生物钟的形成与一系列生物钟基因及其调控基因构成的分子环路有关，其编码的蛋白可影响炎症细胞因子和趋化因子的表达，调控免疫细胞的增殖、分化和迁移，形成免疫功能的节律性变化。通过调控外界环境信号或基因修饰改变生物钟基因的表达，可诱发和加剧炎性肠病、类风湿性关节炎和1型糖尿病等多种自身免疫疾病。探讨生物钟基因的调控方式、固有免疫和适应免疫系统中生物钟的作用，以及生物钟基因在自身免疫性疾病发病机制和治疗中的潜在作用具有重要意义。

目的:检测CP合并外分泌功能不全(PEI)患者外周血单核细胞(PBMC)核心生物钟基因mRNA表达量及血清生物钟紊乱相关蛋白水平，探讨其临床诊断价值。方法:收集2015年1月至2022年1月间上海市第一人民医院确诊的68例CP患者外周血标本以及临床相关资料，并以30名健康体检者外周血作为对照组。CP临床分期参照M-ANNHEIM分类系统。采用实时荧光定量PCR法检测PBMC核心生物钟基因Clock，Bmal1，Per1、2、3, Cry1、2 mRNA表达量，采用ELISA法检测外周血清生物钟紊乱相关蛋白TrkB、CD 36和Rbp水平。绘制差异表达指标的受试者工作特征曲线(ROC)，计算曲线下面积(AUC)，评估其诊断PEI的效能。 结果:CP患者PBMC Per1 mRNA表达量较对照组显著降低(0.76比1， P<0.05)，其诊断PEI的AUC值为0.744(95% CI0.628~0.860)，临界值为0.72，灵敏度为84.8%，特异度为57.1%；血清CD 36蛋白水平较对照组显著升高[(33.85±19.74)ng/ml比(24.71±11.53)ng/ml， P<0.05]，其诊断PEI的AUC值为0.834(95% CI0.735~0.932)，临界值为29.75 pg/ml，灵敏度为74.3%，特异度为84.8%。CD 36表达随CP临床分期的增高而升高，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者两两比较差异均有统计学意义( P值均<0.05)；Ⅰ期患者PBMC Per1mRNA表达量显著高于Ⅱ期及Ⅲ期患者，差异有统计学意义( P<0.05)，但Ⅱ期与Ⅲ期患者差异无统计学意义。 结论:PBMC Per1mRNA表达量下降及血清CD 36升高与CP并发PEI显著相关，对PEI的诊断及指导相关临床实践具有潜在价值。

目的:探讨自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat, SHR)脑缺血再灌注后血压和血清生物钟蛋白水平的变化以及两者的关联性。方法:采用大脑中动脉闭塞法在授时因子时间(zeitgeber time, ZT)0点制备SHR脑缺血再灌注模型，模型制作后连续监测24 h内收缩压。每隔3 h取大鼠尾静脉血，应用酶联免疫吸附法检测血清生物钟蛋白(CLOCK、BMAL1、PER1和CRY1)水平变化。应用Pearson相关分析判断脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式与生物钟蛋白水平波动的关系。结果:假手术组大鼠存在多种血压模式，包括杓型(53%)、非杓型(27%)、超杓型(13%)和反杓型(7%)，以杓型模式为主。相比之下，模型组大鼠血压紊乱程度加重，以非杓型为主，比例高达40%；超杓型和反杓型比例也有所提高，分别为27%和13%；杓型血压占比降至20%。模型组血清CLOCK水平相对稳定，而BMAL1、PER1和CRY1的昼夜节律与假手术组相比出现明显改变。Pearson相关分析显示，PER1与杓型( r＝-0.565， P＝0.002)和超杓型( r＝-0.531， P＝0.001)血压模式呈负相关，与非杓型血压呈显著正相关( r＝0.620， P<0.001)。 结论:SHR脑缺血再灌注后血压昼夜节律模式发生明显紊乱，且与Per1基因的调控密切相关。

