目的:评价N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA受体)在七氟烷麻醉致老龄小鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法:清洁级健康雄性C57BL/6小鼠90只，18月龄，体重27~30 g，采用随机数字表法分为3组( n＝30)：对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)和七氟烷麻醉+NMDA受体拮抗剂盐酸美金刚组(S+M组)。S组和S+M组小鼠连续3 d吸入3%七氟烷2 h，S+M组于每次吸入七氟烷前1 h腹腔注射盐酸美金刚20 mg/kg，C组只吸入纯氧。分别于麻醉前1 d、麻醉后3和7 d时每组随机取10只小鼠行Morris水迷宫实验。Morris水迷宫实验结束后立即处死小鼠取海马，于光镜下观察病理学结果，采用流式细胞术测定神经元程序性坏死率和胞浆游离钙离子浓度([Ca 2+] i)，Wes-tern blot法检测NMDA受体亚型GluN2A、GluN2B和受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)的表达。 结果:与C组比较，S组和S+M组麻醉后各时点逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数减少，海马[Ca 2+] i和神经元程序性坏死率升高，GluN2A、GluN2B和RIP1表达上调( P<0.05)，病理学损伤加重；与S组比较，S+M组麻醉后各时点逃避潜伏期缩短，穿越原平台位置次数增加，海马[Ca 2+] i和神经元程序性坏死率降低，GluN2A、GluN2B和RIP1表达下调( P<0.05)，病理学损伤减轻。 结论:NMDA受体参与了七氟烷麻醉致老龄小鼠认知功能障碍的过程，其机制可能与促进海马神经元程序性坏死有关。

目的:评价七氟烷对大鼠离体海马神经元程序性坏死的影响及其与兰尼碱受体的关系。方法:原代培养SD大鼠胎鼠的海马神经元，培养7 d时，以5×10 5个/ml细胞密度接种于培养孔(100 μl/孔)或培养瓶(3 ml/瓶)中，采用随机数字表法分为3组( n＝24)：对照组(C组)、七氟烷组(S组)和兰尼碱受体拮抗剂组(R组)。C组常规培养，R组加入兰尼碱受体拮抗剂丹曲林，终浓度为3 μmol/L，30 min后将S组和R组细胞放置于含2%七氟烷的培养箱中，37 ℃培养5 h。收集细胞，倒置显微镜下观察神经元形态，采用流式细胞术检测细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca 2+] i)，采用Western blot法检测兰尼碱受体和磷酸化人混合系列蛋白激酶样结构域(p-MLKL)的表达，采用免疫荧光法检测受体相互作用蛋白激酶3的表达，计算程序性坏死率。 结果:与C组比较，S组和R组神经元[Ca 2+] i升高，兰尼碱受体和p-MLKL表达上调，程序性坏死率升高( P<0.05)；与S组比较，R组神经元[Ca 2+] i降低，兰尼碱受体和p-MLKL表达下调，程序性坏死率降低( P<0.05)。C组神经元形态未见明显异常，S组神经元胞体皱缩，突起断裂及突起间网络稀疏；R组神经元胞体圆润，形态接近正常。 结论:七氟烷可导致大鼠离体海马神经元程序性坏死，其机制与其上调兰尼碱受体表达，导致钙超载有关。

目的:观察缺氧缺糖条件下谷氨酸(AMPA)受体相互作用蛋白(GRIPs)表达的变化及对少突胶质前体细胞(OPCs)凋亡的影响，探讨GRIPs在AMPA受体兴奋性毒性中的作用。方法:OPCs分为对照组、缺氧缺糖60 min组和缺氧缺糖120 min组，通过实时荧光定量PCR及蛋白印迹法(Western blot)检测缺氧缺糖条件下GRIP1、GRIP2 mRNA和蛋白的表达情况；再次将OPCs分为空白对照组、OPCs＋缺氧缺糖组、OPCs＋环磷酸腺苷(cAMP)＋缺氧缺糖组、OPCs＋cAMP＋缺氧缺糖＋GRIP1小干扰RNA(siRNA)组、OPCs＋cAMP＋缺氧缺糖＋GRIP1 siRNA阴性对照组、OPCs＋cAMP＋缺氧缺糖＋GRIP2 siRNA组、OPCs＋cAMP＋缺氧缺糖＋GRIP2 siRNA阴性对照组，TUNEL试剂盒检测各组细胞凋亡情况，Fluo-4荧光探针观察胞内游离钙变化。结果:缺氧缺糖引起OPCs损伤，光学显微镜下显示细胞轮廓不清晰，胞体回缩。缺氧缺糖60 min后GRIP1(1.233±0.060比1.003±0.079， P<0.05)和GRIP2(1.396±0.069比1.001±0.037， P<0.05)表达明显高于对照组，且缺氧缺糖时间越长，GRIP1(1.416±0.064比1.233±0.060， P<0.01)和GRIP2(1.680±0.018比1.396±0.069， P<0.01)表达水平越高。RNAi分别下调GRIP1和GRIP2，细胞内游离钙离子水平降低(0.054±0.003比0.074±0.003， P<0.01；0.060±0.003比0.074±0.003， P<0.01)，细胞凋亡率下降[(20.703±3.882)%比(11.470±1.679)%， P<0.05；(19.070±1.106)%比(14.448±0.849)%， P<0.01]。 结论:GRIP1和GRIP2参与缺氧缺糖引起的OPCs损伤，其可能通过调节Ca 2＋通透性触发AMPA受体介导的兴奋性毒性发挥作用。

