醛固酮合成酶缺乏症(ASD)是一种由 CYP11B2基因变异所致的罕见常染色体隐性遗传疾病，临床表现主要为婴幼儿时期反复呕吐、腹泻、体格增长缓慢、低钠血症、高钾血症、低血容量等。临床上难与其他婴儿失盐性疾病鉴别。目前，ASD确诊主要依靠类固醇激素水平测定和变异基因分析。9α-氟氢可的松是治疗ASD的主要药物，但治疗方案尚未统一。现就ASD的病因、发病机制、临床表型、诊断和治疗等方面的研究进展进行综述，以期提高临床医师的诊疗水平。

目的:探究喂食槲皮素对链脲佐菌素诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠的治疗效果及引起的代谢通路变化.方法:采用腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg建立Ⅰ型糖尿病大鼠模型,随机分为模型(T1DM)组、槲皮素低剂量(T1DM+QUE(25))组、槲皮素高剂量(T1DM+QUE(50))组.治疗组给予相应浓度的槲皮素(mg/kg),正常对照组(Normal)与T1DM组给予与治疗组相应体积的空白溶剂,持续喂养8周后收集血样进行乙酰乙酸、糖化血红蛋白、丙氨酸氨基转移酶、血脂等检测,收集肌肉组织样品检测糖原合成酶水平.并以LC-MSMS进行血浆代谢组学分析.结果:与T1DM组相比,T1DM+QUE(50)组血浆中的乙酰乙酸、天门冬氨酸氨基转移酶水平显著降低(P＜0.05),脂蛋白脂酶、总抗氧化能力水平显著上升(P＜0.05),其水平相较T1DM组更接近Normal组,而糖化血红蛋白、丙氨酸氨基转移酶、低密度脂蛋白、总胆固醇水平也有一定改善,但不显著;肌肉中的糖原合成酶蛋白表达亦有显著改善(P＜0.05).代谢组学分析结果显示槲皮素喂食主要干预鞘脂的代谢与合成、类固醇激素生物合成、视黄醇代谢、花生四烯酸代谢等代谢通路.结论:槲皮素喂食可改善Ⅰ型糖尿病大鼠脂质及胆固醇代谢,缓解肝损伤,通过影响脂质代谢及调节炎症相关通路而达到一定的治疗效果.

目的 探讨参杞强精颗粒对过氧化氢H2O2诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激损伤的作用.方法 以小鼠睾丸间质细胞为细胞模型,用MTT法检测参杞强精颗粒对正常TM3的细胞毒性作用;以500 μmol/L H2O2诱导损伤TM3细胞4 h后复制氧化应激损伤模型,采用CCK-8法检测不同浓度参杞强精颗粒对H2O2损伤TM3细胞增殖活力的影响;分别给予参杞强精颗粒(0.4、0.8和1.6 mg/mL)干预处理24 h后,用酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中睾酮分泌水平、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量及谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活性;同时检测细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(TAOC)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测睾酮合成酶类固醇合成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、17β-羟基固醇脱氢酶(17β-HSD)mRNA表达.结果 参杞强精颗粒在浓度为0.05～2.50 mg/mL时对正常TM3细胞无毒性作用.与H2O2损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高TM3细胞增殖活率(P<0.05).与H2O2模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组提高细胞上清液中睾酮水平和NO含量,增加GST活性,降低LDH和8-OHdG含量(P<0.05).与H2O2 损伤模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组降低细胞内ROS、MDA含量,同时增强CAT、SOD和TAOC的活性(P<0.05).与H2O2 模型组比较,参杞强精颗粒各剂量组能提高睾酮合成酶StAR、P450scc、17β-HSD mRNA相对表达量(P<0.05).结论 参杞强精颗粒对H2O2诱导睾丸间质细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能通过清除氧自由基、抗氧化应激损伤及促进睾酮合成有关.

