目的:分析紫苏叶提取物对糖尿病肾脏病大鼠肾纤维化及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响。方法:选取40只大鼠，10只作为空白组，其余30只建立糖尿病肾脏病大鼠模型，共有29只大鼠建模成功，将其分为模型组9只、二甲双胍组10只、紫苏叶提取物组10只。二甲双胍组给予二甲双胍，紫苏叶提取物组给予紫苏叶提取物，空白组、模型组不做处理，干预14 d后观察大鼠变化。结果:与空白组相比，模型组、二甲双胍组、紫苏叶提取物组血糖、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)水平、Notch、Snail1 mRNA表达量及相对表达量上升( P均<0.05)；与模型组相比，二甲双胍组、紫苏叶提取物组血糖、BUN、SCr、ALT、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平、Notch、Snail1 mRNA表达量及相对表达量下降( P均<0.05)；二甲双胍组、紫苏叶提取物组血糖、BUN、SCr、ALT、AST、Ⅳ-C、PCⅢ、HA、LN水平、Notch、Snail1 mRNA表达量及相对表达量水平对比差异较小( P均>0.05)。 结论:糖尿病肾脏病大鼠经紫苏叶提取物干预后肾纤维化减轻，Notch/Snail1信号通路受抑。

目的 探讨紫苏叶提取物(Perillae folium extract,PFE)对3T3-L1脂肪细胞的影响.方法 将3T3-L1脂肪细胞培养在不同浓度的PFE(100,250和500μg/ml)中,通过MTS法测定PFE的无毒性细胞浓度,通过Western blot法测定过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和CAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的蛋白表达水平变化,通过RT-PCR法测定PPAR-γ、C/EBPα、固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP-1c),硬脂酰辅酶脱氢酶1(SCD1),脂肪酸合成酶(FAS),甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)和肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)等基因的mRNA表达水平变化.结果 通过MTS法得出PFE的无毒性细胞浓度.在Western blot实验中,PPAR-γ和C/EBPα蛋白量的表达随着PFE浓度的升高而减少.在RT-PCR结果中,PPAR-γ、C/EBPα、SREBP-1c和GPAT等基因的表达随着PFE浓度的升高而减少,SCD1和FAS的基因表达水平也降低,CPT1基因的表达水平是随着PFE的浓度而逐渐增加的.此结果说明PPAR-γ和C/EBPα的基因和蛋白表达是受到抑制的.结论 PFE是通过抑制PPARγ、C/EBPα和SREBP1及其靶基因的表达影响脂肪细胞的生成及形成,调节脂肪组织脂质代谢,对以后研究肥胖症具有一定的参考意义.

目的:探讨阿霉素(ADR)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生氧化损伤后,紫苏叶水提取物(PFAE)对其细胞活性、氧化损伤标记物及细胞凋亡等关键因子的影响.方法:ADR刺激HK-2细胞建立损伤模型,使用N-乙酰半胱氨酸(NAC)或不同浓度PFAE(5,15,45 g·L-1)干预后,采用细胞增殖/毒性检测(CCK-8)法检测细胞存活率,结合光镜下细胞形态变化,筛选出PFAE保护细胞的最佳浓度.后续实验分为6组:空白组,ADR(0.05 g·L-1)组,PFAE(15 g·L-1)组,ADR+ PFAE(0.05+15) g·L-1组,NAC(0.81 g·L-1)组,ADR +NAC(0.05 +81)g·L-1组.检测细胞匀浆中的丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)和细胞总抗氧化能力,2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,流式细胞术及脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TUNEL)染色法检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞线粒体凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9和3(Caspase-9,Caspase-3),聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)包括其剪切体的表达,及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路中p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 MAPK),细胞外信号调节激酶(ERK),c-Jun氨基端激酶(JNK)及其磷酸化蛋白的表达.结果:与空白组比较,ADR组的细胞活性显著降低(P＜0.01),与ADR组比较,5,15 g·L-1的PFAE和NAC能促进细胞的增殖(P＜0.01).与空白组比较,ADR组抗氧化能力和SOD水平显著降低(P＜0.01),MDA和ROS的水平显著增高(P＜0.01),与ADR组比较,ADR+ PFAE组和ADR+NAC组抗氧化能力和SOD水平显著升高(P＜0.01),MDA和ROS的水平显著下降(P＜0.01).与空白组比较,ADR组细胞凋亡率上升(P＜0.01),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2,cleaved Caspase-9/Caspase-9,cleaved Caspase-3/Caspase-3,cleavedPARP/PARP水平显著上升(P＜0.01),MAPKs通路中的p38 MAPK,ERK和JNK的磷酸化蛋白表达明显增高(P ＜0.05,P＜0.01);与ADR组比较,PFAE或NAC干预后减轻了细胞凋亡率,降低了凋亡蛋白的相对比值,并且抑制了MAPK信号通路中p38 MAPK,ERK蛋白的磷酸化(P＜0.01),但对磷酸化的JNK蛋白表达无影响.结论:PFAE可以减轻ADR诱导的HK-2细胞氧化损伤,并发挥抗氧化作用,通过线粒体凋亡途径和ERK/p38 MAPK信号通路来抑制细胞凋亡.

