目的 采用UPLC-Q-TOF/MS技术结合整合定性策略对白及中菲类化学成分进行快速定性分析.方法 采用ACQUITY UPLC HSS T3 柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),以乙腈溶液(A)-体积分数为0.1%甲酸溶液(B)为流动相体系进行梯度洗脱,柱温为40℃,流速为0.4 mL·min-1;采用Xevo G2 Q-TOF质谱,ESI离子源,负离子检测模式;整合了质量亏损过滤技术、产物离子过滤技术、中性丢失过滤技术和化学结构-色谱保留关联技术,对白及的质谱测试结果进行数据挖掘,通过化学成分数据库建立、UNIFI平台自动筛查、对照品比对和人工校验核实等步骤对菲类化学成分进行表征.结果 在白及中共表征了104 种化学成分.结论 该方法能够快速准确的表征白及中菲类化学成分,为阐明白及的药效物质基础和建立质量控制标准提供了科学依据.

目的:观察白及多糖乳膏联合红花逍遥片治疗黄褐斑的临床疗效。方法:选取十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)皮肤科2018年1-10月治疗的女性黄褐斑患者220例为研究对象，采用随机数字表法分为治疗组、对照组各110例，治疗组外用白及多糖乳膏治疗，早晚各1次，对照组外用千白乳膏治疗，早晚各1次，两组均口服红花逍遥片，每次1.17 g，每天3次，1个月为1个疗程，共治疗3个疗程。观察两组皮损评分、有效率、不良反应。结果:治疗3个疗程后，治疗组黄褐斑皮损评分为(0.93±0.31)分，有效率为84.55%(93/110)，对照组皮损评分为(1.39±0.44)分，有效率为65.45%(71/110)，两组差异均有统计学意义( t＝9.901，χ 2＝11.594，均 P<0.05)；治疗组不良反应发生率显著低于对照组(χ 2＝4.053， P<0.05)。 结论:白及多糖乳膏联合红花逍遥片治疗黄褐斑的疗效优于千白乳膏，不良反应发生率低。

探究白及提取物介导MAPK信号通路下调Caspase12对骨关节炎（OA）软骨细胞增殖和凋亡的影响。软骨细胞分为对照组、OA组、OA+白及组、OA+白及+ SB203580组。通过10 ng/ml的IL-1β培养软骨细胞24 h以模拟体外OA，加入对应的含有50 μg/ml的白及提取物预培养24 h，SB203580（5 μmol/L）抑制p38 MAPK通路。检测各组细胞增殖、凋亡、细胞中Caspase-12、p38 MAPK蛋白表达水平。研究发现白及提取物可以通过抑制p38 MAPK通路抑制Caspase12的表达，从而缓解软骨损伤。

白及多糖作为中药白及的活性成分,在白及块茎中的含量可达30％以上,具有止血、杀菌、促伤口愈合等功效,由α-甘露糖、β-甘露糖和β-葡萄糖构成,结构稳定,羟基丰富,生物相容性好,安全性高,在伤口敷料的制备方面具有广阔的应用前景.目前已有白及多糖与其他成分结合制备止血微粒、海绵、水凝胶及纳米纺丝材料的研究,并发现材料具有良好的止血或促伤口愈合的功效.该文分析了白及多糖成为创面敷料合成热点的原因,并对白及多糖制备的创面敷料类型进行介绍,最后综述了新型敷料的交联合成方式,以期能够为白及多糖在创面敷料领域的进一步应用开发提供理论依据.

[目的]探究白及饮片变绿对其质量的影响,明确主要化学成分变化和外观颜色的关联规律.[方法]采用CM-5型测色仪测定白及饮片的色度值,通过荧光法检测黄曲霉毒素,并建立超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱,进行多成分的含量测定,利用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)化学计量学方法探究影响白及颜色变化的差异性标志物,并将色度值和标志物含量进行典型相关性分析.[结果]通过对比5批白及正常和变绿饮片的色度值、多糖,以及8个特征峰的含量,发现多糖、白及苷、gymnoside Ⅲ、dactylorhin A可用于区分白及的正常饮片和颜色变绿饮片.典型相关分析表明,随着白及饮片变绿,L*、a*、E*值减小,b*值升高,白及苷、dactylorhin A、gymnoside Ⅲ以及多糖的含量均随之升高.[结论]白及饮片变绿后,多糖、白及苷等4种主要成分的含量明显增加,且和色度值具有显著的相关性,但颜色变化对其药效有何影响尚需进一步研究.