目的 建立小鼠1型糖尿病模型,研究糖尿病早期时睾丸中睾酮合成关键酶的变化.方法 雄性成年鼠20只,随机分为对照组10只、糖尿病模型组10只.通过ip链脲佐菌素(150 mg/kg)制备糖尿病模型,成功制备糖尿病模型后4周处死小鼠,取血清和睾丸组织备用.实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测睾丸组织中促黄体生成素受体(LHR)、类固醇激素合成灵敏调节蛋白(StAR)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶Ⅵ型(3β-HSD6)、17a-羟基化酶/17,20-裂解酶Ⅰ型(P450c17a1)及17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅲ型(17β-HSD3)相应mRNA(Lhcgr、Star、Cyp11a1、Hsd3b6、Cyp17a1和Hsd17b3)含量,酶联免疫吸附法测定血清中睾酮和黄体生成素(LH)含量、睾丸组织中3β-HSD1、P450c17a1及17β-HSD3酶活性.结果 与对照组比较,4周糖尿病小鼠血清中睾酮和LH含量显著降低(P＜0.05);睾丸组织的Lhcgr、Star、Cyp11a1、Hsd3b6、Cyp17a1和Hsd17b3 mRNA含量显著降低(P＜0.05、0.001);3β-HSD1、P450c17及17β-HSD3酶活性显著降低(P＜0.05、0.01).结论 早期糖尿病小鼠睾丸中睾酮合成关键酶的表达显著降低.

睾酮是一种重要的雄激素,主要来源于睾丸间质细胞.睾酮在机体内具有重要的生理作用:维持生殖功能及第二性征,增强肌肉强度与质量,维持骨密度等.睾丸间质细胞生成睾酮主要受丘脑-垂体-性腺轴(HPGA)的调节,下丘脑促性腺激素释放神经元受到来自神经系统单胺类递质等神经肽信号,经特定转录因子、辅酶因子等物质的刺激,合成并分泌促性腺激素释放激素(GnRH),GnRH经门脉循环作用于垂体前叶,促进黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)的合成与分泌.其中LH作用于睾丸Leydig细胞,经过多种类固醇激素合成酶的作用,最终将游离的胆固醇转化为睾酮.本文对HPGA中主要调节因素特别是分子调控机制的研究进展进行了综述.

为了探讨刺芹侧耳子实体生长发育时期的基因表达变化,本文利用高通量测序技术对刺芹侧耳不同发育时期(菌丝期、原基期、子实体时期)进行RNA-Seq分析,在转录水平上解析差异表达基因在刺芹侧耳生长发育过程中的作用和功能.KEGG功能富集显示,菌丝期差异表达基因主要富集在碳代谢和氨基酸代谢中,其中三羧酸循环中编码柠檬酸合酶、乌头酸水合酶、异柠檬酸脱氢酶、琥珀酰辅酶A合成酶、琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的基因表达量均上调,说明碳代谢和氨基酸代谢是菌丝时期的主要能量来源;原基期上调的差异表达基因主要富集在脂肪酸代谢,其中RT-PCR定量结果显示原基期编码脂肪酸合酶的基因和编码脂酰辅酶A合成酶的基因下调,编码超氧化物酶的基因和编码过氧化氢酶的基因上调,表明脂肪酸代谢和抗氧化酶对刺芹侧耳原基期维持机体的稳定和生物应激方面起着重要作用.子实体时期上调的差异表达基因主要富集在剪接体、类固醇的生物合成以及AMPK信号通路中,说明环境因子对子实体时期有一定的影响.