目的:探讨干细胞捐献者柠檬酸钠抗凝剂对电解质和骨代谢相关指标的影响，评估其对干细胞捐献者骨密度(BMD)的影响，更好地保护干细胞捐献者的健康。方法:采集23名正常外周血干细胞捐献者注射动员剂人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF)前24 h及干细胞采集后6个月的血样，分别进行电解质以及骨代谢相关指标检测，包括游离钙离子(Ca 2+)、镁离子(Mg 2+)、钾离子(K +)、钠离子(Na +)、氯离子(Cl -)、无机磷(Pi)；骨形成指标骨钙素(OC)、β-胶原特殊序列(β-CTX)、碱性磷酸酶(ALP)、BMD、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(T-PINP)和25羟维生素D(25-OHVD)。 结果:注射动员剂G-CSF前24 h及干细胞采集后6个月血清中Ca 2+(2.35±0.06比2.41±0.06)、Mg 2+(0.89±0.05比0.89±0.06)、K +(4.29±0.30比4.18±0.34)、Na +(142.26±1.83比141.21±2.31)、Cl -(2.35±0.06比2.41±0.06)水平差异无统计学意义( P>0.05)，Pi水平升高(0.47±0.42比0.63±0.39， P<0.05)；注射动员剂G-CSF前24 h及干细胞采集后6个月OC(14.46±3.79比14.71±3.03)、β-CTX(0.44±0.18比0.41±0.18)、ALP(69.82±19.43比80.87±23.87)、BMD(0.95±0.09比0.91±0.15)、T-PINP(48.59±19.00比46.02±16.54)差异无统计学意义( P>0.05)，25-OHVD水平明显降低(21.09±7.13比19.94±6.34， P<0.05)。 结论:注射动员剂和柠檬酸钠抗凝剂对造血干细胞捐献后电解质和骨代谢相关指标无明显影响，干细胞捐献者采集前后未出现明显不良反应。

目的:研究轮状病毒非结构蛋白4的86~175位氨基酸肽段(NSP4 86-175)对大鼠心肌细胞损伤作用及其相关机制。 方法:利用前期制备好的活性NSP4 86-175蛋白处理大鼠H9C2心肌细胞，观察处理后的细胞生长形态变化，检测细胞培养液中LDH活性；Fluo-3AM标记细胞内游离的钙离子，蛋白质处理细胞后，用激光共聚焦显微镜检测大鼠心肌细胞内钙离子浓度变化。流式细胞术分析蛋白质对细胞凋亡的影响，RT-PCR检测Bax、Bcl-2、caspase-3、78 kDa葡萄糖调控蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及caspase-12 mRNA转录水平；Western blot检测caspase-3、caspase-8、caspase-9、GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达水平。 结果:正常生长的心肌细胞呈典型的成肌样细胞形态，细胞呈梭形，边界清晰。纯化的NSP4 86-175蛋白刺激后出现明显的细胞病变效应，细胞空泡变性，皱缩变圆，细胞碎裂；蛋白质处理组细胞培养液中的LDH活性均增高；与对照组相比，NSP4 86-175处理组细胞的钙离子荧光增强，细胞凋亡率增高，细胞凋亡因子caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax-2表达上调，内质网应激(ERS)经典标志分子GRP78、CHOP和caspase-12表达上调。 结论:NSP4 86-175对大鼠心肌细胞具有损伤作用，这可能与它导致细胞内钙超载，并引起内质网应激进而诱导心肌细胞凋亡坏死有关，为轮状病毒肠道外播散感染和致心肌损伤提供了一定的理论依据。

