目的:研究胎鼠肛门直肠发育过程中硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein，TXNIP)/NOD样受体家族含pyrin结构域3 (NOD-like receptor protein 3，NLRP3)轴在泄殖腔发育中的作用。方法:50只Wistar孕鼠被随机分为先天性肛门直肠畸形(anorectal malformation，ARM)组和正常组，每组各25只，孕10 d分别按125 mg/kg给予乙烯硫脲(ethylene thiourea，ETU)及等量生理盐水灌胃，孕14 d、孕15 d和孕16 d剖宫取胎，显微镜下收集胎鼠的后肠组织。通过蛋白印迹法和免疫组织化学检测NLRP3炎性小体和TXNIP蛋白的表达量。进一步在IEC-6中转染si-NC/TXNIP，通过实时定量PCR和蛋白印迹法检测TXNIP在mRNA和蛋白水平的敲减效率，用蛋白印迹法、细胞免疫荧光试验和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测si-NC组和si-TXNIP组NLRP3炎性小体、β-catenin的蛋白变化及细胞上清液中IL-1β和IL-18的含量。采用2 -△△CT法分析目的基因mRNA相对表达量变化，观察各组细胞目的基因表达量的变化趋势，Western blot条带和免疫组织化学图片用ImageJ软件进行半定量分析， P<0.05表示有统计学意义。 结果:与正常组相比，TXNIP和NLRP3炎性小体的蛋白表达在ARM胎鼠的孕15 d和孕16 d时增加( P＝0.0012、 P＝0.0081)；与si-NC组相比，si-TXNIP组NLRP3活化受到抑制( P＝0.0131)，cleaved-caspase-1的蛋白表达降低( P＝0.0386)，细胞上清液中的IL-1β和IL-18含量减少( P＝0.0035、 P＝0.0259)，以及β-catenin的蛋白表达量降低( P＝0.018)。 结论:TXNIP/NLRP3轴可能通过调控Wnt/β-catenin通路参与ARM的发生。

硫氧还蛋白（Trx）系统由Trx、硫氧还蛋白还原酶（TR）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸组成。Trx是一种重要的抗氧化分子，可抵抗多种应激引起的细胞死亡，在氧化还原反应中发挥着突出作用。TR是含硒（硒代半胱氨酸）的蛋白质，主要有3种形式：TR1（主要分布在胞质）、TR2（主要分布在线粒体）和TR3（主要分布在睾丸）。TR能调节细胞生长和凋亡，细胞癌变后，TR表达增加，促进细胞生长和转移。Trx系统与神经退行性疾病、寄生虫感染、获得性免疫缺陷综合征、类风湿性关节炎、高血压病、心肌炎等密切相关。Trx系统能清除体内活性氧，使细胞内外处于平衡状态，且其与硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）相互作用，对于糖代谢调节和肿瘤治疗具有重要作用。Trx系统是许多疾病进行药物治疗的一个重要靶点。

目的:评价右美托咪定对肠缺血再灌注小鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)信号通路的影响。方法:SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只，8~10周龄，体质量18~22 g，采用随机数字表法分为4组( n＝8)：假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、TXNIP抑制剂白藜芦醇组(Res组)和右美托咪定组(Dex组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min后恢复灌注120 min的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。Res组小鼠造模前腹腔注射白藜芦醇30 mg/kg，Dex组小鼠于缺血前30 min腹腔注射右美托咪定25 μg/kg。于再灌注120 min时，心脏穿刺法采集小鼠血标本，随后处死小鼠取小肠组织，光镜下观察病理学结果并行Chiu评分；采用ELISA法检测血清二胺氧化酶(DAO)浓度；采用Western blot法检测小肠组织TXNIP、ASK1和cleaved-caspase-3的表达水平。 结果:与Sham比较，I/R组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率升高，TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达上调( P<0.05)；与I/R组比较，Res组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率降低，TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达下调( P<0.05)；与I/R组比较，Dex组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率降低，TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达下调( P<0.05)。 结论:右美托咪定减轻小鼠肠缺血再灌注损伤的机制可能与抑制TXNIP/ASK1信号通路，减少细胞凋亡有关。