目的:观察生物钟基因在非酒精性脂肪肝大鼠发病中的作用以及利拉鲁肽的影响。方法:构建SD大鼠(湖南斯莱克景达实验动物有限公司)非酒精性脂肪肝模型，分为对照组、脂肪肝模型组、利拉鲁肽干预组；于给药后的第2周和第4周进行取样，每次取样按各时点(0、12、24 h)分成3组；苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏变化；检测肝脏组织甘油三酯含量；检测各组时钟昼夜调节因子(Clock)、隐花色素抑制因子(Cry1)、Fas的相对表达及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)的相对表达。多组资料间的比较采用单因素方差分析(ANOVA)，两两比较采用LSD法。结果:高脂饮食2周后大鼠肝细胞中出现大量脂滴，利拉鲁肽可减少脂滴；模型组肝脏甘油三酯含量升高，利拉鲁肽干预后可使其含量下降；模型组肝脏Clock基因表达最高为第2周12 h，为3.094 7±0.484 8，经干预后下降至1.578 6±0.368 8( F＝28.385， P<0.05)，Cry1基因在第2周24 h表达最高，为5.508 4±0.851 8，而干预后进一步升高，达20.775 7±1.939 1( F＝215.516， P<0.05)，Fas表达第2周24 h在3.288 1±0.299 4，干预组有所下降，为1.501 9±0.281 2( F＝77.128， P<0.05)。高脂饮食诱导大鼠肝脏中Clock和Cry1显著升高，增大Clock和Cry1以及Fas节律变化振幅范围，利拉鲁肽可抑制该变化。高脂饮食诱导大鼠肝脏Wnt/β-catenin蛋白高表达，可被利拉鲁肽抑制。 结论:利拉鲁肽或可通过调控生物钟基因以及Wnt/β-catenin信号通路来抑制非酒精性脂肪肝进展。

目的:探讨生物钟基因 CLOCK、 BMAL1与多发性内分泌腺瘤病2型（multiple endocrine neoplasia 2，MEN2型）甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma，MTC）的相关性。 方法:回顾性分析2013年1月至2021年9月在青岛大学附属烟台毓璜顶医院病理确诊为MEN2型MTC的病例13例（男性8例，女性5例，年龄15~69岁）及同期随机选取的非MEN2型MTC病例13例（男性7例，女性6例，年龄33~74岁）。分析比较2组患者的临床指标，并利用免疫组织化学、实时荧光定量PCR（quantitative real time PCR，qPCR）等技术检测CLOCK、BMAL1在MEN2型MTC组织与癌旁组织、非MEN2型MTC组织间的表达差异；分析淋巴结转移数量与CLOCK、BMAL1表达相关性；蛋白互作（protein-protein interaction，PPI）网络分析结合qPCR和相关性分析挖掘MEN2常见突变基因 RET表达与生物钟基因间的表达调控关系；利用地塞米松节律同步化后脂多糖细胞刺激试验验证MEN2细胞节律紊乱特点。采用独立样本 t检验对数据进行分析。 结果:本研究MEN2型MTC病例呈现典型 RET基因突变；临床相关指标分析发现MEN2型MTC血清降钙素水平、肿瘤直径及转移淋巴结数量，均较非MEN2型MTC升高，差异均有统计学意义（ t值分别为2.76、2.53、2.26， P值均<0.05）。免疫组织化学结果显示，生物钟基因CLOCK、BMAL1在MEN2型MTC癌组织中高表达，而在癌旁正常甲状腺滤泡内阴性表达，且表达水平高于非MEN2型MTC；qPCR结果显示，在MEN2型MTC癌组织中 CLOCK基因表达量高于非MEN2型MTC以及癌旁正常组织的表达量，差异均有统计学意义（ t值分别为2.68和2.86， P值均<0.05）； BMAL1基因表达量高于非MEN2型MTC以及癌旁正常组织的表达量，差异均有统计学意义（ t值分别为2.21和2.35， P值均<0.05）。相关性分析发现MEN2型MTC患者 CLOCK、 BMAL1基因表达水平与淋巴结转移数量呈正相关（ r=0.65， P<0.001； r=0.52， P=0.005）。PPI网络分析发现RET和CLOCK间存在调控关系，依据qPCR结果做进一步的相关性分析，提示 CLOCK基因的表达和 RET基因的异常表达呈正相关（ r=0.96， P<0.001）。地塞米松节律同步化后再用脂多糖刺激离体培养的细胞发现同步化12 h时生物钟基因 CLOCK、 BMAL1在MEN2型MTC细胞中的表达（0.47±0.22、2.60±1.48）显著低于癌旁组织细胞中的表达（1.70±1.62、8.23±2.52），差异有统计学意义（ t=5.04， P=0.007； t=3.34， P=0.029）。 结论:生物钟基因 CLOCK、 BMAL1与MEN2型MTC的发生发展存在相关性，可能是MEN2型MTC新治疗策略开发的潜在靶点。

生物钟蛋白参与许多重要生理过程的调节，包括血压。核心生物钟基因的缺失或突变可造成血压水平升高以及血压节律紊乱，加重血管功能损伤，最终导致缺血性卒中的发生和发展以及转归不良。文章对生物钟节律的分子机制、生物钟基因与血压调控机制之间的联系、昼夜节律紊乱在高血压发生发展中的作用机制以及血压节律紊乱与卒中之间的关系进行了综述。

