目的:评价脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B (TrkB)信号通路在预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法:SPF级健康雄性SD大鼠80只，18月龄，体重550~650 g，采用随机数字表法分为4组( n＝20)：对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)、青年大鼠血浆组(Y组)和BDNF/TrkB信号通路抑制剂K252a组(K组)。Y组和K组尾静脉注射经过处理的3月龄青年大鼠血浆100 μl/次，C组和S组尾静脉注射等容量生理盐水，2次/周，共4周。处理结束后S组、Y组和K组吸入3%七氟烷麻醉3 h，麻醉前K组尾静脉注射K252a 25 mg/kg。于麻醉后3 d时行旷场试验及Morris水迷宫实验评估大鼠自发运动能力和认知功能；随后处死大鼠分离海马组织，采用Western blot法测定BDNF、磷酸化TrkB(p-TrkB)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)和突触囊泡蛋白(SYN)的表达，行高尔基染色记录海马CA1区神经元树突长度和树突棘密度，透射电镜下记录突触数量并测量突触活性区长度。 结果:与C组比较，S组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低( P<0.05)。与S组比较，Y组逃避潜伏期缩短，穿越原平台次数增加，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达上调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度升高( P<0.05)。与Y组比较，K组逃避潜伏期延长，穿越原平台次数减少，海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调，海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低( P<0.05)。 结论:预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制与激活BDNF/TrkB信号通路，改善海马突触可塑性有关。

血小板为血液重要组成成分，在止血及血栓形成过程中发挥关键作用。血小板行使功能涉及多种信号通路，蛋白磷酸化作用能够特异性调控血小板信号通路的激活。蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)参与调控血小板的蛋白磷酸化及去磷酸化过程。既往研究已发现多种血小板蛋白激酶，但对发挥负向调控作用的PTP研究较少。笔者拟从血小板生理功能及其活化、血小板内信号蛋白的磷酸化调控、PTP在血小板功能调控中的作用和靶向血小板PTP的临床应用方面，对PTP调控血小板功能的研究现状进行阐述，旨在为新靶向药物的研发提供依据。

套细胞淋巴瘤（MCL）是一种成熟的B细胞肿瘤，晚期可转化为淋巴瘤细胞白血病（LCL），预后不良，疗效差。报告1例MCL患者病情进展，7年后转化为LCL的诊治过程。

目的:采用离体实验评价蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51 (PTPIP51)调节的线粒体相关内质网膜(MAMs)结构改变在七氟烷致大鼠海马神经元程序性坏死中的作用。方法:原代培养SD大鼠胎鼠的海马神经元，培养7 d时，以5×10 5个/ml细胞密度接种于培养孔(100 μl/孔)或培养瓶(3 ml/瓶)中，采用随机数字表法分为4组( n＝19)：对照组(C组)、七氟烷组(Sev组)、七氟烷＋siRNA-PTPIP51转染组(Sev＋siPTPIP51组)和七氟烷＋无义siRNA转染组(Sev＋siNC组)。将Sev组、Sev＋siPTPIP51组和Sev＋siNC组神经元置于含2%七氟烷的培养箱中37 ℃培养5 h。收集神经元，采用MTT法检测存活率，采用流式细胞术检测胞浆游离钙离子浓度([Ca 2＋] i)及程序性坏死率，采用Western blot法检测PTPIP51、受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、RIPK3和磷酸化人混合系列蛋白激酶样结构域(p-MLKL)的表达，透射电镜下观察并记录MAMs长度、内质网周长和线粒体周长。 结果:与C组比较，Sev组神经元活力下降，[Ca 2＋] i、程序性坏死率升高，PTPIP51、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达上调，MAMs长度/内质网周长比值和MAMs长度/线粒体周长比值升高( P<0.05)。与Sev组比较，Sev＋siPTPIP51组神经元活力升高，[Ca 2＋] i和程序性坏死率降低，PTPIP51、RIPK1、RIPK3和p-MLKL表达下调，MAMs长度/内质网周长比值和MAMs长度/线粒体周长比值降低( P<0.05)，Sev＋siNC组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:PTPIP51表达上调介导MAMs的结构改变参与了七氟烷诱发海马神经元程序性坏死的过程。

癌症严重降低人类生活质量和寿命,对其发生发展过程中分子机制的研究已成为热点.蛋白酪氨酸磷酸酶1 B(PTP1B)是一种典型的非跨膜蛋白酪氨酸磷酸酶,近年来研究表明其在不同肿瘤中发挥不同作用,在一些肿瘤中PTP1B作为抑癌基因发挥肿瘤抑制作用,但在另一些肿瘤中PTP1B作为促癌基因存在.本文对PTP1B在肿瘤中的表达情况、调控肿瘤发生的分子机制进行综述.

