目的:初步探讨改性纳米生物玻璃水凝胶的制备以及它的理化、生物学特性。方法:(1)取400 mL氢氧化钙饱和溶液，加入纳米二氧化硅悬液67 mL，制备纳米生物玻璃悬液，观察其悬浮稳定性。(2)制备终质量分数为10%明胶、1%海藻酸钠的水凝胶，设为对照组；在对照组水凝胶基础上加入实验(1)制备的纳米生物玻璃悬液，制备终质量分数为0.5%生物玻璃、10%明胶、1%海藻酸钠的水凝胶，设为实验组。观察2组水凝胶在4、25 ℃的成胶情况并记录成胶时间及在37 ℃的熔解情况并记录熔胶时间。另取2组水凝胶，4 ℃冷浴后用25 g/L的氯化钙溶液交联，用杨氏模量测定仪测量压缩模量。另取2组水凝胶，同前交联后于-20 ℃冻干，测量相关体积并计算孔隙率。样本数均为3。(3)取12只24 h龄C57BL/6J小鼠乳鼠，分离培养成纤维细胞(Fb)，倒置显微镜下观察其形态，并培养第3代Fb，用于后续实验。取Fb，制备细胞浓度为1×10 5个/mL的单细胞悬液，按随机数字表法(下同)分为实验组和对照组，分别加入实验(2)制备的实验组和对照组液态水凝胶，培养12、24、48 h，每组各取3孔，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞存活率。(4)取第3代Fb，制备细胞浓度为(3.0～4.5)×10 7个/mL的单细胞悬液，分为实验组和对照组，每组1管，加入绿色荧光探针DIO染色，分别加入实验(2)中制备的实验组和对照组液态水凝胶9 mL，同前交联后制备载细胞水凝胶。培养3 d，激光共聚焦显微镜下观察细胞在凝胶中的存活情况；同前制备载细胞水凝胶块但不加绿色荧光探针DIO，培养7 d，在扫描电子显微镜下观察细胞在水凝胶中的黏附及伸展情况。(5)取6周龄雌性BALB/c-nu裸鼠12只，分为实验组和对照组，每组6只，在背部制作直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面，伤后即刻，分别放入1块实验(4)制备的实验组和对照组载细胞水凝胶块。伤后7、14 d，每组取3只裸鼠，收集创面及创周组织，苏木精-伊红染色，观察创面愈合情况。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)纳米生物玻璃粒子可在水中均匀分散，具有良好的悬浮稳定性。(2)2组水凝胶在37 ℃下均呈熔融状态，均未见粒子析出。实验组和对照组水凝胶在37 ℃下的熔胶时间分别为5、10 min，在25 ℃下成胶时间分别为30、180 min，在4 ℃下成胶时间分别为5、10 min。实验组水凝胶压缩模量为(53±6)kPa，明显高于对照组的(23±6)kPa( t＝6.364， P<0.01)。实验组水凝胶孔隙率为(86.1±2.1)%，与对照组的(88.2±4.4)%相近( t＝1.210， P>0.05)。(3)细胞呈长梭形，细胞核所占比例较大，符合Fb形态学特征。培养12、24、48 h，实验组细胞存活率为(84±4)%、(89±4)%、(130±10)%，与对照组的(89±5)%、(90±4)%和(130±11)%相近( t＝1.534、0.611、0.148， P>0.05)。(4)培养3 d，2组细胞在水凝胶中形态完整，未见细胞核裂解、消失，细胞质保持完好，并且实验组细胞荧光强度明显强于对照组。培养7 d，实验组和对照组细胞在水凝胶中黏附、伸展，且实验组细胞在水凝胶中黏附数明显多于对照组。(5)伤后7 d，对照组、实验组裸鼠创面面积均缩小，且实验组减小更明显，2组裸鼠创面及创周均可见大量炎症细胞分布。伤后14 d，对照组裸鼠创面面积大于实验组，且创面及创周炎症细胞明显多于实验组。 结论:纳米生物玻璃水凝胶具有良好的理化、生物学特性和载细胞潜能，同时还具有促创面愈合能力，在临床应用方面有着较好的潜力。

