目的:制备含锂生物玻璃(Li/BGs)纳米材料，并探讨其对大鼠心肌样细胞(H9C2)和人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)的生物相容性。方法:采用溶胶-凝胶法，将0.7 g十六烷基三甲基溴化铵、10 ml乙酸乙酯、7 ml 1 mol/L氨水、3.6 ml正硅酸四乙酯、3.57 g四水硝酸钙和0.37 g碳酸锂反应至少4 h，制备Li/BGs。扫描电子显微镜(SEM)观察Li/BGs纳米颗粒的尺寸和形态。H9C2和HUVECs分别置于10~1 000 μg/ml浓度的Li/BGs培养基中，细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞毒性实验(450 nm吸光度值)评估细胞活性。细胞在10 μg/ml浓度的Li/BGs溶液中培养24 h后，采用鬼笔环肽染色法(Phalloidin)和4’，6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色，观察细胞核(蓝色)和细胞骨架蛋白(红色)的共聚焦显微镜图像，评估Li/BGs对细胞形态的影响。组间比较采用单因素方差分析分析数据统计学差异。结果:SEM观察显示，制备的Li/BGs颗粒近球形，粗糙且均匀，直径(82.86±14.28) nm。H9C2经钙黄绿素乙酰氧基甲酯/碘化丙啶(Calcein AM/PI)染色后，大部分细胞展现出活跃状态，未出现细胞的明显死亡。在细胞毒性试验中，250 μg/ml组、500 μg/ml组及1 000 μg/ml组低于H9C2对照组(0.287±0.005、0.317±0.009、0.347±0.025比0.825±0.188， F＝24.72， P<0.001)。Li/BGs处理HUVECs后250 μg/ml组、500 μg/ml组及1 000 μg/ml组低于HUVECs对照组(0.289±0.003、0.320±0.013、0.354±0.021比1.026±0.027， F＝34.44， P<0.001)。Phalloidin和DAPI染色显示两种细胞的Li/BGs组与对照组比较，Li/BGs组细胞骨架保持正常的形状和结构，未出现断裂、异常凝聚或形状改变等现象。 结论:Li/BGs对细胞的形态和结构无明显影响，具有良好的生物相容性。

目的:评估一种新型纳米神经营养因子复合物(NP-CNTFs)在非人灵长类动物眼内应用的安全性。方法:利用纳米工艺制备包裹睫状神经营养因子(CNTF)的纳米粒。选取3只成年雄性食蟹猴，单眼玻璃体腔注射10 μl NP-CNTFs(1 μg/μl)作为NP-CNTFs组，对侧眼注射等体积磷酸盐缓冲液作为对照组。在注射前、注射后第3天和第7天，对食蟹猴行常规眼前节检查以评估结膜充血、前房闪辉及前房细胞等眼部症状并评分；采用彩色眼底照相观察眼底情况；采用频域光学相干断层扫描(SD-OCT)检测视网膜形态结构及厚度。结果:所制备NP-CNTFs粒径为(317±3)nm，多分散性指数为0.042±0.015，Zeta电位为(－38.9±0.7)mV，具备较好的稳定性、生物利用度和生物相容性。眼前节检查显示，NP-CNTFs组在注射后第3天表现出较对照组稍明显的结膜充血、前房闪辉和前房细胞，但在注射后第7天基本恢复正常。NP-CNTFs组与对照组注射后第3天眼前节症状评分分别为(2.67±0.88)和(1.00±0.58)分，注射后第7天分别为(0.67±0.33)和(0.33±0.33)分，组间比较差异均无统计学意义( t＝2.50、1.00，均 P>0.05)。彩色眼底照相结果显示，NP-CNTFs组和对照组在注射后第7天眼底均正常，未见玻璃体混浊、玻璃体出血、视网膜出血或视盘水肿等异常改变。SD-OCT结果显示，NP-CNTFs组和对照组在注射后第7天均未见明显视网膜组织学改变。NP-CNTFs组和对照组视网膜神经纤维层厚度分别为(107.67±0.88)和(111.00±3.22)μm，黄斑中央凹厚度分别为(255.67±2.03)和(254.67±3.84)μm，组间比较差异均无统计学意义( t＝1.43、0.50，均 P>0.05)。 结论:新型纳米药物NP-CTNFs在食蟹猴眼内应用的安全性较好。

