目的 分析比较全缘金粟兰根、茎、叶、花中的挥发性成分.方法 采用环己烷回流提取全缘金粟兰根、茎、叶、花中的挥发性成分,并运用峰高归一化法计算和比较各成分的相对含量.结果 共鉴定出73种挥发性成分,包括萜类、醇类、烯烃类、酯类、酮类等.其中,根、茎、叶、花中分别鉴定出37、17、27、34种;4个部位中特有挥发性成分分别为29、3、4、15种.此外,共有成分1-辛烯-3-醇在茎、叶、花中的含量均超过12％,而(E)-β-金合欢烯则低于5％.结论 主成分分析与聚类分析结果表明:全缘金粟兰的叶与花聚为一组,再与茎聚为一组,最终与根聚为一组.

目的:基于单细胞转录组测序分析百草枯（PQ）诱导的帕金森病（PD）样小鼠大脑小胶质细胞亚群差异基因和相关信号通路，为阐明PQ致动物大脑PD样改变的机制研究提供线索。方法:于2021年9月，将6周龄C57BL/6雄性小鼠6只随机分为对照组和实验组（每组3只），分别以生理盐水、10.0 mg/kg PQ进行腹腔注射，每3天1次，连续10次注射造模。染毒结束后取小鼠大脑，进行10× Genomics单细胞转录组测序。根据基因表达特征筛选小胶质细胞亚群，进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。进一步筛选实验组和对照组间小胶质细胞亚群的差异基因，利用生物信息学工具进行功能显著性富集分析。采用0、60、90 μmol/L的PQ溶液处理小鼠小胶质细胞（BV2细胞），通过实时荧光定量PCR实验验证差异基因己糖激酶2（Hk2）、ATPase H+转运V0亚基b（Atp6v0b）、神经调节蛋白1（Nrg1）的表达情况。结果:根据特征基因肌醇多磷酸-5-磷酸酶d（Inpp5d）和转化生长因子β受体1（Tgfbr1）将Cluster 7和Cluster 20亚群识别为小胶质细胞亚群，且该亚群反映小胶质细胞活化M2表型。生物信息学分析结果显示，所识别小胶质细胞亚群特征基因均富集到内吞作用；在分子功能方面主要富集跨膜受体蛋白激酶活性和细胞因子结合等功能。Cluster 7亚群上调基因主要富集于溶酶体通路、内吞作用等通路；下调基因主要富集于神经退行性疾病等信号通路。Cluster 20亚群上调基因主要富集于与PD相关的信号通路；下调基因主要富集于环磷酸腺苷（cAMP）信号传导途径、神经系统发育、突触功能等信号通路。实时荧光定量PCR检测结果显示，与0 μmol/L比较，90 μmol/L PQ溶液处理后BV2细胞的Hk2 mRNA和Atp6v0b mRNA表达水平升高，Nrg1 mRNA表达水平降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:小胶质细胞在PQ诱导的PD样小鼠模型中被激活，且向M2表型极化，其功能与溶酶体（内吞）、突触功能及PD相关信号通路的调节有关。

目前已发现塑料相关内分泌干扰物（endocrine disrupting chemicals，EDCs）暴露与人类心血管疾病（cardiovascular diseases，CVD）风险增加相关，但潜在的机制尚不清楚。孕烷X受体（pregnane X receptor，PXR）是一种具有外源物质感应作用的核受体，且具有促动脉粥样硬化作用。已有研究发现许多EDC具有PXR配体功能，提示PXR介导EDC暴露所致生理病理变化的可能性。该研究从塑化剂邻苯二甲酸二环己酯（dicyclohexyl phthalate，DCHP）暴露对CVD风险因素和脂质稳态产生的不良影响出发，探究PXR的参与机制和作用。该研究使用了多种在体和离体实验模型和方法，包括细胞体外试验、原代类器官培养、PXR条件敲除小鼠和PXR人源化小鼠模型。另外，靶向脂质组学被用于测量循环型神经酰胺水平，作为一种新型预测指标用于CVD的风险评估。研究结果发现DCHP是一种强效PXR选择性激动剂，可致野生型小鼠血浆胆固醇水平升高。肠上皮细胞特异性PXR敲除小鼠实验结果表明DCHP通过激活肠道PXR诱发高血脂症状。DCHP对循环神经酰胺升高的影响具有PXR依赖的特征。此外，DCHP所致PXR激活引起肠道脂肪生成和神经酰胺合成相关基因的表达上调。鉴于PXR在受体药理学方面表现出显著的物种差异，人源化PXR小鼠被用于验证并重复了上述发现。该研究发现了DCHP通过激活PXR致小鼠高胆固醇血症和神经酰胺生成的相关机制，提示了PXR在塑料相关EDC心血管健康风险中的重要作用，以及PXR用于邻苯二甲酸盐等其他EDC风险评估的意义和潜力。

