目的:分析Eph受体A(Eph receptor A, EPHA)5突变预测肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors, ICI)治疗预后的临床意义。方法:通过生物信息学分析癌症药物敏感性基因组学(genomics of drug sensitivity in cancer, GDSC)-LUAD数据集、癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)-LUAD数据集中可能与LUAD患者ICI应答相关的突变基因。选择2020年1月至2021年1月我院接受帕博利珠单抗治疗的96例LUAD患者，收集患者的石蜡包埋组织肿瘤标本和匹配的血液样本，采用二代基因测序。根据检测结果分为EPHA5-WT亚组66例和EPHA5-MT亚组30例。记录患者的客观缓解率(objective response rate, ORR)、疾病控制率(disease control rate, DCR)及无进展生存期(progression-free survival, PFS)。结果:生物信息学分析显示，EPHA5-MT的LUAD患者可从ICI治疗中获益。临床队列分析结果显示，EPHA5-MT亚组LUAD的肿瘤突变负荷值27.34(19.98，53.24)mut/Mb高于EPHA5-WT亚组13.70(10.77，17.75)mut/Mb(P<0.001)。EPHA5-WT亚组ORR 22.73%低于EPHA5-MT亚组33.33%(P>0.05)，EPHA5-MT亚组的DCR 86.67%高于EPHA5-WT亚组62.12%(P<0.05)。EPHA5-WT亚组疾病进展36例(54.55%)，其中死亡11例。高于EPHA5-MT亚组8例(26.67%)，其中死亡4例。单因素及多因素COX回归分析显示，EPHA5-WT相较于EPHA5-MT是LUAD患者ICI治疗后发生疾病进展的危险因素。绘制Kaplan-Meier生存曲线显示，EPHA5-MT组LUAD患者PFS 14.53[5.71～26.23]个月长于EPHA5-WT组7.89(0.59～30.67)个月(P<0.005)。结论:EPHA5-MT是影响LUAD ICI治疗预后的生物标志物。

目的:探讨HER2免疫组织化学（IHC）检测结果为0乳腺癌患者HER2 mRNA的表达特征，初步分析以HER2基因表达水平分层乳腺癌HER2超低表达和HER2无表达（IHC无染色）的可行性。方法:收集北京协和医院2020年1月至2023年3月手术的甲醛固定石蜡包埋的浸润性乳腺癌组织标本41例，包括21例HER2 IHC 1+和20例HER2 IHC 0（HER2超低表达12例，HER2无表达8例）。采用数字PCR方法，以荧光FAM（HER2）/VIC（内参基因）比值计算HER2 mRNA水平。结果:HER2 IHC 1+、HER2超低表达及HER2无表达的HER2 mRNA表达分别为0.30~1.78（平均0.90，中位0.82）、0.55~1.51（平均0.93，中位0.90）及0.22~0.78（平均0.41，中位0.36）。每组HER2 mRNA表达的平均值和中位值，HER2 IHC 1+和HER2超低表达之间差异无统计学意义（ P=0.757）；HER2 IHC 1+与HER2无表达及HER2超低表达与HER2无表达之间差异有统计学意义（分别 P=0.002， P=0.001）。 结论:根据HER2 mRNA水平，HER2无表达与HER2弱表达（HER2 1+和HER2超低表达）属于两组不同的肿瘤；而HER2 1+和HER2超低表达可能是同一组肿瘤。有必要进一步验证以HER2 mRNA精细分层HER2弱表达的能力及确定阈值。