目的:初步探讨改性纳米生物玻璃水凝胶的制备以及它的理化、生物学特性。方法:(1)取400 mL氢氧化钙饱和溶液，加入纳米二氧化硅悬液67 mL，制备纳米生物玻璃悬液，观察其悬浮稳定性。(2)制备终质量分数为10%明胶、1%海藻酸钠的水凝胶，设为对照组；在对照组水凝胶基础上加入实验(1)制备的纳米生物玻璃悬液，制备终质量分数为0.5%生物玻璃、10%明胶、1%海藻酸钠的水凝胶，设为实验组。观察2组水凝胶在4、25 ℃的成胶情况并记录成胶时间及在37 ℃的熔解情况并记录熔胶时间。另取2组水凝胶，4 ℃冷浴后用25 g/L的氯化钙溶液交联，用杨氏模量测定仪测量压缩模量。另取2组水凝胶，同前交联后于-20 ℃冻干，测量相关体积并计算孔隙率。样本数均为3。(3)取12只24 h龄C57BL/6J小鼠乳鼠，分离培养成纤维细胞(Fb)，倒置显微镜下观察其形态，并培养第3代Fb，用于后续实验。取Fb，制备细胞浓度为1×10 5个/mL的单细胞悬液，按随机数字表法(下同)分为实验组和对照组，分别加入实验(2)制备的实验组和对照组液态水凝胶，培养12、24、48 h，每组各取3孔，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞存活率。(4)取第3代Fb，制备细胞浓度为(3.0～4.5)×10 7个/mL的单细胞悬液，分为实验组和对照组，每组1管，加入绿色荧光探针DIO染色，分别加入实验(2)中制备的实验组和对照组液态水凝胶9 mL，同前交联后制备载细胞水凝胶。培养3 d，激光共聚焦显微镜下观察细胞在凝胶中的存活情况；同前制备载细胞水凝胶块但不加绿色荧光探针DIO，培养7 d，在扫描电子显微镜下观察细胞在水凝胶中的黏附及伸展情况。(5)取6周龄雌性BALB/c-nu裸鼠12只，分为实验组和对照组，每组6只，在背部制作直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面，伤后即刻，分别放入1块实验(4)制备的实验组和对照组载细胞水凝胶块。伤后7、14 d，每组取3只裸鼠，收集创面及创周组织，苏木精-伊红染色，观察创面愈合情况。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)纳米生物玻璃粒子可在水中均匀分散，具有良好的悬浮稳定性。(2)2组水凝胶在37 ℃下均呈熔融状态，均未见粒子析出。实验组和对照组水凝胶在37 ℃下的熔胶时间分别为5、10 min，在25 ℃下成胶时间分别为30、180 min，在4 ℃下成胶时间分别为5、10 min。实验组水凝胶压缩模量为(53±6)kPa，明显高于对照组的(23±6)kPa( t＝6.364， P<0.01)。实验组水凝胶孔隙率为(86.1±2.1)%，与对照组的(88.2±4.4)%相近( t＝1.210， P>0.05)。(3)细胞呈长梭形，细胞核所占比例较大，符合Fb形态学特征。培养12、24、48 h，实验组细胞存活率为(84±4)%、(89±4)%、(130±10)%，与对照组的(89±5)%、(90±4)%和(130±11)%相近( t＝1.534、0.611、0.148， P>0.05)。(4)培养3 d，2组细胞在水凝胶中形态完整，未见细胞核裂解、消失，细胞质保持完好，并且实验组细胞荧光强度明显强于对照组。培养7 d，实验组和对照组细胞在水凝胶中黏附、伸展，且实验组细胞在水凝胶中黏附数明显多于对照组。(5)伤后7 d，对照组、实验组裸鼠创面面积均缩小，且实验组减小更明显，2组裸鼠创面及创周均可见大量炎症细胞分布。伤后14 d，对照组裸鼠创面面积大于实验组，且创面及创周炎症细胞明显多于实验组。 结论:纳米生物玻璃水凝胶具有良好的理化、生物学特性和载细胞潜能，同时还具有促创面愈合能力，在临床应用方面有着较好的潜力。

目的:测试连续电纺纳米纤维材料所生产的医用纱布的组织相容性和可降解性。方法:分别将纳米纤维纱布与普通医疗纱布种植于Sprague-Dawley（SD）大鼠的背部皮下组织及腹膜下，以观察SD大鼠创面的痊愈时间、创面痊愈状况，以及组织中炎症反应状况和有机纤维的降解状况。结果:植入了纳米纤维纱布和普通纱布填塞物大鼠的创面痊愈程度分别为甲级和乙级。在术后的第3天，对皮下取材和组织进行苏木精-伊红染色，结果表明：普通纱布的皮下组织结构已开始与黏膜、脂肪进行结合，其与组织并没有很好地结合；而纳米纤维纱布则是轮廓上清晰可见，一整片纱布单独存在，并不能与其他黏膜结合，且以纱布为核心的结构中出现了很密的细胞。同样，在HE染色结果中，普通纱布组表明玻璃纤维比较粗大，结构较稀疏，生物相容性不良，而纳米玻璃纤维的纱布组表明玻璃纤维和组织之间已成为比较紧密的结构。免疫组化结果表明在普通纱布的纤维组织中巨噬细胞染料为明显阳性，仍然有慢性炎症反应，而在纳米纤维纱布中巨噬细胞染料阳性但不明显，组织依然生长致密。结论:与传统的医用纱布比较，纳米纤维纱布具有较好的相容性和可降解性。