目的 制备负载胡桃醌的白及多糖-维生素E琥珀酸酯聚合物胶束(Jug/BSP-VES),并进行表征和评价.方法 通过酯化反应合成白及多糖-维生素E琥珀酸酯聚合物(BSP-VES)载体,采用溶剂挥发法制备胶束,以包封率、载药量为指标,采用单因素实验筛选胶束处方和工艺,并用星点设计-效应面法确定其最优处方;使用透射电子显微镜和Zetasizer Nano ZSE纳米粒度电位仪观察测定Jug/BSP-VES形态、粒径、多分散指数(polydispersity index,PDI)及ζ电位;通过体外释药对Jug/BSP-VES进行评价,并考察其稳定性.结果 成功合成BSP-VES聚合物,其临界聚集浓度(critical aggregation concentration,CAC)值为5.95 μg/mL;以最优处方制备的Jug/BSP-VES胶束呈类球形,外观澄清透明,丁达尔效应明显;粒径、PDI、ζ电位结果分别为(120.30±2.80)nm、0.169±0.014、(-27.00±1.25)mV,包封率(89.140±1.163)％,载药量(6.493±0.087)％,在含有0.5％聚山梨酯-80的醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)中48 h累积释放率达到(82.13±2.51)％.在4 ℃下储存稳定性良好.结论 通过溶剂挥发法制备的Jug/BSP-VES胶束粒径均一,包封率高,稳定性较好,具有一定缓释作用,该研究为胡桃醌的递药系统设计提供了参考.

目的 研究白及多糖对高脂高糖环境下人脐静脉内皮细胞的影响,揭示白及多糖促进糖尿病足溃疡早期愈合的分子机制.方法 用葡萄糖、棕榈酸干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC)模拟糖尿病体内高糖、高脂环境的血管内皮损伤模型,CCK-8法检测棕榈酸、白及多糖、通路抑制剂ICG-001最佳作用浓度及白及多糖细胞毒性,镜下观察最佳浓度葡萄糖、棕榈酸、白及多糖、ICG-001干预后的细胞生长状态,跨内皮细胞电阻实验检测细胞生长情况,免疫荧光法检测β-连环蛋白(β-catenin)在细胞中的核易位情况,Western blot法检测细胞中β-catenin、糖原合成激酶3β(GSK-3β)、c-Myc蛋白表达情况,RT-PCR法检测细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA表达情况.结果 确定葡萄糖最佳浓度为25 mmol/L、棕榈酸为300 μmol/L、白及多糖为300 μg/mL、ICG-001为10 μmol/L,使用最佳浓度葡萄糖和棕榈酸诱导建立血管内皮损伤模型.葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L组、葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L+ICG-001组细胞处于生长抑制状态,黏附性下降,细胞活力明显降低;葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L+白及多糖组、葡萄糖+棕榈酸300μmol/L+ICG-001+白及多糖300 μg/mL组细胞碎片及形态异常的细胞数量明显减少,黏附性较前加强,细胞活力明显增高.葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L组电阻TEER值、胞浆胞核中β-catenin蛋白相对表达量、细胞核中c-Myc蛋白相对表达量及细胞中VEGF、bFGF mRNA相对表达量均明显低于正常对照组(P均＜0.05),细胞质中GSK-3β蛋白相对表达量明显高于正常对照组(P＜0.05),β-catenin在胞浆胞核表达的荧光强度较弱,葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L+白及多糖组上述指标均逆转.葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L+ICG-001组电阻TEER值、胞浆胞核中β-catenin蛋白相对表达量、细胞核中c-Myc蛋白相对表达量及细胞中bFGF mRNA相对表达量均明显低于葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L组(P＜0.05),β-catenin在胞浆胞核表达的荧光强度均较弱,葡萄糖+棕榈酸300 μmol/L+ICG-001+白及多糖组上述指标均逆转.结论 白及多糖可通过激活Wnt/β-catenin通路,促血管生成,从而达到修复糖尿病足溃疡创面的作用.