目的:评价艾司氯胺酮用于硬膜外分娩镇痛对产后抑郁症(PPD)发生的影响。方法:选择自然分娩且同意实施分娩镇痛的初次孕产妇242例，采用分层随机法分为2组：常规组(C-LA组， n＝119)和艾司氯胺酮配伍组(E-LA组， n＝123)。C-LA组硬膜外分娩镇痛泵配方：罗哌卡因100 mg＋舒芬太尼30μg，生理盐水稀释至100 ml；E-LA组硬膜外分娩镇痛泵配方：罗哌卡因100 mg＋舒芬太尼30 μg＋艾司氯胺酮50 mg，生理盐水稀释至100 ml。于入产房、分娩后2 h、1、7及42 d时，采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)进行评分，分娩后7～42 d时EPDS评分≥9分诊断为PPD；并于入产房和分娩后1 d时采集外周静脉血样，采用酶联免疫吸附法测定血清雌激素、孕激素、5-羟色胺及皮质醇的浓度。 结果:与C-LA组比较，E-LA组分娩后1和42 d时，EPDS评分明显降低( P<0.01)，PPD发生率差异无统计学意义(1.7%/0.8%， P>0.05)；入产房时血清雌激素、孕激素、5-羟色胺及皮质醇的浓度差异无统计学意义( P>0.05)，分娩后1 d时血清孕激素和皮质醇的浓度升高( P<0.05)。 结论:艾司氯胺酮配伍用于硬膜外分娩镇痛有助于降低PPD发生风险，其机制与减缓分娩后血液中应激激素和性激素水平的下降速度有关。

通过研究核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2，NRF2）对卵巢颗粒细胞的作用及可能机制，为预防卵巢早衰提供依据。本文为细胞实验研究设计，于2022年1—12月在湖南师范大学附属长沙市妇幼保健院的医学实验中心完成。通过4-乙烯基环己烯二环氧（VCD）处理人卵巢颗粒细胞KGN细胞构建颗粒细胞损伤模型。先以不同浓度的VCD处理KGN细胞，采用细胞计数试剂（CCK-8）检测卵巢细胞增殖情况。CCK8确定半抑制（IC 50）后，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清中雌二醇和孕酮的含量，活性氧（ROS）检测试剂盒检测卵巢细胞中ROS的含量，实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测NRF2的mRNA表达水平，免疫印迹检测NRF2的蛋白表达水平。进一步通过慢病毒转染构建NRF2干扰（siNRF2）和过表达（NRF2-OE）细胞模型，通过检测激素水平、氧化应激指标（ROS、SOD、GSH-Px）和自噬情况（LC3B水平）以分析调控NRF2对VCD处理细胞模型的影响。结果显示，VCD干预后以时间依赖性和剂量依赖性方式抑制卵巢颗粒细胞的增殖（ F>100， P<0.05），24 h的IC 50为1.2 mmol/L。VCD处理后细胞上清中雌二醇由（56.32±10.18）ng/ml降低至（24.59±8.75）ng/ml（ t=5.78， P<0.05）；孕酮由（50.25±7.03）ng/ml降低至（25.13±6.67）ng/ml（ t=6.54， P<0.05）。VCD处理后细胞的SOD由（44.47±7.71）ng/ml降低至（30.92±4.97）ng/ml（ t=3.61， P<0.05）；GSH-Px由（68.51±10.17）ng/ml降低至（35.19±6.59）ng/ml（ t=5.73， P<0.05）。同时伴随自噬的增加和NRF2的下降。成功构建沉默NRF2和过表达NRF2的KGN细胞模型，随后采用VCD处理各组细胞，发现siNRF2组的细胞增殖活性明显减弱（ t=8.37， P<0.05），而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞活性损伤（ t=3.37， P<0.05）。siNRF2组的雌二醇水平最低（ t=5.78， P<0.05），而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞雌二醇水平降低（ t=5.58， P<0.05）。siNRF2组的孕酮水平最低（ t=3.02， P<0.05），而NRF2-OE能逆转VCD造成的细胞孕酮水平降低（ t=2.41， P<0.05）。siNRF2组的ROS水平最高（ t=2.86， P<0.05），NRF2-OE能逆转VCD引起的ROS增加（ t=3.14， P<0.05），siNRF2组的SOD酶含量最低（ t=2.98， P<0.05），NRF2-OE能逆转VCD引起的SOD酶含量降低（ t=4.72， P<0.05）。siNRF2组的GSH-Px酶含量最低（ t=3.67， P<0.05），NRF2-OE能逆转VCD引起的抗氧化酶含量降低（ t=2.71， P<0.05）。siNRF2组的LC3B水平最高（ t=2.45， P<0.05），NRF2-OE能逆转VCD引起的LC3B升高（ t=9.64， P<0.05）。综上，NRF2抑制ROS诱导的自噬性，从而发挥减少卵巢颗粒细胞损伤的作用。

