中山大学肿瘤防治中心和广州市中医院开展了一项单组、开放标签、Ⅱ期临床试验(NEOCAP),旨在探索程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)阻断加血管生成抑制药的新辅助治疗的有效性和安全性,以及在局部晚期错配修复缺陷型结直肠癌患者中保留器官的可行性.入组患者为18～75岁且未经治疗的错配修复缺陷或微卫星不稳定性高或 DNA 聚合酶(polymerase epsilon,POLE)和 DNA 聚合酶 delta 1(polymerasedelta 1,POLDI)突变的局部晚期结直肠癌患者(直肠癌为cT3或N+,结肠癌为T3且侵袭≥5 mm或T4,有或无N+),且东部肿瘤协作组体能评分为0～1分.患者在第1天静脉注射卡瑞利珠单抗200 mg,第1～14天口服阿帕替尼250 mg,每3周1次,持续3个月,随后进行手术,如果患者未进行手术,则为6个月.临床完全缓解的患者不进行手术,而是继续观察等待.

目的:探讨复制因子C5（RFC5）在子宫颈癌中的表达及其对预后、免疫调控的影响和相关机制。方法:2023年5月从癌症基因组图谱（TCGA）数据库下载280例子宫颈癌患者RFC5 mRNA表达数据及临床数据。比较子宫颈癌组织和癌旁正常组织中RFC5 mRNA表达水平差异，分析不同临床病理特征患者RFC5 mRNA表达水平；根据子宫颈癌组织RFC5 mRNA中位表达水平将280例患者分为高表达组和低表达组，采用Kaplan-Meier法对两组进行生存分析，比较采用log-rank检验；利用基因表达谱交互分析（GEPIA）2在线工具验证子宫颈癌RFC5基因表达情况及与预后的关系。采用单因素、多因素Cox比例风险模型分析TCGA数据库子宫颈癌患者总生存（OS）的影响因素。利用LinkedOmics数据库筛选子宫颈癌中RFC5相关的共同差异表达基因（DEG），基于DAVID数据库对RFC5相关DEG进行基因本体（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。基于肿瘤免疫评估资源（TIMER）数据库，通过Spearman法分析RFC5表达与子宫颈癌肿瘤浸润免疫细胞的关系；基于肿瘤免疫系统相互作用数据库（TISIDB）分析子宫颈癌RFC5表达与免疫调节因子的关系。基于人类蛋白图谱（HPA）数据库分析子宫颈癌组织中RFC5蛋白表达情况。基于GEPIA2在线工具分析RFC5在泛癌中的表达及其与OS的关系。结果:TCGA数据库中RFC5 mRNA在子宫颈癌组织（277例）中相对表达水平高于癌旁正常组织（3例），差异有统计学意义（ P<0.001）；不同年龄、病理类型、临床分期子宫颈癌患者间癌组织中RFC5 mRNA相对表达水平差异均无统计学意义（均 P>0.05）；RFC5高表达组（139例）子宫颈癌患者OS优于RFC5低表达患者（138例），差异有统计学意义（ P=0.027）。GEPIA工具验证RFC5在子宫颈癌中的表达及其与OS的关系，得到相同结果。GO和KEGG富集分析显示，RFC5相关基因主要参与DNA复制、细胞周期、范可尼贫血、错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复等信号通路。多因素Cox回归分析显示，年龄≥65岁、临床分期Ⅳ期、RFC5表达低水平是子宫颈癌患者OS不良的独立危险因素（均 P<0.05）。TIMER数据库分析显示，RFC5的表达与肿瘤纯度呈正相关（ rho=0.198， P<0.001），而与B细胞（ rho=0.062， P=0.306）、CD8 + T细胞（ rho=0.168， P=0.005）、CD4 + T细胞（ rho=-0.049， P=0.418）、巨噬细胞（ rho=0.034， P=0.577）、中性粒细胞（ rho=0.169， P=0.005）、骨髓树突细胞（ rho=0.026， P=0.667）的浸润水平呈弱相关性或无相关性。对TISIDB数据分析显示，RFC5表达与免疫抑制因子和免疫刺激因子大多呈负相关性。HPA数据库分析显示，子宫颈癌组织RFC5蛋白的表达水平高于正常子宫颈组织。GEPIA在线工具分析显示，RFC5在多种恶性肿瘤中表达上调，RFC5高表达胸腺瘤患者OS优于其低表达患者，而RFC5高表达急性髓系白血病患者OS较其低表达患者差，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。 结论:RFC5在子宫颈癌组织中高表达，且其水平与子宫颈癌患者预后相关。RFC5过表达可能抑制子宫颈癌免疫调节因子的表达，可能是通过DNA复制、细胞周期、错配修复、碱基切除修复等相关通路调控子宫颈癌的发生与发展的。