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS联合网络药理学及分子对接技术探究白及"异病同治"黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的物质基础和分子机制.利用HPLC建立17批不同产地白及指纹图谱,进行相似度评价;进一步通过UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS分析,获得17批白及的共有化学成分;针对共有化学成分,根据生物利用度和类药性筛选活性成分,利用TCMSP和SwissTargetPrediction数据库获取白及活性成分的作用靶点.在DrugBank、TTD、GeneCards数据库中检索疾病相关靶点,绘制韦恩图,获得白及与疾病的共有靶点作为"异病同治"靶点;借助STRING数据库建立蛋白质相互关系,并在Bioconductor数据库中对"异病同治"靶点进行KEGG和GO分析;使用Cytoscape 3.7.2软件构建"白及化学成分-异病同治靶点"网络和蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,拓扑分析筛选出关键活性成分和核心靶点;最后,运用AutoDock Vina 1.1.2软件对活性成分与核心靶点进行分子对接验证.指纹图谱有13个共有峰,不同批次间指纹图谱的相似度在0.941～0.998.鉴定出白及的化学成分53个,17批白及的共有化学成分18个;网络药理学筛选到白及治疗4种疾病的药效物质基础是多糖类、联菲类、二氢菲类和联苄类等11个化合物,异病同治靶点42个,这些靶点参与细胞对化学应激的反应、活性氧的反应和蛋白激酶B信号转导的正调控等生物过程,涉及PI3K-Akt、ErbB、Rap1、FoxO、MAPK和雌激素等121条信号通路;分子对接显示关键活性成分与核心靶点亲和力好.该研究初步阐释了白及通过多成分、多靶点和多通路联合作用发挥治疗黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的"异病同治"的作用,为其深入开发和应用提供了一定的理论基础.

为鉴定引起广西种植区白及锈病的病原菌种类且筛选抗锈病的白及资源,该研究对白及锈病病原菌进行分离,并采用形态学和分子生物学的方法对病原菌进行鉴定,同时通过人工接种病原菌法对 23 份白及进行锈病抗性评价以及筛选抗锈病的白及资源.结果表明:(1)从白及感病叶片中分离的锈病病原菌X2 夏孢子呈金黄色,卵圆形或椭圆形,大小为(21.43～30.95)μm×(13.10～19.05)μm;冬孢子呈橘红色、红褐色,倒卵形或棍棒状,大小为(17.25～30)μm×(5.5～6.65)μm.(2)把菌株 X2 全长 689 bp 的 ITS 序列(OQ826009)与GenBank已登陆的序列进行相似性分析发现,菌株X2 与Coleosporium sp.(KY783686.1)匹配度最高,序列一致性为 95.86%,但系统发育树表明,X2 与Coleosporium bletiae(MN108161.1,OP363680.1)聚为一类群;结合形态学和分子生物学的方法,鉴定菌株X2 为Coleosporium bletiae.(3)人工接种菌株X2 14d后,23份白及的病情指数范围在 0～70.7 之间,并根据病情指数将 23 份白及划分为 6 个抗性等级,即表现为免疫的白及 1 份,病情指数为 0;表现为高抗的白及 4 份,病情指数为 1.7～4.7;表现为抗病的白及 6 份,病情指数为5.6～9.4;表现为中抗的白及5 份,病情指数为12.7～18.3;表现为感病的白及5 份,病情指数为32.0～49.1;表现为高感的白及 2 份,病情指数为 62.2～70.7.综上认为,表现为免疫和高抗的 5 份白及(分别来自云南红河、广西恭城、广西百色、贵州遵义、湖北宜昌)病情指数低、抗锈病能力强,可推广应用或作为培育抗锈病优良种质的亲本材料.该研究结果为后续开展白及锈病的有效防治与致病机理研究提供了支撑.

用于白及多糖(Bletilla striata polysaccharide,BSP)提取主要有溶剂提取法、辅助提取法等;分离纯化主要有活性炭或双氧水脱色,Sevage法脱蛋白,柱色谱法分离等;含量测定中通常使用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法;分子量采用高效液相色谱法、红外光谱、凝胶渗透色谱等方法来进行测定;结构表征主要采用液相色谱,红外光谱或核磁共振法来进行测定.白及多糖为葡甘聚糖,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节和促进伤口愈合等多种生物活性,在生物医药领域有广泛的应用前景.BSP有良好的药理活性,目前其研究大部分为粗多糖,药理活性仍在细胞阶段.因此对其提取分离纯化、结构鉴定、生物活性的研究仍是社会关注的热点.主要综述了 BSP的提取分离纯化、结构组成及生物活性的研究进展并对其进行系统分析,为BSP的深度开发利用以及后续的研究提供了理论基础.