牙髓病及根尖周病的治疗关键为清除根管内细菌及生物膜.以次氯酸钠作为冲洗液,配合使用注射器和超声冲洗,是目前临床首选的根管冲洗方式;氢氧化钙是诊间根管封药的主要选择.然而,常规根管化学消毒存在药物渗透能力欠佳以及产生耐药性等不足.近年来,新型生物小分子制剂如M33D、LL-37等抗菌肽,反义RNA分子ASwalR/ASvicR,纳米银、介孔硅酸钙、壳聚糖等纳米颗粒,因其良好的渗透性及生物调节能力,可在根管复杂解剖结构和牙本质小管深处发挥抗菌、抗生物膜的功效,并促进根尖周病变的愈合.然而,生物小分子制剂的体内稳定性、生物安全性及临床价值等仍需进一步研究.传统药物的改良、多种药物的联合使用仍是研究关注重点,未来还需开发新型小分子制剂和理想消毒药物.本文对生物小分子制剂在感染根管化学消毒中的研究新进展进行综述.

目的 探讨根管充填糊剂纳米氢氧化钙的制备方法及其对根管微渗漏的影响.方法 改良制备纳米氢氧化钙的装置,以CaCl2和NaOH作为沉淀反应物,聚乙二醇为改性剂,超声波为辅助振动,正丁醇共沸蒸馏法干燥分散制得纳米氢氧化钙粉体,将粉体与医用碘仿和甘油调制成适合临床根管治疗要求的根管充填糊剂,对其进行表征和葡萄糖微渗漏检测,观察纳米氢氧化钙的理化特性和生物功能性.结果 本实验搭建的制备装置自动化程度高,隔菌防尘,明显缩短制备时间,节省了人力和物力;本方法制备出具有明显氢氧化钙和聚乙二醇特征吸收波峰,粒径为100~200 nm,大小均匀,且分散的符合临床根管治疗充填材料基质要求的纳米氢氧化钙;纳米氢氧化钙根管充填糊剂能够显著防止微渗漏发生,在使用初期几乎没有微渗漏发生,随时间延长,微渗漏值增加并不明显.与临床上常规使用的氢氧化钙根充糊剂Vitapex比较,在相同时间段,其防止葡萄糖微渗漏值显著减小,在第28天,纳米氢氧化钙根充糊剂的葡萄糖微渗漏值为(2.09±0.89)mmol/L,显著低于Vitapex的(5.04±0.98)mmol/L(P<0.01).结论 本实验改良的制备装置科学合理,制备的粉体为纳米级、分散均匀的氢氧化钙,作为根充糊剂具有显著防止微渗漏的特性,其理化特性和生物功能性完全符合根管治疗充填材料基质的纳米氢氧化钙的要求.

目的:观察纳米氢氧化钙根充糊剂的溶血性及对根管微渗漏的影响.方法:自制纳米氢氧化钙根充糊剂后进行红细胞溶血性和葡萄糖微渗漏检测试验.红细胞溶血性试验是将实验分为阴性对照组(I组,0. 9％生理盐水,n=3)、阳性对照组(Ⅱ组,蒸馏水,n=3)和纳米氢氧化钙根充糊剂组(Ⅲ组,新制备的纳米氢氧化钙根充根糊制剂成浸提液,n=3),观察各组红细胞溶血反应,确定纳米氢氧化钙根充糊剂的溶血率,初步评价其生物安全性.葡萄糖微渗漏检测试验是选取60颗单根直管前磨牙,经根管预备后随机分为A、B、C、D四组,每组各15颗牙齿.A组使用牙胶尖与Vitapex的复合根充糊剂;B组用牙胶尖充填,不使用根管封闭剂;C组为含主要成分氢氧化钙的Vitapex根充糊剂;D组为纳米氢氧化钙根充糊剂.各组牙齿置于微渗漏检测模型中,分别在第1、2、4、7、14、21、28天用葡萄糖氧化酶法检测从冠方向根方漏出的葡萄糖的量.结果:Ⅲ组的血红蛋白相对值明显低于Ⅱ组(0. 05±0. 02 vs 0. 70±0. 08,P<0. 01),溶血率为4. 41％,显著小于医用植入材料要求红细胞溶血率≤5％的允许范围.在相同时间段,D组较C组的葡萄糖微渗漏值显著减小(第28天为2. 09±0. 89mmol/L vs 5. 04±0. 98mmol/L, P<0. 01).结论:本实验制备纳米氢氧化钙根充糊剂的溶血性及微渗漏均符合临床根管治疗要求.