胆道癌是高度异质性、罕见、难治的恶性肿瘤，早期诊断困难，根治切除率低，传统辅助治疗的效果有限，患者预后较差。免疫疗法开辟了肿瘤治疗新的前沿，其中程序性死亡蛋白-1抗体治疗极具临床应用前景，相关治疗应用于胆道肿瘤的疗效正在被多项临床试验评估，辨别对程序性死亡蛋白-1抗体治疗反应及预后有预测价值的生物标志物是当前面临的挑战之一。本文旨在回顾胆道肿瘤程序性死亡蛋白-1抗体治疗及如肿瘤突变负荷、DNA错配修复等相关疗效预测生物标志物的研究进展。

结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一。髓过氧化物酶(MPO)作为中性粒细胞溶酶体中的一种氧化酶，在激活致癌基因中间体和增强外源性致癌方面起着重要作用，其通过产生次氯酸、活性氧等氧化剂激发体内氧化应激反应，诱导DNA损伤、突变、错配修复等基因不稳定因素发生，从而导致了结直肠癌的发生、发展。MPO单核苷酸基因多态性(SNP)与癌症的遗传易感性有关，MPO rs2333227-463G>A可降低结直肠癌风险。针对MPO、MPO-463G>A的研究，将为结直肠癌的早期发现、预防、病情评估及靶向治疗方案的研发提供新的思路和有力证据。

目的:探讨二代测序(NGS)技术在Lynch综合征相关基因胚系突变检测中的价值。方法:采用免疫组化方法检测2016—2018年在山东省立医院手术切除的肿瘤组织中MutL homolog 1 (MLH1)、PMS1 homolog 2(PMS2)、MutS homolog 2(MSH2)和MutS homolog 6(MSH6) 4种DNA错配修复(MMR)蛋白的表达情况。根据MMR的表达情况和临床资料，选取45例疑似Lynch综合征患者，提取其经显微镜证实无癌累及正常组织的DNA，对MLH1和MSH2等12个基因进行NGS测序分析，应用生物信息学技术分析基因胚系突变位点和意义。采用Sanger测序对10例患者的可疑致病位点进行验证。结果:免疫组化检测显示，45例肿瘤组织标本中，MLH1和PMS2表达缺失22例，MSH2和MSH6表达缺失16例，MMR蛋白表达正常7例。NGS显示，28例结肠癌患者的正常组织样本中，4例有MLH1致病性突变，1例有MLH1疑似致病性突变，2例有MSH2致病性突变，2例有MSH2疑似致病性突变。6例直肠癌、6例胃癌和7例免疫组化检测MMR表达正常结直肠癌患者的正常组织样本中均未见明显MMR基因突变。5例子宫内膜癌患者的的正常组织样本中，MLH1和MSH2致病性突变各1例，MLH1疑似致病性突变1例。此外，NGS还检测到许多其他基因异常和未见报道的基因突变。Sanger测序均检测到与NGS检测结果相同的MLH1和MSH2基因突变位点。结论:高通量NGS技术可以快速、准确、可靠地检测到疑似Lynch综合征患者的异常基因，对消化道等遗传性肿瘤的相关基因检测具有广阔的应用前景。