目的 考察紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用.方法 紫外分光光度法检测单位时间内酶促反应体系中尿酸含量的变化,计算紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率.双倒数作图法确定紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制类型,Dixon作图法计算紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制动力学常数Ki.结果 紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用随着提取物质量浓度增大而增强,5 mg/mL时抑制率达到43.93％,IC50为5.80 mg/mL.动力学分析表明,紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制属于竞争性可逆抑制,抑制动力学常数Ki为2.19 mg/mL.结论 紫苏叶提取物对黄嘌呤氧化酶有显著抑制作用,可为相关抑制剂治疗高尿酸血症提供一定的理论和技术支撑.

目的 研究紫苏Perillafrutescens(L.)Britt.叶的化学成分及其体外抗炎活性.方法 紫苏叶75％乙醇提取物采用D101、硅胶、ODS及及半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.采用RAW264.7模型评价其体外抗炎活性.结果 从中分离得到7个化合物,分别鉴定为(3R,5S,6S,7E,9S)-megastiman-7-ene-3,5,6,9-tetrol(1)、2-[4-(3-hydroxypropyl)-2-methoxyphenoxy]propance-1,3-diol(2)、1-O-(β-D-glucosyl)-2-[2-methoxy-4-(-hydroxypropyl)-phenoxy]-propan-3-ol(3)、5-methoxyisolariciresinol(4)、lariciresinol 4'-O-β-D-glucopyranoside(5)、butyl p-hydroxybenzoate(6)、mongolicumin A(7).化合物2在80 μmol/L 时可以显著抑制iNOS的蛋白表达,化合物7可以抑制COX-2的表达.结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物2具有明显的体外抗炎活性.

目的 分离紫苏叶的化学成分,并鉴定其抗炎活性.方法 紫苏叶的75％乙醇-水提取物经大孔吸附树脂洗脱,依次采用正向硅胶柱、反相十八烷基硅烷键合硅胶柱等进行分离,并采用半制备型高效液相色谱法进行纯化,得到单体化合物;采用核磁共振技术对各单体化合物进行结构鉴定;以RAW264.7细胞为模型,以诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶2(COX-2)蛋白的表达水平为指标,初步评价了各单体化合物的抗炎活性.结果 共分离到6个单体化合物,经鉴定分别为4-hydroxy-4,5-trimethyl-3-(3-oxobut-1-enyl)cyclohex-2-enone(化合物1),loliolide(化合物2),(E)-4-hydroxy-3,3,5-trimethy-1-4(3-oxobut-1-en-1-yl)cy-clohexan-1-one(化合物3),isololiolide(化合物4),erythro-(7 S,8 R)-guaiacyl-glycerol-β-O-4′-dihydroconiferyl ether(化合物5),erythro-(7 S,8 R)-guaiacyl-glycerol-β-O-4′-dihydroconiferyl ether-7-O-β-D-glucopyranoside(化合物6).化合物2,3,4在80μmol/L时可显著抑制iNOS蛋白的表达,化合物1可抑制COX-2蛋白的表达.结论 化合物1-6均从紫苏叶中首次分离得到,其中化合物1,2,3,4均具有抗炎活性.

目的:构建2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并利用该体系对180种中药提取物进行筛选.方法:针对SARS-CoV-2 3CL蛋白酶进行原核表达和纯化,进而建立基于荧光能量共振转移技术的SARS-CoV-2 3CL抑制剂高通量筛选体系.利用该体系对180种中药提取物进行筛选,并验证活性组分的量效关系.结果:本研究成功构建了SARS-CoV-2 3CL蛋白酶的高通量筛选体系,并筛选得到5种中药提取物(半枝莲乙酸乙酯部位、防风石油醚部位、紫苏叶环己烷部位、紫苏梗环己烷部位以及紫苏梗乙酸乙酯部位)具有3CL蛋白酶的抑制活性,其半数抑制浓度分别为30.03、20.00、18.34、25.04、18.48μ g/mL.结论:该体系可以应用于3CL蛋白酶抑制剂的筛选,为新药研发提供了有力的工具.同时,5种活性提取物为筛选抗SARS-CoV-2活性成分提供了依据.