目的:研究积雪草酸(AA)对糖尿病大鼠血—视网膜屏障(BRB)的保护作用及其可能机制。方法:取健康8周龄雄性SD大鼠96只，按照随机数字表法分为正常对照组、糖尿病模型组、低剂量AA组和高剂量AA组，每组24只。取糖尿病模型组、低剂量AA组、高剂量AA组大鼠采用腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型，正常对照组注射等量枸橼酸盐缓冲液，模型建立后1个月，低剂量AA组和高剂量AA组分别给予37.5 mg/kg、75.0 mg/kg AA灌胃；正常对照组及糖尿病模型组给予等量0.5%羧甲基纤维素钠灌胃，每日1次。在给药第0、1、2、3、4周称量大鼠体质量并检测鼠尾静脉血糖值。给药后1个月取大鼠视网膜组织进行实验。采用苏木精—伊红染色法观察大鼠视网膜组织的病理变化；采用伊文思蓝定量法检测BRB的破坏情况；采用免疫荧光染色法检测视网膜组织中Occludin、Notch1、Jagged典型Notch配体1(JAG1)、Delta样典型Notch配体4(DLL4)蛋白的表达分布；采用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测Occludin、Notch1、JAG1、DLL4 mRNA及蛋白的表达。结果:给药第4周，高剂量AA组体质量明显高于糖尿病模型组，低剂量AA组和高剂量AA组血糖浓度均低于糖尿病模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。正常对照组大鼠视网膜细胞排列整齐，结构层次清晰。糖尿病模型组大鼠视网膜明显增厚，外核层增厚，细胞排列紊乱，结构层次不清晰。低剂量AA组和高剂量AA组大鼠视网膜厚度和结构均较糖尿病模型组明显改善。正常对照组、糖尿病模型组、低剂量AA组和高剂量AA组视网膜中伊文思蓝含量依次为(3.07±1.30)、(13.73±3.88)、(9.57±2.69)和(6.55±1.61)ng/mg，总体差异有统计学意义( F＝18.50， P<0.01)，其中高剂量AA组视网膜中伊文思蓝含量明显低于糖尿病模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。糖尿病模型组Occludin蛋白相对表达量明显低于其余3个组，Notch1、JAG1和DLL4蛋白相对表达量明显高于其余3个组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；高剂量AA组Occludin蛋白相对表达量明显高于低剂量AA组，Notch1、JAG1和DLL4蛋白相对表达量明显低于低剂量AA组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与正常对照组比较，糖尿病模型组及低剂量AA组Occludin mRNA相对表达量明显下调，Notch1、JAG1和DLL4 mRNA相对表达量明显上调，差异均有统计学意义(均 P<0.01)；高剂量AA组Occludin mRNA相对表达量明显高于糖尿病模型组和低剂量AA组，Notch1 mRNA相对表达量明显低于糖尿病模型组和低剂量AA组，JAG1和DLL4 mRNA相对表达量明显低于糖尿病模型组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:AA可能通过抑制Notch1信号通路发挥对糖尿病大鼠BRB的保护作用。

积雪草酸作为传统中草药植物积雪草中的主要活性成分,其在伤口愈合方面具有显著治疗作用.近年来有研究发现,积雪草酸能够提高抗氧化相关蛋白表达,从而保护胰岛β细胞对抗氧化应激损伤,促进细胞增殖.此外,积雪草酸还可减轻肝脏线粒体氧化应激水平,逆转胰岛素抵抗现象,并通过上调胰岛素受体相关蛋白表达,提高骨骼肌的胰岛素敏感性,改善葡萄糖稳态.同时积雪草酸对糖尿病肾病、糖尿病心血管病、糖尿病伤口愈合等相关糖尿病并发症也表现出很好的治疗作用.本文总结了近年来积雪草酸治疗糖尿病及其并发症领域的研究进展,以期为积雪草酸相关临床研究与应用提供参考.

目标:对积雪草的相关研究进行文献计量学和可视化分析,总结该研究领域的研究进展、研究热点及趋势.方法:检索中国知网(CNKI)、万方数据、维普数据库(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)2000年1月1日至2023年11月15日收录的积雪草相关研究文献.利用NoteExpress 3.9软件整理文献题录,通过CiteSpace 6.2.R5软件对作者、研究机构及关键词进行可视化分析.结果:纳入829篇文献,年发文量整体呈波动上升趋势;来源期刊324种,载文量最多的是《中国中西医结合肾病杂志》(26篇);涉及696位作者,发文量最多的是朱晓玲(24篇),核心作者包括朱晓玲、王永钧、章卓等;核心研究机构有海军军医大学、浙江中医药大学第一附属医院、重庆医科大学等;高频关键词有"积雪草苷""积雪草酸""中药复方"等.结论:积雪草当前的研究热点主要集中在化学成分、生物效应、研究方法和疾病治疗4个方面.积雪草酸及其抗炎、抗氧化、增殖、凋亡、抗肿瘤等领域是未来积雪草研究的重点趋势.