目的:分析急性髓系白血病(AML)患者肾母细胞瘤1(WT1)基因表达水平的差异,探讨WT1表达及其在核仁磷酸蛋白1(NPM1)或Fims样酪氨酸激酶3内部串联重复(FLT3-ITD)不同突变状态下与AML患者疗效和生存的相关性,评估其对于患者预后的预测价值.方法:以167例初发AML患者(除外M3亚型)为研究对象,根据初诊时WT1表达水平分为WT1高表达组和WT1低表达组,回顾性分析两组的临床及实验室检查资料,采用Kaplan-Meier法进行患者生存分析以明确WT1表达水平在预后评估中的价值,特别是在NPM1或FLT3-ITD不同突变状态AML患者中的预后评估价值.结果:WT1高表达组126例患者中治疗有效83例(65.9％),低表达组41例患者中治疗有效39例(95.1％),差异有统计学意义(P＜0.01).WT1高表达组2年总存活率低于WT1低表达组(46.1％和75.2％,P＜0.05),2年无病存活率也低于WT1低表达组(43.5％和68.5％,P＜0.05).诱导化疗前后WT1表达量下降≥1 log患者总反应率和2年总存活率优于下降＜1 log患者(均P＜0.05),但两者2年无病存活率差异无统计学意义(P＞0.05).NPM1野生型患者中,WT1高表达组总反应率、2年总存活率较WT1低表达组低(均P＜0.05);FLT3-ITD野生型患者中,WT1高表达组总反应率、2年总存活率和2年无病存活率均较WT1低表达组低(均P＜0.05);而NPM1或FLT3-ITD突变患者中,不同WT1表达水平组疗效及生存分析结果差异无统计学意义(均P＞0.05).培论:初发AML患者中WT1基因过表达提示预后不良;诱导治疗后WT1表达量下降≥1 log的患者预后优于下降＜1 log的患者;初诊WT1基因表达水平可以作为NPM1或FLT3-ITD野生型AML患者的预后判断指标.

目的:探讨五味子甲素(deoxyschizandrin)对人胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:用不同浓度(6.25、12.5、25和50 μmol/L)的五味子甲素处理胰腺癌PANC-1细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测细胞迁移和侵袭能力的变化.基于五味子甲素的药效团,应用生物信息学软件预测五味子甲素作用的蛋白靶点,并进行通路富集分析.然后采用蛋白质印迹法检测不同浓度(6.25、12.5和25 μmol/L)五味子甲素作用后胰腺癌PANC-1细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、Src激酶(Src kinase, SRC)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化FAK (Y397) (phospho-Y397-FAK,p-Y397 FAK)、桩蛋白(Paxillin)和磷酸化Paxillin (Y181)(phospho-Y181-Paxillin,p-Y181 Paxillin)的蛋白表达水平.结果:五味子甲素以时间和浓度依赖方式抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖(P值均＜ 0.05),并明显抑制细胞迁移和侵袭(P值均＜0.05).生物信息学分析发现五味子甲素有113个作用蛋白靶点,这些蛋白靶点明显富集于肿瘤发生相关通路、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)信号通路和黏着斑信号通路等;其中,五味子甲素作用蛋白靶点EGFR和SRC富集于包括黏着斑信号通路在内的多个信号通路.不同浓度的五味子甲素作用后,胰腺癌PANC-1细胞中EGFR、SRC、p-Y397 FAK和p-Y181Paxillin蛋白的表达水平均明显下调(P值均＜0.05),而FAK和Paxillin蛋白表达水平无明显变化(P值均＞ 0.05).结论:五味子甲素通过靶向抑制EGFR-SRC信号通路,减少黏着斑相关蛋白p-Y397 FAK和p-Y181 Paxillin的表达,进而抑制胰腺癌PANC-1细胞的迁移和侵袭.

