[目的]探究白及饮片变绿对其质量的影响,明确主要化学成分变化和外观颜色的关联规律.[方法]采用CM-5型测色仪测定白及饮片的色度值,通过荧光法检测黄曲霉毒素,并建立超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,进行多成分的含量测定,利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)化学计量学方法探究影响白及颜色变化的差异性标志物,并将色度值和标志物含量进行典型相关性分析.[结果]通过对比5批白及正常和变绿饮片的色度值、多糖,以及8个特征峰的含量,发现多糖、白及苷、gymnoside Ⅲ、dactylorhin A可用于区分白及的正常饮片和颜色变绿饮片.典型相关分析表明,随着白及饮片变绿,L*、a*、E*值减小,b*值升高,白及苷、dactylorhin A、gymnoside Ⅲ以及多糖的含量均随之升高.[结论]白及饮片变绿后,多糖、白及苷等4种主要成分的含量明显增加,且和色度值具有显著的相关性,但颜色变化对其药效有何影响尚需进一步研究.

白及Bletillae Rhizoma为兰科多年生植物白及的干燥块茎,具有较高的药用价值.为了满足市场的需求,我国许多省份加大了对白及的人工种植,而人工种植白及的品质是我国白及产业高质量发展的基本保障.白及的品质主要由白及多糖、白及苷、总酚等有效成分决定.通过对白及块茎中白及多糖、白及苷、总酚在不同省份、种植年限、年龄的分布特征进行综述,讨论白及块茎中主要有效成分的影响因素.并探讨白及地上部分和须根的药用潜力,及对白及地上部分、块茎、须根下一步在品质、种植方面的研究内容进行展望,为白及地上部分、块茎、须根的资源合理开发利用提供参考依据.

目的:建立白及指纹图谱并进行含量测定,评价不同采收时间鄂产白及药材的质量.方法:采用UPLC建立指纹图谱,并进行相似度评价及多元统计分析;测定 7 个成分含量,并进行优劣解距离法(TOPSIS)分析.结果:建立了15 批白及样品指纹图谱,确定14 个共有峰,指认其中7 个成分,相似度>0.900;多元统计分析表明15 批样品可聚分为 2 类,并筛选出天麻素、白及苷和 2 号色谱峰 3 个差异标志物.采收时间、种植模式对白及苷等 7 个成分含量影响显著;TOPSIS分析表明,保康县 9～11 月家种白及质量较好,郧西县 9 月、12 月至次年 1 月家种白及质量较好,郧西县 9 月、11～12 月仿野生种植白及质量较好,且仿野生种植品的质量优于常规家种品.结论:该方法能有效分析不同采收时间鄂产白及质量差异,为鄂产白及药材质量评价提供依据,也可为评价其他产地白及质量提供参考.

目的 对黄花白及Bletilla ochracea块茎的化学成分进行研究.方法 利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS反相柱色谱及HPLC等色谱方法进行分离和纯化,并通过理化性质和波谱数据分析鉴定其结构.采用体外凝血活性评价高含量化合物2和7对活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原时间(prothrombin time,PT)的影响.结果 从黄花白及干燥块茎的85％乙醇提取物正丁醇萃取部位中共分离得到了 8个苄酯苷类化合物,分别鉴定为1-[4'-β-D-(葡萄糖氧)苄基]-4-{4"-[β-D-葡萄糖氧-(1-2)-β-D-葡萄糖氧)]苄基}-2-异丁基苹果酸酯(1)、1,4-二-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(2)、2-O-葡萄糖基白及苷(3)、手参苷Ⅲ(4)、4-葡萄糖氧基-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(5)、bleformin J(6)、天麻素(7)、4-羟基苄基β-D-吡喃葡萄糖苷(8).化合物2能显著缩短APTT和PT值.结论 其中化合物1为新化合物,命名为黄花白及苷A;化合物3～6和8为首次从该植物分离得到.化合物2具有促凝血活性.