目的:比较兔眼跨巩膜持续给药、静脉给药与结膜下注射治疗实验性表皮葡萄球菌性眼内炎的效果。方法:纳入研究30只成年新西兰大白兔，雌雄不限，体质量2.0~2.5 kg，随机分成3组：静脉给药组、结膜下注药组及跨巩膜持续给药组，每组各10只。均在兔右眼接种0.1 mL 100 CFU表皮葡萄球菌后24 h开始进行治疗。静脉给药组每天静脉滴注20 mg去甲万古霉素，平均滴注持续时间1 h以上；结膜下注药组隔天一次结膜下注射浓度为20 mg/mL的去甲万古霉素0.3 mL；跨巩膜持续给药组每天以流速0.1 mL/h，浓度20 mg/mL在眼球筋膜囊下持续给药7 h。接种后每天行裂隙灯显微镜眼前段检查及眼底镜检查，并记录炎症评分。第8天处死动物摘除眼球，做石蜡包埋及组织切片观察。结果:三组症状炎症评分比较差异有统计学意义( F时间＝93.53， P<0.001； F组别＝4.07， P＝0.028)，跨巩膜持续给药组症状炎症峰值为(19.8±4.3)分与静脉给药组(24.3±4.08)分，结膜下注射组(24.3±6.77)分相比，炎症评分明显降低( t＝4.81, 5.00; P＝0.022, 0.018)。病理炎症评分比较，3组总体差异有统计学意义( F＝41.43, P<0.001)，跨巩膜给药组较其它两组眼球各部位病理炎症评分均显著降低(均 P<0.001)。 结论:跨巩膜持续给药方式治疗实验性表皮葡萄球菌性眼内炎较静脉给药及结膜下注药更有效。

目的:探讨浸润性乳腺癌PELP1/MNAR表达与雌激素受体（ER）、Ki-67和人表皮生长因子受体2（HER2）表达及与PIK3CA基因突变的相关性。方法:收集山西省大同市第五人民医院2008年1月至2018年12月80例原发浸润性乳腺癌患者石蜡包埋组织标本，应用免疫组织化学EliVision二步法检测PELP1/MNAR蛋白表达，采用聚合酶链反应（PCR）-Sanger测序检测PIK3CA基因突变情况。比较ER、Ki-67、HER2不同表达状态及PIK3CA基因是否突变患者间PELP1/MNAR表达情况，分析各指标与PELP1/MNAR表达的相关性。结果:ER阳性[86.1%（31/36）比59.1%（26/44）]、Ki-67高表达[100.0%（13/13）比65.7%（44/67）]、HER2阳性[81.0%（34/42）比60.5%（23/38）]患者PELP1/MNAR蛋白高表达率较高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。PIK3CA突变型和野生型患者PELP1/MNAR蛋白高表达率差异无统计学意义[60.0%（12/20）比75.0%（45/60）， P=0.199]。PELP1/MNAR的表达与ER表达水平呈负相关（ r=-0.195， P<0.05），与Ki-67表达水平呈正相关（ r=0.198， P<0.05），与HER2表达水平呈正相关（ r=0.225， P<0.05），与淋巴结转移呈负相关（ r=-0.269， P<0.05）。 结论:浸润性乳腺癌PELP1/MNAR的表达与ER表达水平负相关，与Ki-67、HER2表达水平正相关。PELP1/MNAR表达与PIK3CA基因突变无相关性，二者可能在乳腺癌PI3K-AKT-mTOR调节途径中各自发挥作用。