血液肿瘤是常见恶性肿瘤，目前大部分患者仍无法治愈，随着免疫治疗的发展，寻找新的治疗靶点成为目前血液肿瘤研究的热点之一。最近的研究发现，硫氧还蛋白(Trx)与血液肿瘤发生、发展密切相关。Trx是机体重要的氧化还原调节蛋白，广泛表达于人体组织细胞，通过清除活性氧簇(ROS)、结合对氧化还原敏感的蛋白，以及调节转录因子活性，保护细胞免受氧化损伤。Trx在多种血液肿瘤细胞中高表达，可促进肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞凋亡，导致肿瘤耐药。笔者拟就Trx的生物学功能、Trx在血液肿瘤发生、发展中的作用机制，以及Trx抑制剂在血液肿瘤治疗中的研究进展进行综述，旨在为探索血液肿瘤治疗的新靶点提供参考。

铁蛋白是普遍存在于各类有核生物、参与机体铁离子稳态调控的一类蛋白质,它可以自组装形成14 nm左右的中空笼状颗粒,常被作为药物和疫苗的递送载体.支原体铁蛋白的晶体结构显示,铁氧化活性中心和铁离子通道与其他物种存在结构上的差异.目前螺原体铁蛋白还未有相关研究.本研究发现,螺原体铁蛋白与包含支原体在内的其他物种铁蛋白均具有较低的同源性.利用大肠杆菌表达中华绒螯蟹螺原体铁蛋白(SeFer),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,蛋白能以可溶的形式表达于大肠杆菌细胞内.分别通过二乙氨基乙基(DEAE)弱阴离子交换层析、分子筛层析,获得高纯度的SeFer.在4℃和18℃,用坐滴气相扩散法对SeFer进行晶体筛选,该蛋白在多种条件下能生长晶体,通过同步辐射光源衍射,其晶体最好衍射至2.90 ?,属于I432空间群,收集的数据可用于后继结构解析.非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)、动态光散射(DLS)以及SeFer分子筛出峰位置显示,经大肠杆菌重组表达的SeFer相对分子质量为400 kD左右,粒径大小为15 nm左右,与理论值接近.利用Alphafold 2对SeFer进行结构预测,发现其具有与其他铁蛋白类似的二十面体球状结构,但是其铁氧化活性中心与支原体铁蛋白保守位点存在差异.本结果不仅为研究SeFer的晶体结构提供了基础,也为疫苗载体提供了新的候选.

多硫化氢(hydrogen polysulfides,H2Sn,n≥2)作为硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)所衍生的活性硫物质,在生理调节及信号转导过程中扮演着不可或缺的角色.H2Sn与H2S互为氧化还原对,一般经氧化或酶促作用从H2S转化生成,通过调节蛋白质相互作用及改变酶活力等方式发挥其生理作用.随着研究的深入,发现一些原本被认为是H2S发挥的生理学功能可能是由H2Sn所发挥的,并且H2Sn具有更高的蛋白质巯基化效率.因此,实时检测生物体内的H2Sn对于研究其生理活性及与H2S之间的联系具有十分重要的意义.传统的质谱光谱等检测方法需要破碎组织细胞,不适用于生物体内的实时检测.而荧光探针因其具有高灵敏度及特异性,同时生物毒性低常被选作H2Sn原位实时检测工具.本文概述了H2Sn的生理调节活性,着重基于响应机制的反应类型的介绍H2Sn检测荧光探针的设计策略、荧光性能、检测特点及生物成像应用等方面,并对这一领域所面临的挑战与发展进行了展望.