目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)对胃癌患者预后相关性及潜在机制.方法 从TCGA数据库下载胃癌患者的RNA表达及临床数据,按CXCR4表达水平分为高表达组(188例)和低表达组(187例),比较2组患者生存时间、不同肿瘤分期胃癌患者的CXCR4表达水平;将患者所测的各个RNA表达水平逐一与CXCR4表达水平进行Pearson相关性分析,选取相关性最高的前50个基因;对筛选出的50个基因进行GO富集分析、KEGG通路富集分析以及所编码的蛋白质之间的相互作用.结果 CXCR4高表达组胃癌患者中位生存时间低于CXCR4低表达组(P<0.01).病理分期Ⅰ期患者CXCR4表达水平显著低于Ⅱ～Ⅳ期,T1期患者CXCR4表达水平显著低于T2～T4期,M0期患者CXCR4表达水平低于M1期(均P<0.05);N分期4组间CXCR4表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05).在检测的20225个基因中,有11623个基因与CXCR4存在相关性,选取与CXCR4表达相关系数最高的前50个基因,其中氢电压门控通道1和RCSD结构域1与CXCR4表达水平的相关系数最高(r=0.749、0.738,P<0.001).GO富集分析可见,主要涉及的生物学过程包括对刺激的反应、生物调节、细胞通讯,主要定位的细胞组分为膜、囊泡、细胞质,主要涉及的分子功能为蛋白质结合、分子换能器活动、酶调节剂活性.KEGG通路富集分析可见,主要涉及的信号通路为负性胸腺T细胞选择、B细胞活化参与免疫反应、免疫球蛋白介导的免疫反应;编码蛋白之间的相互作用网络可见,酪氨酸蛋白激酶BTK、胞质分裂蛋白2脱除剂、受体型酪氨酸蛋白磷酸酶C是处于网络核心的蛋白.结论 CXCR4高表达与胃癌患者远期生存率降低及肿瘤分级更高相关,这可能与其通过调控免疫系统而促进肿瘤细胞免疫逃逸有关.

目的 观察GSK2126458联合尼洛替尼对急性髓细胞白血病(AML)小鼠细胞增殖、凋亡的影响,探讨磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)信号通路抑制剂与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对AML小鼠病情发生、发展的影响.方法 成功造模40只AML小鼠模型,分为4组,每组各10只.其中GSK2126458组给予10 mg/kg GSK2126458治疗,尼洛替尼组给予75 mg/kg尼洛替尼治疗,GSK2126458联合尼洛替尼组(联合组)给予10 mg/kg GSK2126458和75 mg/kg尼洛替尼治疗,对照组给予等量生理盐水,均连续给药2周.检测各组细胞增殖、凋亡和原癌基因(c-myc)、生存素(survivin)mR-NA表达水平.结果 GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组外周血和骨髓中白血病细胞的细胞增殖率明显低于对照组(P<0.05).GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组骨髓中细胞凋亡率明显高于对照组,且联合组骨髓中细胞凋亡率明显高于GSK2126458组和尼洛替尼组,差异有统计学意义(P<0.05).GSK2126458组、尼洛替尼组和联合组骨髓中c-myc、survivin基因mRNA表达水平明显低于对照组,且联合组骨髓中c-myc、sur-vivin基因mRNA表达水平明显低于GSK2126458组和尼洛替尼组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 GSK2126458联合尼洛替尼可降低AML小鼠c-myc和survivin表达水平,其通过抑制PI3K/mTOR活性进而抑制白血病细胞的增殖.

目的 探讨miR-208a对非小细胞肺癌A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 (1)分别用miR-208a mimic、NC mimic、miR-208a inhibitor和NC inhibitor转染A549细胞.采用荧光定量PCR(qPCR)检测A549细胞中miR-208a过表达和干扰效率;采用CCK-8实验、Transwell实验和划痕实验检测miR-208a对A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响.利用生物信息学网站PicTar、miRanda、Targetscan和miRDB预测与miR-208a结合的下游靶基因;构建蛋白酪氨酸磷酸酶受体G(PTPRG)的3′UTR野生型和突变型双荧光素报告酶基因载体,和miR-208a共转染到HEK-293T细胞后观察荧光素酶活性变化.(2)取对数生长期的A549细胞,设置阴性对照组(si-NC组)、PTPRG敲低组(si-PTPRG组)和PTPRG敲低组+miR-208a干扰组(si-PTPRG+miR-208a inhibitor组),采用CCK-8、Transwell实验和划痕实验检测PTPRG对A549增殖、侵袭和迁移的影响,qPCR和Western blot检测3组细胞PTPRG的mRNA和蛋白表达变化.结果 (1)miR-208a mimic组miR-208a基因表达水平、细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移率均高于NC mimic组(P<0.05);miR-208a inhibitor组的miR-208a基因表达水平、细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移率均低于NC inhibitor组(P<0.05).生物信息学分析显示PTPRG是miR-208a的靶基因,双荧光素报告酶实验结果 显示miR-208a过表达能够降低PTPRG 3′UTR野生型的荧光素酶活性,而敲低miR-208a能够增加PTPRG 3′UTR野生型的荧光素酶活性,miR-208a能够与PTPRG的3′UTR序列结合.(2)与si-NC组相比,si-PTPRG组细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移能力明显增高,PTPRG基因和蛋白表达水平下降(P<0.05);而与si-PTPRG组相比,si-PTPRG+miR-208a inhibitor组细胞增殖、细胞侵袭和细胞迁移能力下降,PTPRG基因和蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 miR-208a可能通过靶向调控PTPRG来促进A549细胞的增殖、侵袭和迁移.