目的:探讨程序性死亡受体配体1（PD-L1）在浸润性乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法:收集南京大学医学院附属鼓楼医院2018年1月至2019年8月经病理确诊的初治浸润性乳腺癌患者石蜡包埋标本651例，其中三阴性乳腺癌98例。应用免疫组织化学EnVision法检测PD-L1蛋白在浸润性乳腺癌肿瘤细胞及浸润淋巴细胞中的表达情况。PD-L1在切片肿瘤组织肿瘤细胞和（或）肿瘤间质淋巴细胞中阳性表达率≥1%为该患者表达阳性，<1%为阴性。结果:PD-L1蛋白在浸润性乳腺癌患者中的阳性表达率为47.0%（306/651），其中在三阴性乳腺癌中阳性表达率为69.3%（68/98）。PD-L1在世界卫生组织（WHO）分级高、肿瘤体积大、脉管侵犯、病理分期晚、雌激素受体（ER）阴性、孕激素受体（PR）阴性、p53阳性、CK5/6阳性、表皮生长因子受体（EGFR）阳性、Ki-67值高患者中阳性表达率高（均 P<0.05）；在三阴性乳腺癌中，PD-L1蛋白在WHO分级高、神经受侵、Ki-67值高、CK5/6阳性、EGFR阳性患者中阳性表达率高（均 P<0.05）。多因素分析显示WHO分级（ HR=1.511，95% CI 1.139~2.003， P=0.004）、Ki-67值（ HR=1.847，95% CI 1.259~2.709， P=0.002）、p53表达（ HR=2.083，95% CI 1.487~2.916， P<0.01）、EGFR表达（ HR=3.490，95% CI 2.002~6.086， P<0.01）是PD-L1表达的独立影响因素。 结论:PD-L1在浸润性乳腺癌中尤其是三阴性乳腺癌中高表达，其可能成为浸润性乳腺癌患者的潜在治疗靶点。

目的:探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中MYD88 L265P突变对肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1表达的影响，为患者进行免疫治疗提供理论依据。方法:采用多重连接探针扩增技术检测2008年8月至2010年5月间经中国医学科学院肿瘤医院病理诊断明确的72例初治性DLBCL石蜡包埋样本中MYD88 L265P突变的发生频率。采用Ventana全自动免疫组织化学平台对所有样本进行PD-L1（22C3）及PD-L1（SP142）检测，分别观察肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1的表达情况，分析MYD88 L265P突变与DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1表达的关系。结果:72例DLBCL组织标本中，MYD88 L265P突变15例（20.8%）。剔除9例伴有JAK2扩增的病例，将63例DLBCL分成MYD88 L265P突变型组14例，MYD88 L265P野生型组49例。免疫组织化学结果显示，14例MYD88 L265P突变组中，7/14肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，4/14肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。在49例MYD88 L265P野生型组中，9例（18.4%）肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，38例（77.6%）肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。并且在16例肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性的DLBCL中，7例伴有MYD88 L265P突变者中仅2例肿瘤微环境PD-L1（SP142）阳性；9例MYD88 L265P野生型者肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达均阳性。统计学分析显示，MYD88 L265P突变型组肿瘤细胞PD-L1（22C3）的阳性率明显高于野生型组（ P=0.017）；MYD88 L265P突变型组肿瘤微环境PD-L1（SP142）的阳性率明显低于野生型组（ P=0.001）。 结论:MYD88 L265P突变可能在调控DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1的表达中发挥了一定作用，进一步的研究将为MYD88 L265P突变DLBCL患者进行免疫治疗提供理论依据。

目的:探讨膀胱原发性黏膜相关淋巴组织结外边缘区淋巴瘤（MALToma）临床病理特征。方法:回顾性病例系列研究。收集2008年12月至2021年12月在福建省立医院、漳州市医院、宁德市闽东医院、漳州市第二医院及福州台江医院确诊的行经尿道膀胱肿瘤电切术的9例膀胱原发性MALToma患者的临床病理资料，收集石蜡包埋手术标本，进行HE染色、免疫组织化学染色及基因检测，总结患者临床病理特征，并复习文献。结果:9例患者中，女性8例，男性1例；年龄（59±11）岁，范围：39～74岁；其中肿瘤病灶三灶2例，两灶3例，单灶4例；肿物长径（3.2±1.9）cm，范围：0.3～7.0 cm。随访时间6～127个月，4例失访，4例无病生存，1例带瘤生存。组织形态学观察示，膀胱组织见弥漫性一致淋巴细胞浸润，淋巴细胞小至中等大小，核仁不明显，胞质丰富、淡染，部分透亮，核分裂象少见；1例部分区域见大细胞增多，可见核仁及核分裂象。9例患者肿瘤细胞均表达CD20；bcl-2、CD43、CD38部分细胞阳性4例，CD138少数细胞阳性2例；κ较多阳性4例，散在阳性5例；λ少数阳性4例，散在阳性5例。行B细胞受体基因重排检测的8例均阳性；行MALT1基因分离探针荧光原位杂交法检测的6例均无分离信号。结论:PBMALToma临床上罕见，主要见于老年女性，属于低级别B细胞淋巴瘤。未见MALT1基因异常改变。