目的:分析下咽癌侵袭甲状腺及中央区淋巴结转移的特点，探讨其对患者生存率及生存质量的影响。方法:回顾性分析2014年1月至2017年12月首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科初治的124例下咽鳞状细胞癌患者的病例资料，其中男性122例，女性2例，年龄36~78岁。采集资料包括：肿瘤部位、病理T分期、病理N分期、甲状腺受侵情况、中央区淋巴结转移及手术术式等。根据甲状腺是否受侵及中央区淋巴结是否转移分组。随访入组患者的生存状态及肿瘤复发转移等情况，生存分析采用Kaplan-Meier法。结果:124例中经病理证实12例患者有甲状腺受侵，5例患者的中央区淋巴结有转移。不同肿瘤原发部位甲状腺受侵的比例为：梨状窝8.16%（8/98），咽后壁1/18，环后3/8，差异有统计学意义（χ2=15.076， P=0.008）；中央区淋巴结转移比例为：梨状窝1.02%（1/98），咽后壁3/18，环后1/8，差异有统计学意义（χ2=11.205， P=0.008）。是否有甲状腺受侵或者中央区淋巴结转移与性别、烟酒暴露史、肿瘤病理分化程度等差异无统计学意义（ P值均>0.05）。3年总生存（overall survival，OS）率为80.65%，3年无复发生存（relapse-free survival，RFS）率为85.48%。3年总死亡人数为24例，其中甲状腺受侵组4例，中央区淋巴结转移组1例。3年总复发人数18例，均为局部复发，其中甲状腺受侵组4例，中央区淋巴结转移组1例。与是否有甲状腺受侵及中央区淋巴结转移间生存分析差异无统计学意义（ P值均>0.05）。不同T分期、N分期、病理分期及分化程度组间的3年OS率及RFS率差异有统计学意义（ P值均<0.05）。是否有甲状腺受侵和中央区淋巴结转移组间钙离子及游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）水平差异有统计学意义（ P值均<0.05）。 结论:下咽癌侵及甲状腺及中央区淋巴结转移比率不高，发生危险度与肿瘤原发部位相关，对其综合评估、正确决策、精确实施治疗，才能在根治肿瘤、预防复发的同时，提高患者治疗后的生存质量。

目的:评价丙泊酚对新生大鼠海马α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸(AMPA)受体表达的影响。方法:清洁级健康SD大鼠84只，雌雄不拘，7日龄，体重14~18 g，采用随机数字表法分为2组( n＝42)：对照组(C组)和丙泊酚组(P组)。P组腹腔注射丙泊酚30 mg/kg，C组腹腔注射脂肪乳3 mg/kg，每20 min给予首剂量的1/2，共给药3次，连续注射3 d。第1天给药后，取大鼠动脉血行血气分析；丙泊酚最后1次给药后3、7和28 d时处死大鼠取双侧海马，采用Western blot法检测总蛋白和膜蛋白含有GluR1、GluR2和GluR3亚单位的AMPA受体的表达情况，计算膜蛋白与总蛋白的比率(M/T)；测定细胞游离钙离子浓度；最后1次给药后28 d时采用水迷宫实验测定大鼠认知功能。 结果:与C组比较，P组各时点总蛋白和膜蛋白含GluR1亚单位的AMPA受体表达上调，M/T升高，总蛋白和膜蛋白含GluR2亚单位的AMPA受体表达下调，M/T降低( P<0.05)，含GluR3亚单位的AMPA受体表达差异无统计学意义( P>0.05)，海马细胞游离钙离子浓度升高，训练2~4 d时逃避潜伏期延长，穿越原平台位置次数降低，目标象限停留时间缩短( P<0.05)。 结论:丙泊酚降低新生大鼠认知功能的机制与其上调海马含GluR1亚单位的AMPA受体表达，下调含GluR2亚单位的AMPA受体表达，使神经细胞游离钙离子浓度升高有关。

目的:采用离体实验评价蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51 (PTPIP51)调节的线粒体相关内质网膜(MAMs)结构改变在七氟烷致大鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法:原代培养SD大鼠胎鼠的海马神经元，培养7 d时，以5×10 5个/ml细胞密度接种于培养孔(100 μl/孔)或培养瓶(3 ml/瓶)中，采用随机数字表法分为4组( n＝19)：对照组(C组)、七氟烷组(Sev组)、七氟烷＋siRNA-PTPIP51转染组(Sev＋siPTPIP51组)和七氟烷＋无义siRNA转染组(Sev＋siNC组)。将Sev组、Sev＋siPTPIP51组和Sev＋siNC组神经元置于含2%七氟烷的培养箱中37 ℃培养5 h。收集神经元，采用MTT法检测存活率，采用流式细胞术检测胞浆游离钙离子浓度([Ca 2＋] i)及程序性坏死率，采用Western blot法检测PTPIP51、受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、RIPK3和磷酸化人混合系列蛋白激酶样结构域(p-MLKL)的表达，透射电镜下观察并记录MAMs长度、内质网周长和线粒体周长。 结果:与C组比较，Sev组神经元活力下降，[Ca 2＋] i、程序性坏死率升高，PTPIP51、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达上调，MAMs长度/内质网周长比值和MAMs长度/线粒体周长比值升高( P<0.05)。与Sev组比较，Sev＋siPTPIP51组神经元活力升高，[Ca 2＋] i和程序性坏死率降低，PTPIP51、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达下调，MAMs长度/内质网周长比值和MAMs长度/线粒体周长比值降低( P<0.05)，Sev＋siNC组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:PTPIP51表达上调介导MAMs的结构改变参与了七氟烷诱发海马神经元程序性坏死的过程。