目的:探讨免疫组织化学检测在结直肠癌中分析错配修复（mismatch repair，MMR）蛋白表达的意义及注意事项。方法:收集2014年7月至2018年10月天津医科大学肿瘤医院具有MMR检测结果的、术前未经新辅助治疗的手术切除结直肠癌3 428例，复读MMR免疫组织化学切片，对判读有问题的病例重新染色、评估，并检测微卫星不稳定性（MSI），分析MMR表达与MSI状态及临床病理参数的关系。结果:（1）3 428例结直肠癌中，28例（0.8%）因当初免疫组织化学染色不佳进行重新染色，119例（3.5%）的复诊MMR结果与原判断不一致，主要集中在PMS2和MLH1。最终，261例（7.6%）为错配修复缺陷（dMMR），以MLH1、PMS2联合缺失（43.3%，113/261）为主。（2）在当初诊断时进行MSI检测的14例中，MSI与MMR结果一致的有13例；在29例进行二代测序的dMMR病例中，高度微卫星不稳定（MSI-H）与dMMR的一致率为93.1%（27/29）。其中，MSI与MMR结果不一致的病例为MSH6或PMS2单独缺失。（3）21例结直肠癌呈MLH1或MSH2单独阴性，而PMS2或MSH6呈少部分或部分（弱）阳性。其中能进行MSI检测的19例中，16例为MSI-H，2例为低度微卫星不稳定，1例为微卫星稳定。（4）与错配修复完整（pMMR）的病例相比，dMMR组女性、<50岁、具有肿瘤家族史、早期患者更多见，肿瘤更好发于右半结肠，病理类型以低分化腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌多见（均 P<0.05）。 结论:免疫组织化学检测MMR蛋白表达是一种比较有效、方便的方法，但是操作流程及结果评估需要标准化，对于特殊病例需要进行MSI检测，进而指导临床治疗和评估预后。

目的:探讨结直肠癌中错配修复蛋白缺陷（dMMR）与NTRK基因融合的相关性。方法:收集南京大学医学院附属鼓楼医院病理科2015—2019年诊断为结直肠癌的组织蜡块830例，分别运用免疫组织化学和荧光原位杂交（FISH）检测830例甲醛固定石蜡包埋（FFPE）肿瘤组织中错配修复蛋白表达情况以及NTRK1/2/3基因断裂情况。比较dMMR型和错配修复蛋白无缺陷（pMMR）结直肠癌中NTRK1/2/3基因融合的发生率，进一步运用FFPE样本进行RNA Seq二代测序检测，分析融合伴侣和融合方式。结果:830例原发性结直肠癌FFPE样本均成功进行免疫组织化学和FISH检测。dMMR病例82例（9.88%），pMMR病例748例（90.12%）。其中MLH1蛋白缺失比例为9.04%（75/830），PMS2蛋白缺失比例为9.04%（75/830），MSH2蛋白缺失比例为2.53%（21/830），MSH6蛋白缺失比例为4.10%（34/830），MLH1和PMS2共缺失比例为8.67%（72/830），MSH2和MSH6共缺失比例为2.17%（18/830）。伴有dMMR肿瘤与pMMR肿瘤相比较，在发生部位、组织学分型、分化程度、美国癌症联合会（AJCC）分期、N分期及NTRK基因融合的发生频率上差异有统计学意义（ P<0.05）。在82例dMMR的病例中共检测到6例（7.32%）携带NTRK基因融合；而在748例pMMR的病例中共检测到7例（0.94%）携带NTRK基因融合。二代测序进一步证实13例FISH检测阳性的病例均为携带了NTRK基因融合，NTRK基因融合阳性组仅在分化程度上与融合阴性组差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:在原发性结直肠癌中，携带dMMR的肿瘤其NTRK基因融合的比例远高于pMMR的肿瘤。