目的:研究积雪草酸对肺腺癌细胞系H1299及A549细胞迁移的影响及其相关分子机制.方法:用不同浓度积雪草酸(0、20、40、60、80、100 μmol/L)处理H1299和A549细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡情况;细胞划痕实验探究积雪草酸对细胞迁移能力的影响;Western blot检测积雪草酸处理对细胞Wnt/β-catenin信号通路及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平的影响.结果:MTT实验结果显示,随着积雪草酸加药浓度增加和加药时间延长,A549、H1299细胞存活率均下降(P＜0.05);流式细胞术检测结果显示积雪草酸可促进细胞凋亡(P＜0.05);细胞划痕实验结果表明,积雪草酸抑制H1299及A549细胞迁移(P＜0.05);Western blot结果显示,随药物浓度增高,β-catenin、p-GSK-3βSer9、c-myc、Vimentin、Snail蛋白表达降低,Axin2、E-cadherin蛋白表达增多.结论:在肺腺癌细胞中,积雪草酸抑制EMT的发生,从而抑制肿瘤细胞迁移,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

目的 探讨羟基积雪草酸(madecassic acid,MA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及自噬的影响.方法 将MCF-7 细胞分为阴性对照组、不同浓度的MA(80、100、120、140、160 μmol/L)组、不同浓度的他莫昔芬(10、20、30、40、50、35 μmol/L)组,干预24、36、48 h.初步确定MA发挥抗乳腺癌作用的最佳浓度和最佳时间后,采用MTT法检测细胞活力,计算相应的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1 荧光探针检测线粒体膜电位变化;Western blot法检测细胞增殖蛋白细胞核抗原蛋白(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、自噬蛋白苄氯素-1(Beclin-1)、微管相关蛋白 1 轻链 3-Ⅱ/Ⅰ(microtubule-associated protein1 light chain 3Ⅱ/Ι,LC3Ⅱ/Ι)、螯合体1(protein 62,p62)的蛋白相对表达水平.透射电镜检测自噬小体.结果 发挥抗肿瘤作用的他莫昔芬最佳浓度为35 μmol/L,MA最佳浓度为140 μmol/L,最佳时间均为48h.与阴性对照组相比,MA140 μmol/L组和他莫昔芬35 μmol/L组的细胞凋亡率,细胞荧光相对强度以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1蛋白相对表达水平均升高(P＜0.05,P＜0.01);PCNA、P62蛋白相对表达水平降低(P＜0.05,P＜0.01).与MA 140 μmol/L组相比,他莫昔芬 35 μmol/L组细胞凋亡率、细胞荧光相对强度以及Beclin-1蛋白相对表达水平明显升高(P＜0.01),PCNA蛋白相对表达水平明显降低(P＜0.01).阴性对照组MCF-7细胞膜完整,核膜清晰,细胞形态良好;MA 140 μmol/L组细胞膜、细胞核形态不规则,线粒体基质密度较高、嵴扩张,可见自噬小体;他莫昔芬35 μmol/L组细胞膜局部溶解、破损,可见双核仁,线粒体肿胀、基质溶解,可见自噬小体.结论 MA可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、诱导细胞凋亡和自噬.

目的 探讨积雪草酸(AA)对实验性蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠脑损伤的神经保护作用.方法 将108只成年SD大鼠分为假手术(Sham)1组、SAH+Vehicle(空载)组与SAH+AA组,每组36只;42只大鼠分为Sham2组及SAH后3、6、12、24、48、72 h组,每组6只.除Sham组外,其余各组采用单侧颈外动脉线刺法建立SAH模型,造模后SAH+AA组灌胃AA溶液(30 mg/kg).采用踏空实验和改良Garcia评分评估神经行为学改变,Western blot检测脑组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测脑组织谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)浓度,Fluoro-Jade B染色检测神经元死亡情况.结果 与Sham1组相比,SAH+Vehicle组踏空步数比例明显增多且改良Garcia评分明显降低,脑组织GPX4蛋白表达水平和GSH含量降低,MDA含量升高,死亡神经元数目增多(均P＜0.05).与SAH+Vehicle组相比,SAH+AA组踏空步数比例下降且改良Garcia评分升高,脑组织GPX4蛋白表达升高,MDA含量下降,GSH含量升高,死亡神经元数目明显下降(P＜0.05).结论 AA可能通过抑制脂质过氧化减轻大鼠SAH后的脑损伤.

目的:对小花清风藤Sabia parviflora Wall.ex Roxb.的化学成分进行研究.方法:采用硅胶柱、Sephadex LH-20 葡聚糖凝胶、制备HPLC等色谱方法,对小花清风藤中的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构.结果:从小花清风藤茎叶的醇提物中分离得到 15 个三萜类化合物,分别鉴定为:3β-羟基-Δ11,13(18)-齐墩果二烯(1)、3-氧-11α-羟基,Δ12-齐墩果烯(2)、3β-羟基-Δ9(11),12-齐墩果二烯(3)、3-氧-Δ11,13(18)-齐墩果二烯(4)、3α-羟基-齐墩果酸甲酯(5)、3-氧-Δ9(11),12-齐墩果二烯(6)、3α,21β-二羟基,Δ12-齐墩果烯(7)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-乌苏酸(8)、马斯里酸(9)、积雪草酸(10)、2α-羟基乌苏酸(11)、23-羟基乌苏酸(12)、柴胡皂苷 b3(13)、柴胡皂苷c(14)、柴胡皂苷f(15).结论:除化合物 5 以外,其他化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物 7～15 为首次从该属植物中分离得到.