使用网络药理学和动物实验的方法研究白及非多糖成分对胃溃疡的治疗作用及机制.首先采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对白及非多糖部位的化学成分进行分析,并利用网络药理学的方法获取白及与胃溃疡的交集靶点,构建"药物-成分-靶点-疾病"网络.随后使用STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,并采用Metascape数据库进行Gene Ontology(GO)及Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)富集分析,预测白及治疗胃溃疡的作用机制.最后构建酒精性胃溃疡小鼠模型,验证白及非多糖成分对胃溃疡的治疗作用及机制.从白及非多糖部位鉴定出47个化学成分,其中gymnoside Ⅰ(手参苷Ⅰ)、gymnoside Ⅱ(手参苷Ⅱ)、militarine(白及苷)、bletilloside A、shancigusin Ⅰ(山慈菇素Ⅰ)等可能为治疗胃溃疡的主要活性成分;PPI网络分析得到白蛋白(ALB)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、表皮生长因子受体(EGFR)等核心靶点,KEGG通路富集分析显示白及非多糖成分主要通过调节PI3K-AKT信号通路、MAPK信号通路、Ras信号通路等多种通路发挥作用.动物实验结果显示,白及非多糖成分可显著改善酒精所致小鼠胃组织的溃疡状况,提高溃疡抑制率;能够显著降低血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、血管活性肠肽(VIP)和血栓素B2(TXB2)水平,显著升高IL-10、前列腺素E2(PGE2)、表皮生长因子(EGF)和血管内皮生长因子(VEGF)水平;同时能够显著降低胃组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白水平,显著升高p-PI3K、p-AKT蛋白水平.该研究表明白及在胃溃疡的治疗方面凸显出多成分、多靶点、多途径协同作用的特点,验证了网络药理学的部分预测结果,为临床应用提供了科学依据.

目的:探究白及多糖对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)通路蛋白表达及对肠道屏障损伤的影响.方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇法建立UC模型,并将SD大鼠随机分为空白组、模型组、白及多糖低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组、柳氮磺胺吡啶阳性组(0.67 g/kg),除空白组外,其余各组均建立UC模型.白及多糖低、中、高剂量组和阳性组分别灌胃给予相应剂量白及多糖和柳氮磺胺吡啶,空白组和模型组灌胃给予10 ml/kg生理盐水,各组大鼠连续给药2周,1次/d.末次给药12 h后,观察大鼠一般行为并对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分;取大鼠结肠组织,苏木精-伊红染色观察组织病理形态;ELISA检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、炎症因子IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肠道屏障功能受损指标二胺氧化酶(DAO)和肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)水平;Western blot检测结肠组织通路蛋白NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠形体消瘦、大便稀溏、结肠组织可见黏膜溃疡、充血、扩张及炎症细胞浸润等病理损伤,DAI评分、结肠组织MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved cas-pase-1蛋白表达均升高(P<0.05),DAO和i-FABP含量均降低(P<0.05).与模型组比较,白及多糖各剂量组及柳氮磺胺吡啶组大鼠DAI评分、结肠组织病理损伤程度、MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达均降低(P<0.05),DAO和i-FABP含量均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,高剂量白及多糖改善效果与柳氮磺胺吡啶相近(P>0.05).结论:白及多糖可抑制NF-κB/NLRP3/caspase-1通路激活,降低炎症反应和肠屏障损伤,改善UC症状和肠黏膜损伤.

丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)是植物细胞光合作用和一碳代谢的关键酶之一,研究SHMT基因的序列信息对揭示其蛋白结构与功能具有重要指导意义.从白及转录组数据库中分离得到SHMT基因(NCBI登录号:MG544187),运用生物信息学软件对该基因进行序列分析.结果显示:该基因长度为1 953 bp,编码的蛋白质长度为471aa、分子量为51.861 06 kD、理论等电点为7.17,SHMT二级结构主要由无规则卷曲结构和α螺旋结构组成,核苷酸和氨基酸序列与铁皮石斛SHMT相似性最高,达93％,结构域分析发现该蛋白具有高度保守结构域,三级结构预测为四聚体结构,跨膜区及信号肽分析发现该蛋白无跨膜区及信号肽,亚细胞定位分析发现该蛋白主要位于细胞质、叶绿体亚细胞器位置.本分析结果为白及SHMT的应用研究提供了基础数据,也为植物SHMT基因的分子研究提供了理论依据及基础资料.