目的:探讨儿童局灶性皮质发育不良（FCD）Ⅱ型病例的脑病灶中形态异常神经元（dysmorphic neuron）和气球细胞（balloon cell）的阳离子-氯离子共转运体（NKCC1/KCC2）的表达情况，提示可能存在的癫痫发生的形态学基础。方法:收集2017年2月至2019年12月在北京市海淀医院（8例）及首都医科大学宣武医院（12例）癫痫手术后石蜡包埋的脑组织，选择患者年龄在14岁以下的诊断为FCDⅡa型10例、FCD Ⅱb型10例。采用免疫组织化学、免疫组织化学双染的方法，检测1型Na-K-2Cl共转运体（NKCC1）、2型K-Cl协同转运体（KCC2）在FCDⅡa型、FCDⅡb型中的表达情况。对NKCC1在FCDⅡa型的形态异常神经元和正常神经元免疫组织化学染色测定平均吸光度（ IA）值。 结果:（1）正常大脑皮质神经元细胞质表达NKCC1，细胞膜表达KCC2；（2）在FCDⅡa型的形态异常神经元中，NKCC1表达量增加，与正常神经元表达比较 IA值差异有统计学意义（ t′=7.618， P<0.01）。KCC2在形态异常神经元异常表达为细胞质阳性。（3）在FCDⅡb型中NKCC1/KCC2在形态异常神经元的表达与FCDⅡa型相同。气球细胞中NKCC1异常表达为阴性或少许稀疏细胞膜着色，KCC2异常表达为阴性。 结论:形态异常神经元及气球细胞中NKCC1/KCC2的表达模式与成熟神经元表达模式完全不同，其蛋白表达变化可能影响到神经元跨膜氯离子流，从而影响了抑制性神经递质γ-氨基丁酸的作用，导致神经元兴奋性增加，这个过程可能与临床癫痫症状发生相关。

目的:探讨结直肠癌中错配修复蛋白缺陷（dMMR）与NTRK基因融合的相关性。方法:收集南京大学医学院附属鼓楼医院病理科2015—2019年诊断为结直肠癌的组织蜡块830例，分别运用免疫组织化学和荧光原位杂交（FISH）检测830例甲醛固定石蜡包埋（FFPE）肿瘤组织中错配修复蛋白表达情况以及NTRK1/2/3基因断裂情况。比较dMMR型和错配修复蛋白无缺陷（pMMR）结直肠癌中NTRK1/2/3基因融合的发生率，进一步运用FFPE样本进行RNA Seq二代测序检测，分析融合伴侣和融合方式。结果:830例原发性结直肠癌FFPE样本均成功进行免疫组织化学和FISH检测。dMMR病例82例（9.88%），pMMR病例748例（90.12%）。其中MLH1蛋白缺失比例为9.04%（75/830），PMS2蛋白缺失比例为9.04%（75/830），MSH2蛋白缺失比例为2.53%（21/830），MSH6蛋白缺失比例为4.10%（34/830），MLH1和PMS2共缺失比例为8.67%（72/830），MSH2和MSH6共缺失比例为2.17%（18/830）。伴有dMMR肿瘤与pMMR肿瘤相比较，在发生部位、组织学分型、分化程度、美国癌症联合会（AJCC）分期、N分期及NTRK基因融合的发生频率上差异有统计学意义（ P<0.05）。在82例dMMR的病例中共检测到6例（7.32%）携带NTRK基因融合；而在748例pMMR的病例中共检测到7例（0.94%）携带NTRK基因融合。二代测序进一步证实13例FISH检测阳性的病例均为携带了NTRK基因融合，NTRK基因融合阳性组仅在分化程度上与融合阴性组差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:在原发性结直肠癌中，携带dMMR的肿瘤其NTRK基因融合的比例远高于pMMR的肿瘤。