目的:探讨积雪草酸对大鼠绝经后骨质疏松症(OP)的治疗作用及相关机制.方法:采用一次性手术摘除双侧卵巢方式构建绝经后 OP大鼠模型,分为模型组(9 只)、雌二醇组(10 只)、积雪草酸低剂量组(10 只)、积雪草酸中剂量组(10 只)和积雪草酸高剂量组(10 只).另取 9 只大鼠作为假手术组.观察骨组织病理改变、骨密度及微结构,以及血清骨代谢指标、骨代谢相关基因及蛋白表达.结果:雌二醇组和积雪草酸低、中、高剂量组均可减轻骨组织病理改变,增加骨密度,改善骨微结构.与假手术组比较,模型组大鼠股骨骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)下降,结构模式指数(SMI)和骨小梁分离度(Tb.Sp)上升,血清骨碱性磷酸酶(BALP)水平下降,Ⅰ型胶原交联氨基端肽(NTX-Ⅰ)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平上升,骨组织音猬因子(SH H)、细胞表面跨膜蛋白Patched1(Ptc1)、7 次跨膜蛋白(Smo)、Gli家族锌指蛋白-1(Gli1)、矮小相关转录因子2(Runx2)、骨保护素(OPG)、成骨细胞特异性转录因子(Osx)mRNA 和蛋白表达下降,细胞核因子-κB受体活化因子(RANKL)mRNA和蛋白表达上升(均P<0.05).与模型组比较,雌二醇组和积雪草酸低、中、高剂量组大鼠股骨BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th上升,SMI和Tb.Sp下降,血清BALP水平上升,NTX-Ⅰ和TRAP水平下降,骨组织 SHH、Ptc1、Smo、Gli1、Runx2、OPG、Osx mRNA 和蛋白表达上升,RANKL mRNA 和蛋白表达下降(均 P<0.05).雌二醇组和积雪草酸低剂量组上述指标比较差异无统计学意义(均P>0.05).积雪草酸低、中、高剂量组上述指标呈剂量依赖性(均P<0.05).结论:积雪草酸可治疗绝经后 OP,可能与激活 Hedgehog信号通路相关.

目的 利用网络药理学筛选复方积雪草的活性成分,探讨复方积雪草酸治疗慢性肾脏病(CKD)的物质基础、作用靶点及信号通路.方法 通过中药系统药理学数据库分析平台(TCMSP)和STITCH数据库,收集复方积雪草的活性物质,并鉴定其相应靶点.应用OMIM和TTD平台收集慢性肾病的相关靶点,利用DrugBank数据库搜集已上市药物治疗慢性肾病的作用靶点;利用STRING数据库构建药物疾病交集靶点的PPI网络,并筛选出hub靶基因;随后,运用David数据库进行GO分析和KEGG信号通路富集分析,通过Cytoscape3.10.0软件来构建复方积雪草活性成分与对应的靶点的成分-靶点-信号通路网络图;利用AutoDock软件和Pymol软件进行分子对接并对结果进行可视化分析.结果 复方积雪草酸活性成分对应192个靶标基因,与慢性肾病靶点集和药物治疗疾病靶点集进行交集分析后共得到26个关键基因,这些基因涉及的信号通路包括JAK-STAT信号通路、脂质和动脉粥样硬化通路、PI3K-AKT等30条信号通路.分子对接验证结果表明,复方积雪草中的活性成分槲皮素、谷甾醇、洋蓟素(e)与慢性肾脏病相关的疾病靶点,如 EGFR、XDH、MMP1、NOS3等蛋白具有强结合力.结论 复方积雪草通过多成分、多靶点、多途径发挥对慢性肾脏病的治疗作用.该研究为了解复方积雪草治疗CKD的作用机制提供了坚实的基础和佐证,并为今后的实验验证奠定了基础.

积雪草为伞形科植物积雪草的干燥全草,应用历史悠久、药理作用广泛.本文通过查询相关文献对积雪草的化学成分、药理作用进行综述分析,并结合中药Q-Marker概念,从传统药性、传统药效、化学成分可测性、不同复方配伍中表达组分等角度对积雪草Q-Marker进行预测,发现积雪草具有促进创伤愈合及抑制瘢痕增生、抗阿尔茨海默病、改善肾肺损伤及关节炎等活性,主要含有三萜皂苷类、黄酮类、挥发油类及多炔烯烃类等成分,主要活性物质为三萜皂苷类成分,建议将积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草苷、羟基积雪草酸和积雪草苷B等三萜皂苷类,芦丁、槲皮素、山柰酚、黄芩素、木犀草素等黄酮类化合物及挥发油类成分作为积雪草Q-Marker的主要选择,有利于完善积雪草质量评价标准并建立科学全面的专属质量控制体系,为积雪草临床用药及其资源的开发利用提供理论依据.