近年来随着代谢重编程领域研究的不断深入，人们对免疫细胞生物学效应的认识发生了转变，即在炎性反应刺激下，免疫细胞重新调控其代谢和生物能量学，提供细胞生存的能量和底物，启动免疫效应功能。Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor protein 3，NLRP3）炎性小体作为先天免疫系统的重要组成部分，已被证明可以感知如尿酸和胆固醇晶体等代谢物，并可被代谢产物酮体所抑制；也受线粒体活性氧和糖酵解成分（如己糖激酶）的调节。最近的研究表明，多种代谢途径汇聚为NLRP3炎性小体的有效调控因子。该文综述了NLRP3炎性小体激活的代谢调节途径和特异性，以及其在肾脏疾病中的作用。

目的 基于PPARγ/NF-κB信号通路探究防己黄芪消肿方对代谢综合征表型骨关节炎(MS-OA)大鼠的治疗作用及机制.方法 SD大鼠随机分为假手术组、骨关节炎(OA)组、MS-OA组、西药组和中药高、低剂量组,采用改良Hulth法建立OA模型,改良Hulth法+高碳水高脂肪饮食建立MS-OA模型.中药高、低剂量组分别予防己黄芪消肿方药液15.12、7.56 g/kg灌胃,西药组给予洛索洛芬钠16.2 mg/kg灌胃,其余组予生理盐水灌胃,每日1次,连续6周.测量大鼠体质量,生化检测血脂及血糖,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10及瘦素含量,番红O-固绿及HE染色观察软骨组织形态,免疫组化染色检测软骨组织蛋白聚糖(Acan)、Ⅹ型胶原(ColⅩ)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、TNF-α、IL-1β、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达,Western blot检测软骨组织PPARγ、核因子(NF)-κBp65、p-NF-κBp65蛋白表达.结果 与假手术组比较,MS-OA组大鼠体质量及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TNF-α、IL-1β、瘦素含量均升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、IL-10含量降低(P<0.01),软骨组织退变明显,Mankin评分增加(P<0.01),软骨组织ColⅩ、MMP13、TNF-α、IL-1β、p-NF-κBp65蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),Acan、PPARγ蛋白表达降低(P<0.01);与MS-OA组比较,中药高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、瘦素含量降低(P<0.05,P<0.01),IL-10含量增加(P<0.05),软骨组织病理损伤改善,Mankin评分降低(P<0.01),软骨组织ColⅩ、MMP13、TNF-α、IL-1β、p-NF-κBp65蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Acan、PPARγ蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05).结论 防己黄芪消肿方可改善MS-OA大鼠脂代谢紊乱、改善关节内炎症环境、平衡软骨代谢、延缓软骨退变,其作用机制可能与调节PPARγ/NF-κB信号通路有关.