目的:建立实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）大鼠模型，观察碘过量对EAT大鼠甲状腺功能、抗体及促甲状腺激素受体（TSHR）基因表达的影响，探讨TSHR基因在自身免疫性甲状腺炎发生中的作用机制。方法:48只4周龄雌性Lewis大鼠，按体重（80 ~ 100 g）采用随机数字表法分为对照组、甲状腺球蛋白（TG）组、TG +高碘Ⅰ（TG + HⅠ）组、TG +高碘Ⅱ（TG + HⅡ）组，每组12只大鼠，分别饮用碘离子含量为50、50 μg/L和20、200 mg/L的去离子水，对TG组、TG + HⅠ组、TG + HⅡ组大鼠进行免疫，采用猪甲状腺球蛋白（pTg）和完全弗氏佐剂（CFA）作为免疫试剂，每2周1次，共3次。石蜡包埋甲状腺组织、切片，观察大鼠甲状腺病理学变化；放射免疫法检测大鼠血清甲状腺球蛋白抗体（TgAb）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT 3）、游离甲状腺素（FT 4）水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清TSHR蛋白含量；实时荧光定量PCR检测大鼠全血及甲状腺组织TSHR mRNA表达水平；免疫组织化学法检测大鼠甲状腺组织TSHR蛋白表达水平。 结果:HE染色显示，对照组大鼠甲状腺滤泡结构完整，形态规则，无淋巴细胞浸润；TG组可观察到少量淋巴细胞且呈现散在分布；TG + HⅠ、TG + HⅡ组滤泡结构破坏、融合，滤泡间可见小灶状淋巴细胞浸润。各组大鼠血清TgAb、TPOAb、FT 3、FT 4水平[中位数（四分位数间距）]比较差异有统计学意义（ H = 30.28、21.99、12.87、26.69， P均< 0.05）；与对照组比较[6.89（6.32，7.27）、11.02（7.60，12.53），5.05（2.71，7.99）、7.51（6.50，9.24）pmol/L]，TG、TG + HⅠ、TG + HⅡ组大鼠血清TgAb[34.99（25.39，41.35）、37.70（29.06，43.99）、46.41（38.52，55.26）]、TPOAb[22.87（13.65，31.82）、22.22（14.82，28.33）、14.61（12.95，19.34）]、FT 3[57.74（24.56，64.27）、43.64（5.69，80.03）、38.56（17.73，47.59）pmol/L]、FT 4[62.16（41.22，91.57）、60.61（35.52，103.31）、47.96（31.84，112.71）pmol/L]水平明显升高（ P均< 0.05）。TG + HⅡ组大鼠血清TSHR蛋白表达水平[（154.26 ± 25.95）μU/L]低于对照[（249.37 ± 38.12）μU/L]、TG[（225.33 ± 41.28）μU/L]、TG + HⅠ组[（218.15 ± 65.51）μU/L， P均< 0.05]；与对照组比较（1.00 ± 0.05、1.13 ± 0.21），TG、TG + HⅠ、TG + HⅡ组大鼠全血（0.89 ± 0.19、0.89 ± 0.30、0.85 ± 0.24）、甲状腺组织TSHR mRNA表达水平（0.63 ± 0.25、0.46 ± 0.16、0.51 ± 0.25）明显下调（ P均< 0.05）。免疫组织化学染色显示，对照组大鼠甲状腺TSHR蛋白阳性强度明显高于TG、TG + HⅠ、TG + HⅡ组大鼠。 结论:长时间的高碘暴露可能会导致甲状腺的摄碘功能发生损伤，引发甲状腺疾病并使病情加重、TSHR基因的异常表达，使受体膜外区的促甲状腺激素结合位点具有抗原性，从而引发自身免疫性甲状腺疾病。