目的:探讨生物钟基因brain and muscle arnt-like 1（Bmal1）对急性高糖诱导的胰岛素瘤细胞-1（insulinoma cell lines-1，INS-1）细胞凋亡的作用。方法:将INS-1细胞分为6组：正常糖浓度对照组（NG）、高糖组（HG）、NG+空载体组（NG+pcDNA3.1）、NG+Bmal1基因过表达组（NG+pcDNA3.1-Bmal1）、HG+空载体组（HG+pcDNA3.1）、HG+Bmal1基因过表达组（HG+pcDNA3.1-Bmal1）。NG组和HG组分别含5.5 mmol/L和33.3 mmol/L葡萄糖。噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖率，TUNEL法检测细胞凋亡率。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达，蛋白印迹法（Western-blot）检测Bcl2、Bax和Caspase-3蛋白表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，各组均数两两比较用SNK- q检验。 结果:HG组较NG组细胞增殖率下降[（44.17±1.25）% vs（100±1.48）%， P<0.01]，凋亡率增加[（1.86±0.28）% vs （0.56±0.04）%， P<0.01]，Bcl2 mRNA和蛋白表达下降（ P<0.01），Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达增加（ P<0.01）；HG+pcDNA3.1-Bmal1组较HG+pcDNA3.1组细胞增殖率升高[（64.40±1.98）% vs（43.82±1.07）%， P<0.01]，凋亡率下降[（0.95±0.26）% vs （1.66±0.15）%， P<0.05]，Bcl2 mRNA和蛋白表达增加（ P<0.01），Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达下降（ P<0.01）。与NG+pcDNA3.1组比较，NG+pcDNA3.1-Bmal1组增殖率、凋亡率、Bcl2、Bax和Caspase-3表达均无明显变化（ P>0.05）。 结论:Bmal1可能通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路减轻急性高糖导致的胰岛β细胞凋亡，对β细胞起保护作用。

心血管疾病严重威胁着我国居民的健康。生物钟在心血管系统的生理过程中起着重要的调节作用，包括调节血压、心脏收缩和心率等。在环境周期信号的作用下，生物钟基因及其编码的蛋白质组成转录-翻译反馈环路，通过神经传导和体液途径实现信号输出，从而调节生物体的生理、生化和行为的昼夜节律。心血管疾病的发病时间具有昼夜变化的特点，一些生物钟基因表达的改变促进了心血管疾病的进展。该文介绍了心血管系统的昼夜节律，整理总结了高血压、动脉粥样硬化与心肌梗死等疾病中的相关生物钟基因及其分子机制。对昼夜节律和生物钟的研究为心血管疾病的预防和治疗提供了新思路。

血压节律是指血压昼夜变化的规律，受到时钟基因的调控。然而，血压节律紊乱会增高卒中发病风险。文章以血压调节过程为线索，围绕时钟基因通路探索period基因调控肾素-血管紧张素-醛固酮系统在血压节律中可能的作用机制，为血压节律紊乱相关机制的深入研究和寻找脑血管病一级预防的新靶点提供参考。

目的:观察轮班工作对非超重/肥胖且血糖正常个体生物钟稳定性及胰岛素敏感性的影响。方法:将郑州大学第一附属医院非超重/肥胖的血液移植科轮班女性护士及体检科非轮班女性护士分为轮班工作组和非轮班工作组。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、脂肪因子(脂联素、瘦素、趋化素、内脂素)及褪黑素水平。实时定量PCR检测血清生物钟核心基因昼夜节律运动输出周期蛋白故障(Clock)和脑肌类芳香烃受体核转位蛋白1(Bmal1)表达。化学发光法测定皮质醇和空腹胰岛素水平，毛细管电泳法测定HbA 1C。此外，生物电阻抗法评估内脏脂肪面积(VFA)，基于问卷计算睡眠中期时间复合相位偏差(CPD)。 结果:轮班工作组褪黑素明显低于非轮班工作组( P＝0.023)，皮质醇明显高于非轮班工作组( P＝0.001)，Clock及Bmal1 mRNA表达高于非轮班工作组( P＝0.034, P＝0.047)。轮班工作组的空腹血糖、HbA 1C虽在正常范围，但已明显高于非轮班工作组( P＝0.011, P＝0.033)。轮班工作组虽体重指数正常，但VFA已明显高于非轮班工作组( P＝0.010)。且轮班工作组稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、IL-6、TNF-α、瘦素、趋化素及内脂素显著高于非轮班工作组( P＝0.033, P＝0.012, P＝0.001, P＝0.011, P＝0.021, P＝0.007)。此外，校正体重指数及活动因素发现，CPD与VFA( r＝0.434, P＝0.049)、炎症因子IL-6( r＝0.514, P＝0.017)、TNF-α( r＝0.700, P<0.001)及促炎脂肪因子瘦素( r＝0.473, P＝0.030)、趋化素( r＝0.439, P＝0.047)、内脂素( r＝0.521, P＝0.015)呈正相关。 结论:轮班工作可影响女性生物钟稳定性，在尚未超重/肥胖时已出现内脏脂肪、炎症因子和促炎脂肪因子增多及胰岛素敏感性下降。