为制备高载药量的斑蝥素聚合物胶束给药系统(CTD@Sol),并初步探讨该给药系统抗乳腺癌的可行性.首先,以聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Sol)为载体材料,以斑蝥素(CTD)为模型药物,采用溶剂注入法制备得到CTD@Sol,并对其外观形貌、粒径、电位、体外释放度等药剂学属性进行评价.通过MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法考察了CTD@Sol对乳腺癌(4T1)细胞的生长抑制及凋亡情况;利用流式细胞术研究了 4T1对该给药系统的摄取效率;通过小动物活体成像考察了给药系统在体内的组织分布及对肿瘤组织的靶向性.结果表明,CTD@Sol外观呈微弱淡蓝色乳光,平均粒径为(159.73±1.96)nm、PDI为 0.198±0.006、Zeta电位为-(47.60±1.77)mV、包封率为(90.29±1.69)%、载药量为(45.00±0.84)%;体外释放及溶血实验表明,相较于中性环境(pH 7.4)下,CTD@Sol在酸性环境(pH 5.5)下药物明显加速释放,提示该体系具有细胞内吞体pH条件下的酸敏感性和良好的生物安全性.细胞摄取、细胞毒、凋亡实验表明,CTD@Sol对 4T1细胞更具有杀伤力,且Sol聚合物胶束作为药物递送载体能显著增强细胞对药物的摄取效率;体内实验表明该递送系统对肿瘤组织具有显著的靶向性.综上,本研究成功制备了高载药量(>45%)CTD@Sol给药系统,该系统药剂学性能良好,靶向性强,生物安全性良好,具有应用于乳腺癌治疗的潜力.

目的 研究转铁蛋白靶向肽T7(7pep)对聚乙二醇-聚己内酯(PEG-PCL)胶束在人宫颈癌HeLa细胞内转运行为的影响.方法 以香豆素-6(C6)为荧光指示探针,通过薄膜分散法制备包载有C6的PEG-PCL(PEG-PCL-C6)胶束以及靶头7pep修饰的PEG-PCL(7pep-PEG-PCL-C6)胶束.比较两种胶束的粒径、多分散指数及外观形态;比较两种胶束被HeLa细胞实时摄取的情况及其入胞后与早期内吞体(EE)、内吞循环室(ERC)、晚期内吞体(LE)的共定位情况.结果 PEG-PCL-C6和7pep-PEG-PCL-C6胶束的平均粒径分别为(75.0±2.3)、(82.0±1.5)nm,多分散指数分别为0.17±0.20、0.17±0.32,外观均为规整的圆球形.7pep-PEG-PCL-C6胶束的入胞速度和入胞量均明显快/多于PEG-PCL-C6胶束.7pep-PEG-PCL-C6胶束比PEG-PCL-C6胶束能够更快地进入EE,而入胞后PEG-PCL-C6胶束进入ERC的速率较7pep-PEG-PCL-C6胶束快,且PEG-PCL-C6胶束和7pep-PEG-PCL-C6胶束在LE均有逐渐累积的趋势,但7pep-PEG-PCL-C6胶束入胞60 min时与LE的皮尔森系数、信号重叠比率、共定位比率均显著低于入胞30 min时(P＜0.05或P＜0.01).结论 靶头7pep修饰可提高PEG-PCL-C6胶束的入胞速率和入胞量,还可改变其胞内转运行为.

目的 探究4～6岁阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)患儿肠道代谢产物特征及其临床价值.方法 前瞻性纳入31例4～6岁OSAHS患儿作为试验组,24例4～6岁健康儿童作为对照组,记录相关临床指标.收集粪便标本,通过液-质联用非靶向代谢组学检测所有代谢产物.结果 共检测出206种代谢产物,主要为氨基酸及其衍生物.试验组儿童肠道代谢产物整体构成与对照组差异有统计学意义(P<0.05).共筛选出18种差异代谢产物,6种代谢产物(N-乙酰蛋氨酸、L-蛋氨酸、L-赖氨酸、DL-苯丙氨酸、L-酪氨酸和L-异亮氨酸)用于诊断OSAHS的受试者操作特征曲线下面积大于0.7.其中N-乙酰蛋氨酸曲线下面积最大,为0.807,灵敏度为70.83%,特异度为80.65%.差异代谢产物与临床指标相关性分析显示,扁桃体肿大程度与肠内酯,尿酸与苯乙醛,血糖与N-乙酰蛋氨酸,胆固醇与9-六溴二苯醚和普鲁卡因呈正相关(P<0.05);扁桃体肿大程度与N-甲基酪胺,AST与吲哚丙烯酸和L-异亮氨酸,ALT与DL-苯丙氨酸、吲哚丙烯酸和L-异亮氨酸,尿酸与羟喹啉,尿素氮与N,N-二环己脲呈负相关(P<0.05).差异代谢产物影响的代谢功能通路主要有核黄素代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、泛酸和辅酶A生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、赖氨酸降解和谷胱甘肽代谢等.结论 4～6岁OSAHS患儿肠道代谢产物与代谢功能发生改变,主要为氨基酸代谢紊乱,筛选出的肠道差异代谢产物作为OSAHS生物标志物具有潜在的筛查诊断价值.