的关联性最强(支持度为63.51％).聚类分析将30味高频药物分为5类.结论 胸腰椎压缩骨折便秘患者病性多为本虚标实,治疗上以活血化瘀、泻下通便为主;同时辨证辅以滋阴、温阳、理气等法.筛选出的复元活血汤、增液汤、大承气汤及其他药对组合可以为临床治疗该病提供组方思路.

目的 从线粒体铁死亡相关基因胸腺癌抵抗蛋白(BCRP)/人类猫白血病C亚类病毒受体(FLVCR)角度探讨温阳复元方对大鼠脑缺血再灌注(Cerebral ischemia-reperfusion,I/R)损伤的神经保护作用机制.方法 采用线栓法制备大鼠脑I/R模型,将84只SD雄性大鼠随机分为假手术组(SO)、模型组(MCAO)、补阳还五汤对照组(BYHW)及温阳复元方组(WYFY),每组21只,于再灌注后12h、3d和7d取材(n=7).于缺血2h和取材前对大鼠进行神经功能缺损评分;采用透射电镜(TEM)观察再灌注3d时大鼠梗死灶周围的线粒体超微结构变化;通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白印迹法(WB)观察各时间点BCRP/FLVCR mRNA及蛋白表达水平.结果 ①SO组无神经功能缺损,MCAO组神经功能评分显著升高(P＜0.01);与MCAO组相比,BYHW组其评分仅在12h时显著减少(P＜0.01),WYFY组其评分在各时间点均显著降低(P＜0.01);而WYFY组于7d时其评分较BYHW组进一步下降(P＜0.05).②TEM结果显示:SO组大鼠线粒体结构完整,MCAO组线粒体形态异常,可见神经元线粒体体积变小,外膜破裂,线粒体嵴减少,BYHW和WYFY治疗后能明显减轻上述损害,而WYFY组其线粒体损害较BYHW组进一步减轻.③BCRP mRNA及蛋白表达变化:SO组可以检测到较高的BCRP mRNA和蛋白表达,MCAO组其mRNA及蛋白表达在各时间点均显著下降(P＜0.01);与MCAO组同期对比,BYHW和WYFY治疗后均能提高其mRNA和蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01);而WYFY组其mRNA和蛋白表达较BYHW组进一步升高(P＜0.01).④FLVCR mRNA及蛋白表达变化:SO组可以检测到较高的FLVCR mRNA和蛋白表达,MCAO组其mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01);与MCAO组同期比较,BYHW组和WYFY组其mRNA和蛋白表达量显著增高(P＜0.01);与BYHW组相比,WYFY组均能进一步增加其mRNA和蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01),于7d时达最高峰(P＜0.01).结论 温阳复元方可能通过上调BCRP/FLVCR表达,减少细胞内铁过载,增加血红素铁的外流,调节铁代谢,抗氧化应激,进而抑制线粒体铁死亡,发挥神经保护作用,其疗效优于补阳还五汤.

目的:观察温阳复元方对脑缺血再灌注损伤模型大鼠JNK1、Bax表达的影响,探究其相关的作用机制.方法:将32只雄性大鼠随机分为五组,模型组、假手术组给予0.9％氯化钠溶液灌胃,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组分别按1.5、3、6 ml剂量给予温阳复元方灌胃.观察成模后各组大鼠TTC染色及第1、3、7天的神经功能缺陷评分;Nissl染色观测组织病理学;IF和RT-qPCR检测脑组织中JNK1、Bax阳性细胞和mRNA表达.Western blotting检测大鼠脑组织中JNK1、Bax蛋白表达.结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺陷评分较高,差异有统计学意义(P＜0.01).造模后,大鼠脑组织出现明显的白色梗死灶,缺血侧神经元轮廓模糊,部分胞质自溶,颗粒脱失,着色不均匀,胞核碎裂消失,尼氏小体含量明显减少,结构不清.与模型组比较,第1、3、7天温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组的神经功能缺陷评分均低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与模型组比较,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组JNK1、Bax阳性细胞数和mRNA表达均低,且温阳复元方高剂量组最低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与模型组比较,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组p-JNK1、Bax、p-Bax蛋白表达均低,且温阳复元方高剂量组最低,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论:脑缺血再灌注损伤可能与大脑组织中的JNK1、Bax蛋白增多有关,温阳复元方通过抑制JNK1、Bax蛋白活化,减少神经细胞凋亡,延缓疾病进展,且以高剂量效果较好.