目的:研究大剂量氢化可的松短期给药诱发小鼠药源性证候的特征及对肾上腺皮质功能的影响.方法:32只雄性ICR小鼠随机分为对照组与氢化可的松不同剂量干预组(12.5 mg·kg-1·d-1组、25 mg·kg-1·d-1组、50 mg·kg-1·d-1组),每组8只.氢化可的松不同剂量组小鼠分别灌胃给予相应浓度的氢化可的松溶液,对照组小鼠灌胃给予相同体积灭菌水,连续5d.分别于给药第1、3、5天称量每只小鼠体质量.末次给药后,采用课题组前期建立的小鼠辨证论治实验方法学检测小鼠表征信息(躯体不同部位红外温度、腋温、抓力);取各只小鼠胸腺、脾脏称重,计算脏器指数;分离肾上腺组织,实时荧光定量PCR技术检测类固醇激素合成酶(Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1)基因表达,Western blot检测StAR、SRBI与LDLR蛋白表达.结果:①给药1、3、5d后,氢化可的松25mg·kg-1 ·d-1和50 mg·kg-1·d-1组小鼠的体质量均较对照组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).②给药5d后,氢化可的松12.5 mg·kg-1·d-1和25 mg· kg-1 ·d-1组小鼠的头部最高温度均较对照组显著降低(P＜0.05),但氢化可的松各剂量组小鼠的躯干平均温度、尾部最低温度、腋温、抓力无明显变化.③与对照组相比,氢化可的松各剂量组小鼠的脾脏指数均明显下降(P＜0.01),且呈剂量依赖性;50 mg·kg-1·d-1组小鼠的胸腺指数较对照组显著降低(P＜0.01).④与对照组相比,氢化可的松25mg·kg-1 ·d-1和50mg· kg-1·d-1组肾上腺组织中Star、Cyp1 1a1、Cyp11b1和Cyp21a1的mRNA表达均显著减少(P＜0.05,P＜0.01),StAR、LDLR和SRBI蛋白表达均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:大剂量氢化可的松(25 mg· kg-1·d-1和50mg· kg-1·d-1)短期给药5d可显著抑制小鼠肾上腺皮质功能,其证候表现以药源性阴虚证为主.

目的 研究糖皮质激素药物作用于不同品系小鼠后肾上腺皮质功能抑制程度及其诱导药源性证候的差异性.方法 选用ICR、BALB/c、C57BL/6J、KM和裸小鼠5种小鼠为实验对象,采用泼尼松龙进行干预.每种小鼠16只,其中正常对照组8只,泼尼松龙组8只.以0.5 mg/(kg·d)泼尼松龙连续灌胃14 d,每日观测小鼠体重,在给药第14天,运用小鼠辨证论治实验方法学检测小鼠中医四诊信息,次日处死小鼠,取脾、胸腺称重并计算脏器指数;运用ELISA检测血清皮质酮和ACTH含量;采用实时荧光定量PCR技术检测肾上腺Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2基因表达;运用Western blot方法检测肾上腺LDLR、SRBI、StAR蛋白表达.结果 与各自对照组比较:1)0.5 mg/(kg·d)泼尼松龙给药后第7天起ICR小鼠体重显著下降(P<0.01);给药后第13天起BALB/c小鼠体重显著下降(P<0.01);给药后第5天起C57BL/6J小鼠体重显著下降(P<0.01);给药后第13天裸鼠体重显著下降(P<0.05).2)泼尼松龙导致ICR小鼠抓力显著下降以及躯干平均温度显著降低(P<0.05).3)泼尼松龙导致ICR小鼠和裸鼠脾重量显著下降(P<0.01)以及裸鼠脾指数下降(P<0.05),泼尼松龙导致ICR、C57BL/6J和KM小鼠胸腺重量和胸腺指数均显著下降(P<0.01).4)泼尼松龙显著导致BALB/c与KM小鼠血清皮质酮下降(P<0.05),也显著引起BALB/c小鼠血清促肾上腺皮质激素(ACTH)含量下降(P<0.01).5)泼尼松龙显著下调ICR小鼠肾上腺Cyp21a1基因表达(P<0.05),下调C57BL/6J小鼠Star基因表达(P<0.01),下调KM小鼠Cyp11a1、Cyp21a1基因表达(P<0.01),下调裸鼠Star与Cyp21a1基因表达(P<0.05);且泼尼松龙抑制ICR小鼠肾上腺LDLR蛋白表达以及KM小鼠肾上腺StAR蛋白表达.结论 泼尼松龙造成的小鼠药源性虚证主要表现为"气虚",涉及中医"肾藏象"与"脾藏象",其物质基础以肾上腺皮质类固醇激素合成酶分子表达被抑制以及垂体-肾上腺皮质轴功能被抑制为主;开展糖皮质激素药源性虚证研究建议首选ICR小鼠.

