目的 为了对肉制品中牛肉源性成分进行准确定量,本文采用数字PCR(dPCR)技术对牛肉的线粒体Cytb基因进行定量检测,根据基因拷贝数建立了肉制品中牛肉源性成分PCR的定量检测方法.方法 参照标准设计的牛源性特异性引物、探针,猪源性特异性引物、探针,鸭源性特异性引物、探针以及动物源性成分通用引物、探针,建立了双重数字PCR体系.结果 在一定范围内生鲜牛肉质量与DNA含量、DNA含量与DNA拷贝数之间均呈现明显的线性关系,并以DNA含量为中间值计算出DNA拷贝数(C)与生鲜牛肉质量之间的换算公式:M 牛=0.020 9C+0.676.应用建立的dPCR方法对构建的肉样模型进行检测,结果显示牛肉定量检测值与实际质量基本一致,且受外源物种的干扰小.运用该方法对抽取的10份市售牛肉样品检测,同时通过特异/通用引物扩增的拷贝数之比(％)辅助判断肉制品中是否存在非牛源性的其他动物源性成分掺假,检测出部分样品不符合标签规定.结论 该方法可实现对牛源性成分的量化检测,能够作为区分故意添加和无意污染的依据,为执法监管部门提供有力的技术保障.

旨在建立一种定量检测动物产品中牛源性成分含量的双重实时荧光PCR方法.以牛卫星IV DNA为检测靶基因,以肌肉生长抑制素基因作为内对照合成引物探针,采用基于TaqMan的双重实时荧光PCR技术对已知牛肉添加比例的冻干混合肉粉标准品进行检测并建立线性模型,并应用模拟样品和送检样品进行了验证检测.结果显示,该方法可检出牛源成分含量为0.1％的冻干肉粉,不与其他种动物组织发生交叉反应,重复性试验的相对标准偏差小于5％,方法的扩增效率为93.6％.该方法适用于肉品中牛源性成分的定量检测,可用于测定市场上动物产品中的牛源性成分含量.

目的:建立乌鸡白凤丸中鹿角胶、鹿角霜和鳖甲的鉴别和掺伪检查方法.方法:采用胰蛋白酶对乌鸡白凤丸样品酶解处理,利用固相萃取-超高效液相色谱-三重四板杆质谱(SPE-UPLC-QQQ)对样品中的鹿、鳖、猪、牛、马、驴、角鳖、佛罗里达鳖源性成分的专属性特征离子进行检测.结果:方法的专属性、精密度和灵敏度均符合分析检测的技术要求.12批样品检测到了处方中规定的鹿、鳖源性成分,部分样品也检出了处方中未规定的猪、牛源性成分.结论:所建立的方法经方法学验证,专属性强,为乌鸡白凤丸的质量控制及标准研究提供了参考.

近年来,肉制品掺假事件不断被曝出,对全球食品安全和经济产生了一定的负面影响.笔者利用特异性引物及探针,对购买自农贸市场、大型超市、餐饮店和网络电商的牛肉及其制品进行动物源性成分和大豆成分检测,将检测结果与产品标签对比,调查样品掺假情况,以期为消费者及监管部门提供依据.检出结果显示:餐饮店样品中掺入非牛肉成分的种类最多,电商食品次之,超市产品较少;农贸市场样品采集过少,且为冷冻生制品,未发现掺入所检测的非牛源性成分的情况.包含6个种类的102份样品中,2份样品不含牛源性成分,占样品总数的2％;23份样品掺有非牛源性或大豆成分,且产品标签中未标明,占样品总数的22.5％.所检测到的非牛源性成分,较多的使用猪肉和鸡肉掺假,鸭肉和大豆成分掺假也占一定比例.

目的:应用低血清培养基在水痘减毒活疫苗生产过程中进行细胞和病毒培养，观察培养效果，验证其对疫苗生产的适用性。方法:采用低血清培养基培养MRC-5细胞和水痘病毒Oka株，以传统培养基的生产为对照，比较细胞生长、病毒感染情况及原液病毒滴度和牛血清白蛋白残留量。采用 t检验对结果进行比较。 结果:在相同工作细胞库细胞复苏的情况下，低血清培养基与传统培养基培养的细胞和病毒形态，没有明显的差异。低血清培养基与传统培养基培养得到的水痘病毒原液病毒滴度均为5.0～5.1 lg噬斑形成单位/ml，差异无统计学意义( t＝1.00， P>0.05)；但低血清培养基生产的水痘病毒原液中牛血清白蛋白残留量(12～19 ng/ml)显著低于传统培养基生产的(39～46 ng/ml)( t＝8.51， P<0.05)。 结论:在水痘减毒活疫苗生产过程中应用低血清培养基未影响病毒滴度，但牛血清白蛋白残留量明显降低，减少了因牛源性成分引起疫苗不良反应的风险，可提高疫苗质量，适用于水痘减毒活疫苗的生产。