目的 观察壮阳填精中药联合左旋肉碱治疗特发性弱精子症疗效及对精液质量、DNA氧化损伤指标的影响.方法 将120例特发性弱精子症患者随机分为2组,对照组60例给予左旋肉碱治疗,观察组60例在此基础上加用壮阳填精中药治疗,观察2组治疗前后中医证候积分、精液量、精子密度、精子活动率、精子直线运动速度、a+ b级精子比例、精浆活性氧(ROS)及精子DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平变化情况,统计2组近期疗效和不良反应发生情况.结果 2组治疗后精子活力低下、腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、舌质淡苔白及脉沉或细积分均显著低于治疗前(P均<0.05),且观察组治疗后各项积分改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);2组治疗后精液量、精子密度、精子活动率、精子直线运动速度、a+ b级精子比例均显著提高(P均<0.05),ROS和8-OHdG水平均显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后各项指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组近期治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 壮阳填精中药联合左旋肉碱治疗特发性弱精子症可有效减轻临床症状体征,增加精液量,提高精子活力,下调ROS和8-OHdG水平,并未加重药物不良反应.

目的:分别从氧化应激及能量代谢角度研究溃结爽灌肠方对实验性溃疡性结肠炎 (UC) 大鼠的作用及其疗效机制, 并应用正交试验设计, 分析溃结爽灌肠方中各组分在不同水平对UC大鼠的的单因素效应及量效关系.方法:按照L9(34) 正交表设计, 70只清洁级雄性wistar大鼠进行9组试验.葡聚糖硫酸钠 ( DSS) 法复制UC大鼠模型后, 以溃结爽方灌肠10 d, 麻醉取材, 计算结肠黏膜损伤评分 (CMDI), 制作病理切片; 生化法检测大鼠结肠黏膜谷胱甘肽 (GSH)、超氧化物歧化酶 (SOD) 活性及丙二醛 (MDA)、腺苷三磷酸 (ATP)、一氧化氮 (NO) 表达水平.结果:模型组抗氧化因子SOD、 GSH活性明显降低, 脂质过氧化产物MDA及NO水平显著增高, 并且能量代谢受到影响, ATP水平降低, 与空白组比差异有显著性 ( P <0. 05).溃结爽灌肠能够不同程度改善UC大鼠氧化应激损伤及能量代谢水平, 提高SOD、 GSH活性及ATP水平, 降低MDA、 NO的表达, 并且以B组效应最佳 ( P <0. 05).在结肠黏膜损伤评分 (CMDI) 方面, A组B组C组E组F组I组均较模型组有不同程度改善 ( P <0. 05), 结果与抗氧化因子活性 (SOD、 GSH) 及能量代谢 (ATP酶) 表达水平变化具有一致性. 4味中药黄柏、苦参、白及、地榆在高、中、低剂量均可不同程度提高抗氧化因子SOD、 GSH活性及ATP的表达, 同时降低大鼠结肠黏膜MDA、 NO的含量, 但随剂量变化其表达水平呈现不同变化趋势.结论:溃结爽灌肠方可以明显降低UC模型大鼠结肠黏膜氧化应激损伤, 提高能量代谢水平, 从而减轻UC大鼠肠道炎症损伤, 促进肠道黏膜修复.

目的 探讨建立珍芪胃药胶囊的质控方法.方法 采用显微鉴别法定性鉴别处方中的珍珠、白芍和白及;用薄层色谱鉴别法定性鉴别处方中人工牛黄和黄芪;采用高效液相色谱法测定制剂中白芍所含芍药苷的含量.结果 薄层定性鉴别斑点清晰,分离效果良好,专属性强;芍药苷在5～160μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,y=5456.1x-4956.7,r=0.9994,平均加样回收率为99.04％,相对标准偏差(RSD)为0.68％(n=6).结论 该定性定量方法可控制珍芪胃药胶囊的质量.