目的 探讨泼尼松龙诱发小鼠药源性证候的特征及可能物质基础.方法 80只ICR小鼠随机分为正常对照组、极低剂量组、低剂量组、中剂量组、高剂量组各16只.极低剂量组、低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予醋酸泼尼松龙片0.25、0.5、2.5、12.5mg/(kg·d)灌胃,正常对照组给予等量灭菌水.每组16只中8只干预7天,另外8只干预14天.隔日动态观测小鼠体质量,分别比较干预不同时间各组小鼠体质量、抓力、腋温、旷场活动度、躯体不同部位红外温度等表征信息;取小鼠脾脏、胸腺和睾丸称重并计算脏器指数;检测血清皮质酮和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量;检测肾上腺功能相关基因表达和肾上腺低密度脂蛋白受体(LDLR)、B族Ⅰ型清道夫受体(SRBI)、类固醇合成急性调节蛋白(StAR)蛋白表达.结果 中剂量组和高剂量组干预7天和干预14天,小鼠体质量、脾脏质量、胸腺质量、脾脏指数、胸腺指数较正常对照组同时间下降,血清皮质酮和ACTH含量、肾上腺功能相关基因表达和肾上腺LDLR、SRBI、StAR蛋白均较正常对照组不同程度降低(P＜0.05),而各组小鼠抓力、腋温、旷场活动度、躯体不同部位红外温度差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 泼尼松龙造成的小鼠药源性虚证为阴虚证,该药源性虚证的物质基础可能以肾上腺皮质类固醇激素合成酶分子表达被抑制以及垂体-肾上腺皮质轴功能被抑制为主.

目的 研究氢化可的松诱发的虚证状态对肝癌小鼠肿瘤增长的影响.方法 将雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、肿瘤模型组、氢化可的松组,氢化可的松肿瘤组,采用氢化可的松给药小鼠14d造成虚证状态,给药第1天同步接种H22肝癌细胞至腋下复制荷瘤小鼠模型.动态观测小鼠体质量与肿瘤大小变化;处死小鼠后,取脾脏、胸腺称质量并计算脏器指数;采用实时荧光定量PCR技术检测肾上腺类固醇合成酶以及肿瘤增殖相关的mRNA表达;运用Western blot方法检测肿瘤Akt、p-Akt蛋白表达.结果 与正常对照组比较,肿瘤模型组脾脏显著增大(P＜0.05),肾上腺Cyp11a1、Cyp11b1、Cyp11b2的基因表达显著下调(P＜0.05);使用氢化可的松的小鼠脾脏和胸腺明显萎缩(P＜0.01),肾上腺Star、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp11b1基因均下调(P＜0.05).与肿瘤模型组比较,氢化可的松肿瘤组小鼠接种肿瘤第7天肿瘤体积减小(P＜0.05),同时氢化可的松显著抑制肿瘤组织Akt1基因表达(P＜0.05),促使Fox03基因表达上调(P＜0.05)、抑制Akt、p-Akt蛋白表达.与氢化可的松组比较,氢化可的松肿瘤组小鼠脾脏、胸腺萎缩减轻,肾上腺类固醇合成酶基因表达均上调(P＜0.05).结论 氢化可的松通过抑制内分泌免疫功能诱发小鼠虚证,短期使用小鼠肿瘤增殖减缓,而持续性虚损状态下促进肿瘤生长.