目的 研究尼古丁诱导口腔癌前病变细胞中E26转录因子1(E26 transformation specific 1,Ets1)与过氧化物还原酶1(peroxiredoxin 1,Prx1)的相互作用,探讨尼古丁在口腔癌前病变中作用的分子机制.方法 培养口腔癌前病变细胞株(dysplastic oral keratinocyte,DOK),实验分为尼古丁组、对照组、敲低组和敲低对照组,尼古丁组、敲低组和敲低对照组DOK细胞用1μmol/L尼古丁处理7d,对照组不作任何处理.分别采用蛋白质印迹法、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)法检测尼古丁组和对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达量、Prx1和Ets1蛋白结合量以及Ets1与过氧化物还原酶1基因(PRDX1)启动子区的结合情况.分别利用siRNA干扰和慢病毒感染技术敲低Ets1和Prx1,蛋白质印迹法检测敲低组和敲低对照组DOK细胞中Prx1和Ets1的蛋白表达变化.结果 尼古丁诱导Prx1和Ets1蛋白表达显著增加,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白相对表达量分别为0.71±0.02和0.12±0.01,均显著高于对照组中二者的表达(Prx1和Ets1蛋白分别为0.53±0.06和0.01±0.01,P=0.009,P=0.000).Co-IP结果显示,Prx1能与Ets1形成蛋白复合体,尼古丁组Prx1和Ets1蛋白结合量高于对照组.ChIP检测发现,尼古丁可显著上调Ets1与PRDX1基因启动子区的结合,尼古丁组富集倍数(80.9±19.7)显著高于对照组(13.8±1.2)(P=0.004).在DOK细胞中,成功敲低了Ets1和Prx1蛋白的表达,敲低组Ets1和Prx1蛋白相对表达量分别为0.60±0.06和0.48±0.03,敲低对照组分别为0.83±0.08和0.80±0.06 (P=0.016,P=0.002).敲低核转录因子Ets1可显著抑制Prx1蛋白表达(P=0.002);反之,敲低Prx1亦可显著降低Ets1蛋白的表达(P=0.000).结论 在口腔癌前病变细胞中,Ets1可直接调控Prx1的表达,与Prx1蛋白存在相互作用;尼古丁可能通过放大Ets1与Prx1之间的正反馈调控信号,促进口腔癌前病变的发生和发展.

硫,作为生物必需的大量营养元素之一,参与了细胞的能量代谢与蛋白质、维生素和抗生素等物质代谢.自然界中,硫以多种化学形态存在,包括单质硫、还原性硫化物、硫酸盐和含硫有机物.硫氧化是硫元素生物地球化学循环的重要组成部分,通常是指单质硫或还原性硫化物被微生物氧化的过程.硫氧化细菌种类繁多,其硫氧化相关基因、酶和途径也多种多样.近几年,相关方面的研究已取得很多进展,但在不同层面仍存在一些尚未解决的科学问题.本文主要围绕硫氧化细菌的种类及硫氧化途径的研究进展进行了综述.

[目的]探讨远端胃癌根治术后复发转移与硫氧化还原蛋白-1(Trx-1)表达的关系.[方法]本院行远端胃癌根治术患者手术切除标本139例,其中复发转移患者62例(复发组),无复发转移77例(无复发组),采用免疫组织化学染色检测其 Trx-1表达水平,并分析 Trx-1表达与远端胃癌根治术术后复发转移的关系.[结果]复发组患者组织中 Trx-1阳性表达率为(87.10 ± 8.72)%,高于未复发患者组织中阳性表达率(25.58 ± 10.25)%,和正常组织(10.25 ± 3.14)%,且差异均具有显著性(P<0.05).而正常组织中与未复发患者组织中Trx-1阳性表达率相比较差异无显著性(P>0.05).62例复发患者中Trx-1高表达组术后中位无病生存期为(13.5 ± 2.84)个月,显著短于Trx-1低表达组术后中位无病生存期(18.6 ± 3.58)个月.多因素Cox模型显示Trx-1高表达、TNM分期、肿瘤大小和淋巴结转移是影响胃癌患者无病生存的独立因素.[结论]Trx-1表达水平升高与远端胃癌根治术后无病生存时间缩短有关,Trx-1可作为预测远端胃癌根治术术后复发转移的标志物之一.

蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3),也被称为ERp57,是一种58kD的葡萄糖调节蛋白,是属于PDI家族的硫醇氧化还原酶伴侣蛋白[1].该分子涉及多种细胞功能,包括新合成的蛋白质的折叠和主要组织相容性复合物Ⅰ(MHC-Ⅰ)的装配[2,3].在人类的卵巢癌、乳腺癌、子宫癌、肺癌、胃癌和前列腺癌中都有PDIA3的表达[4-6].本研究对PIDA3在大肠癌组织中的表达情况及其在细胞内的定位进行初步探讨.