目的:回顾性分析口腔癌根治同期皮瓣修复手术患者的围手术期临床特点及其对护理对策的提示。方法:选取2020年1—12月在中山大学孙逸仙纪念医院口腔颌面外科行口腔癌根治同期皮瓣修复患者658例，所有患者按年龄分为高龄组（≥60岁）279例及低龄组（<60岁）379例。收集2组患者围手术期临床资料，分析患者围手术期一般情况、术后并发症及带管出院的影响因素。结果:2组患者在性别（ χ2 = 12.38， P<0.001）、术前BMI（ t = 2.43， P = 0.015）、吸烟史（ χ2 = 18.34， P<0.001）、术前麻醉ASA分级（ χ2 = 25.61， P = 0.001）、术前并存疾病（ χ2 = 46.97， P<0.001）、是否舌、口底肿瘤（ χ2 = 16.68， P<0.001）、是否游离皮瓣（ χ2 = 6.81， P = 0.03）、手术时间（ t = 2.19， P = 0.029）、术前检验指标血红蛋白（ t = 4.96， P<0.001）、白蛋白（ t = 5.44， P<0.001）、D-二聚体（ Z = -13.52， P<0.001）、钙离子水平（ t = 4.07， P<0.001）及术后并发症发生情况（ χ2 = 14.55， P<0.001）方面比较，差异均有统计学意义。术后并发症的多因素分析结果显示：年龄（ OR = 1.021，95% CI 1.005 ~ 1.037， P = 0.011）、术前D-二聚体水平（ OR = 1.219，95% CI 1.026 ~ 1.447， P = 0.024）、术前并存疾病（ OR = 1.642，95% CI 1.108 ~ 2.432， P = 0.013）是术后并发症的独立危险因素。带管出院的多因素分析结果显示：年龄（ OR = 1.017，95% CI 1.003 ~ 1.031， P = 0.017）、术前BMI（ OR = 0.917，95% CI 0.873 ~ 0.963， P = 0.001）、是否舌口底肿瘤（ OR = 2.135，95% CI 1.475 ~ 3.091， P<0.001）及手术时间（ OR = 1.220，95% CI 1.120 ~ 1.328， P<0.001）是带管出院的相关因素。 结论:针对上述各种危险因素，重视患者术前评估，做好充分术前准备，针对性的术后护理及观察，加强吞咽功能训练，做好出院准备服务，重视延续护理，建立三级医院-社区-家庭的康复体系有利于患者身心康复。

目的:评价1，4，5三磷酸肌醇受体(IP3R)在七氟烷麻醉致老龄大鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法:健康雄性SD大鼠60只，18月龄，体重500~600 g，采用随机数字表法分为3组( n＝20)：对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)和七氟烷麻醉+IP3R拮抗剂组(S+I组)。S组和S+I组吸入2%七氟烷5 h。S+I组吸入七氟烷前10 min时腹腔注射IP3R拮抗剂2-APB 3 mg/kg，C组和S组腹腔注射同容量二甲基亚砜。七氟烷麻醉结束后当天采用Morris水迷宫实验检测认知功能，然后处死大鼠取脑组织，行HE染色和尼氏染色，光镜下观察病理学结果；采用流式细胞术检测海马神经元胞浆游离钙离子浓度([Ca 2+] i)和程序性坏死率；采用Western blot法检测IP3R、受体相互作用蛋白1(RIPK1)、受体相互作用蛋白3(RIPK3)和磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(p-MLKL)的表达。 结果:与C组比较，S组和S+I组逃避潜伏期延长，穿越平台次数减少，目标象限停留时间缩短，海马神经元[Ca 2+] i和程序性坏死率升高，海马神经元IP3R、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达上调( P<0.05)；与S组比较，S+I组逃避潜伏期缩短，穿越平台次数增多，目标象限停留时间延长，海马神经元[Ca 2+] i和程序性坏死率降低，海马神经元IP3R、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达下调( P<0.05)。 结论:七氟烷麻醉致老龄大鼠认知功能障碍的机制可能与IP3R激活介致钙稳态失衡，从而诱发程序性坏死有关。