目的:改良纳米氢氧化钙的制备方法并对其作为根管治疗糊剂的生物安全性进行初步评价.方法:以CaC12和NaOH为沉淀反应物,改良环节包括纳米氢氧化钙的制备系统,改性剂用聚乙二醇,加快反应速度为超声波振动,干燥分散纳米粉体为正丁醇共沸蒸馏干燥法.实验样品制得后分别选用红外线光谱仪、透射电子显微镜检测其组成成分和粒径大小,再将样品与医用碘仿和甘油调制成符合临床根管治疗要求糊剂,用扫描电子显微镜检测其形貌.后将实验分为阴性、阳性对照组和纳米氢氧化钙糊剂组,观察各组红细胞溶血反应及溶血率.结果:改良后制备装置自动化程度更高,操作更准确、安全,能防尘、隔菌,显著缩短制备时间,节省人力和能源,降低成本,制备的粉体颗粒更分散、均匀,不发生软硬团聚.样品由聚乙二醇和氢氧化钙组成,粒径大约在100～200 nm之间,呈球形和链球形.作为根管治疗糊剂,其表面致密、光滑,横截面积大、呈六方体结构,颗粒间隙小,排列紧凑、致密;与阳性对照组比较,纳米氢氧化钙糊剂组不引起溶血反应,其血红蛋白相对值明显低于阳性对照组(P＜0.01),溶血率为4.54％,显著小于医用植人材料要求红细胞溶血率≤5.结论:本实验改良方法科学合理,其表征为纳米级、分散均匀而无团聚的氢氧化钙,作为根管治疗糊剂初步证实具有生物安全性,值得在临床上推广和开发、具有广泛发展前途.

目的 体内研究0.1％纳米银溶液、氢氧化钙糊剂封药在Beagle犬慢性根尖周炎动物模型根管内的抑菌效果及对根尖周组织炎症刺激性的影响.方法 选取3只成年雄性Beagle犬的30颗双尖牙,拍摄锥形束CT(CBCT)确认构建慢性根尖周炎模型后按照冠向下预备法预备30颗双尖牙.将实验牙采用随机数字表法分为3组,每组10颗,分别封药0.1％纳米银溶液、氢氧化钙糊剂、空白对照(只冲洗,不封药).根管封药4周后再次拍摄CBCT,使用CBCT机自带软件DCTViewer 2.0测量术前、术后冠状面、矢状面视图中根尖透射影像面积;处死Beagle犬,取部分牙根及根尖周组织染色,在光学显微镜下测量根管壁的抑菌深度并观察根尖周组织的炎症程度.使用SPSS 24.0统计软件对实验数据进行统计分析.结果 0.1％纳米银溶液组、氢氧化钙糊剂组、空白对照组犬牙根尖周透射影像面积在冠状位分别减少(4.8±3.4)、(1.6±1.6)和(2.2±2.6)mm2,组间差异具有统计学意义(F=5.607,P=0.002),在矢状位分别减少(6.3±3.9)、(4.1±4.6)和(1.3±2.8)mm2,组间差异也有统计学意义(F=6.869,P<0.001);根管壁的抑菌深度分别为243(159,372)、123.5(90,134)和104.5(81,135)μm,组间差异有统计学意义(χ2=18.519,P<0.001);0.1％纳米银溶液组根尖周组织的炎症程度3例为0级、4例为1级、3例为2级,氢氧化钙糊剂组1例0级、5例1级、3例2级、1例3级,空白对照组1例0级、3例1级、4例2级、2例3级,组间差异无统计学意义(χ2=3.955,P=0.052).结论 0.1％纳米银溶液能够促进Beagle犬根尖周组织病变的愈合、抑制根管内细菌的生长,且对根尖周组织无明显炎症刺激性.