目的:深入探讨散发性错配修复缺陷（dMMR）结直肠癌的临床病理学特征，并分析影响其预后的关键因素。方法:回顾性收集2015年7月至2021年4月在中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院接受治疗的120例散发性dMMR结直肠癌患者的资料。根据家族史及二代测序检测结果排除林奇综合征患者，排除同时性多发结直肠癌术前进行放化疗等抗肿瘤治疗以及随访资料缺失的患者。采用免疫组织化学方法检测错配修复蛋白的表达情况，利用甲基化特异性PCR方法进行甲基化检测，通过荧光PCR方法对BRAF V600E基因突变进行筛查。主要观察指标包括临床病理资料、基因突变状况、随访数据以及生存与预后分析。预后指标主要关注疾病无进展生存期和总体生存期。结果:散发性dMMR结直肠癌更常见于右半结肠、女性和老年患者，形态学以中分化居多，存在低级别肿瘤出芽的患者占多数。免疫组织化学表达方面，以MLH1、PMS2缺失为主，且蛋白表达有年龄及部位的特殊性。MLH1甲基化多见于老年女性患者，而在MLH1和PMS2缺失的年轻男性患者中较为少见。BRAF V600E基因突变在右半结肠的肿瘤中检出频率更高（ P<0.05）。此类肿瘤患者的3年和5年无进展生存率分别为90.7%和88.7%，3年和5年总体生存率分别为92.8%和90.7%。肿瘤出芽状态是影响肿瘤复发的独立危险因素（风险比=3.375，95%置信区间：1.060~10.741， P=0.039），其中低级别肿瘤出芽的患者预后较好，而中、高级别肿瘤出芽的患者预后较差。 结论:在散发性dMMR结直肠癌患者中，肿瘤出芽状态是影响肿瘤复发的独立危险因素。

目的:探讨鼻咽部甲状腺样低级别乳头状腺癌（TL-LGNPPA）的临床和病理学特征、免疫表型及相关基因改变。方法:收集2011年11月至2020年8月浙江省肿瘤医院（5例）和浙江大学医学院附属第一医院（10例）的15例TL-LGNPPA病例，对其进行临床和病理学观察、免疫组织化学染色及二代测序，总结其临床病理和分子生物学特点，并进行相关文献复习。结果:15例患者中位年龄36岁（20~60岁），男性7例，女性8例。最常见的症状是鼻出血和鼻塞，肿瘤主要位于鼻咽顶和鼻中隔后缘。病理形态学特征包括：由单层或假复层立方、柱状细胞构成复杂的乳头状及腺样结构，瘤细胞轻-中度异型。部分病例瘤细胞梭形，并与上皮细胞移行；可见核沟、磨玻璃样核，鳞状上皮化生，或间质散在沙砾体。此外，部分病例存在核极性反转细胞、靴钉样细胞及微乳头状结构。免疫组织化学染色结果显示所有病例肿瘤细胞甲状腺转录因子1（TTF1）、细胞角蛋白（CK）7、波形蛋白和广谱细胞角蛋白弥漫阳性；少数病例p40、CK5/6和p16部分细胞阳性；甲状腺球蛋白、Napsin A、CK20、CDX2、S-100蛋白和PAX8均阴性。Ki-67阳性指数1%~20%，其中≤10%有13例。EB病毒编码的RNA（EBER）原位杂交均阴性。6例标本进行了DNA序列检测，结果发现存在不同的基因突变（EWSR1、SMAD2、ROS1、JAK3、GRIN2A、ERRCC5、STAT3、TET2），未找到热点基因改变；同时都为低肿瘤突变负荷，也未检出胚系基因突变、微卫星高度不稳定和DNA错配修复相关基因改变。所有患者行内镜手术治疗，其中1例术后加放疗，随访23~129个月均无瘤生存。结论:TL-LGNPPA是一种鼻咽部少见的惰性肿瘤，具有独特的形态学和免疫表型。TL-LGNPPA患者预后较好，内镜下完整切除是治疗该肿瘤的有效方法。

免疫治疗尤其是免疫检查点抑制剂，彻底改变了晚期非小细胞肺癌的治疗模式。程序性死亡配体-1、肿瘤突变负荷对治疗反应的预测作用已得到充分证明，但其无法避免肿瘤异质性、检测方法及判读标准不一致等问题。研究发现一些新型生物标志物与免疫治疗疗效相关，如基因错配修复缺陷、微卫星不稳定性、驱动基因突变、外周血常规生物标志物、循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA等。进一步研究肿瘤组织和外周血的生物标志物在晚期非小细胞肺癌免疫治疗中的预测价值，可为治疗方案的选择提供参考。