粪肠球菌近年来被证实与牙髓根尖周病的关系十分密切,是造成根管持续性或继发性感染和根管治疗失败的重要菌群之一.传统的根管消毒药物如次氯酸钠、氯己定、氢氧化钙等由于药物使用的浓度限制和根管系统自身的复杂性等,不能完全清除根管内的粪肠球菌,如何有效对抗根管内粪肠球菌的感染成为当前牙髓根尖周病治疗的重要研究方向之一.近年来,针对粪肠球菌的耐药性和致病性,出现了一些新型的消毒方法和抗菌剂,如激光、光动力疗法、超声荡洗和臭氧等,它们与传统根管冲洗药物联用能明显增强原传统药物对根管内粪肠球菌的清除能力.此外,二氧化氯、纳米氧化镁、超氧化水和N-乙酰半胱氨酸等新型消毒方式的出现,均证明对根管内粪肠球菌具有独特的杀伤作用.以上新型消毒方式的研究目前大多处于体外实验阶段,其对正常组织的刺激和损伤尚缺乏相关临床数据的支撑,有待于进一步的研究.

目的:研究0.1％纳米银溶液作为根管封药对犬根尖周病变愈合及根尖周组织刺激性的影响.方法:将3只Beagle犬的30颗双尖牙,构建慢性根尖周炎模型后进行根管预备,之后随机分为3组,分别封0.1％纳米银溶液、氢氧化钙糊剂、不封药.根管封药4周后,处死Beagle犬取根尖周组织,RT-PCR检测IL-6的表达.根管预备前和根管封药4周后均拍摄CBCT,利用软件Mimics 21重建术前、术后根尖周组织破坏情况并测量其体积.结果:0.1％纳米银溶液、氢氧化钙封药后根尖周阴影体积与术前相比均缩小(分别为P<0.01和P<0.05),而空白对照组治疗前后差异无统计学意义(P=0.05);0.1％纳米银溶液、氢氧化钙的组的IL-6 mRNA相对表达量与空白对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05).结论:0.1％纳米银溶液能有效促进慢性根尖周炎根尖周组织的愈合,对根尖周组织无明显炎症刺激性.

目的:探讨0.1％纳米银溶液用于根管封药对慢性根尖周炎大鼠RORγT、IL-17、Foxp3表达的影响.方法:对40只雄性大鼠双侧下颌第一磨牙开髓建立根尖周炎模型,术后2周处死4只大鼠用RVG+HE判断造模成功,将剩余36只大鼠随机均分为空白对照组(K组),氢氧化钙组(Q组)及0.1％纳米银溶液组(N组).于用药后7、14、21 d各组随机处死4只大鼠,免疫组织化学检测Foxp3表达,qRT-PCR检测RORγT、IL-17的表达.结果:免疫组化显示3组于用药7、14、21 d时Foxp3表达呈逐渐上升趋势,N、Q组均高于K组(P<0.05).qRT-PCR显示,N组RORγT、IL-17表达在14、21 d均低于K组(P<0.05),21 d时,N较Q组IL-17表达无差异(P>0.05),RORγT表达有差异(P<0.05).结论:0.1％纳米银溶液用于根管封药效果好,可降低RORγT、IL-17水平,促进Foxp3的表达.

根管治疗是处理牙髓根尖周病的常规方法，其中根管封药是感染根管治疗过程中的重要步骤，通过将根管消毒药物充填于根管内，起到抑菌、促进修复和防止再感染的作用。目前，临床常用于根管封药的氢氧化钙、氯己定及抗生素制剂难以达到有效性及安全性的理想预期。近年来，分子生物学和纳米科技的进步推动了以抗菌肽、纳米颗粒为代表的新型抗菌药物的发展。本文对目前临床根管封药的常用药物及研究进展加以总结，并讨论根管药物消毒的发展趋势。