碳点是一种新型荧光碳纳米材料,直径一般小于10 nm,具有自发荧光、高生物组织相容性、易于修饰、成本低廉等优点,在生物医学领域拥有广阔的应用前景.眼球因其独特的屏障结构,常规药物停留时间短、穿透性差,通过局部滴眼到达病灶的药物浓度有限,需要增加给药频次以保持药效.另外,糖尿病性黄斑水肿(diabetic macular edema,DME)、脉络膜新生血管(diabetic macular edema,CNV)等疾病的治疗给药则需依赖于玻璃体腔注射,该方法属于有创操作,有引起潜在并发症的可能,且需多次注射,给患者造成了沉重的心理和经济负担.优化眼部给药方法一直是眼科学领域的研究热点.基于碳点的优异特性,碳点在眼部药物递送、眼部成像、眼疾病诊疗中已展现出优秀的应用潜力.本综述将综合介绍碳点的特点及近十年来碳点在眼科疾病诊疗中的研究进展,旨在提供关于碳点在眼科应用现状的系统性认识,为未来研究提供方向.

目的 (1)探究锂基生物玻璃水凝胶,赋予介孔生物玻璃材料促成骨、促血管生成和抑制脂肪生成等多重生物医学功能.(2)利用3D打印技术制作导航模板,精确定位股骨头坏死病灶区域和清除病灶,将锂基生物玻璃水凝胶精确注入,观察其修复股骨头坏死的作用.方法 利用明胶和甲基丙烯酸酐制备了甲基丙烯酰化明胶(gelatin methacryloyl,GelMA)及锂基生物玻璃水凝胶(GelMA and Li-mesoporous bioglass,GM/M-Li).扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)对材料进行表征分析;同时,通过细胞活/死染色、细胞增殖实验(cell counting kit-8,CCK-8)及细胞形态观察评估材料的生物相容性;另外,使用免疫荧光染色、碱性磷酸酯酶染色、茜素红染色、成血管实验、油红O染色评估材料的成骨分化能力、成血管能力和抑制脂肪生成的能力.体内成功建立了兔股骨头坏死模型,利用3D导航模板联合髓芯减压术将坏死骨去除后填充GM/M-Li水凝胶.通过苏木素伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、油红O染色、免疫组化染色验证其成骨、成血管和抑制脂肪生成能力.结果 SEM结果显示GM/M-Li水凝胶材料为三维多孔的结构;TEM结果表明,M-Li材料为纳米级别;离子释放实验证明了 GM/M-Li水凝胶中的锂元素,同时具有缓释作用;细胞活/死染色、CCK-8证明了 GM/M-Li水凝胶材料具有良好的生物相容性;体外成骨、成血管、抑制脂肪生成实验证实,材料中锂离子的释放有利于骨髓间充质干细胞的成骨分化、人脐静脉血管内皮细胞的小管形成,抑制了脂肪前体细胞的脂肪形成.体内HE染色和免疫荧光验证了 GM/M-Li水凝胶有效促进了骨组织、血管再生;通过油红O染色验证了 GM/M-Li水凝胶的抑制脂肪能力.结论 利用3D打印技术制作导航模板,将GM/M-Li精确注入股骨头坏死病灶区域和清除病灶.因GM/M-Li水凝胶具有良好的生物相容性,其可通过调节骨髓间充质干细胞成骨方向分化,促进股骨头坏死中骨缺损的重建,同时促进了血管的生成,减少脂肪细胞的浸润.

背景:在构建具有生物功能的引导骨再生膜时,单一材料因功能不足而无法满足临床上的需要,因此将多种材料复合已成为目前组织修复工程的一种趋势.目的:通过静电纺丝技术制备丝素蛋白/生物活性玻璃复合纤维膜,表征其理化性能和体外生物相容性.方法:将0.8 g丝素蛋白溶解于10 mL六氟异丙醇中制备静电纺丝溶液,利用静电纺丝技术制备丝素蛋白纳米纤维膜(记为SF纤维膜);将0.1,0.3,0.5,0.8 g的生物活性玻璃分别加入静电纺丝溶液中,利用静电纺丝技术制备丝素蛋白/生物活性玻璃复合纤维膜(依次记为SF/1BG、SF/3BG、SF/5BG、SF/8BG纤维膜).表征5组纤维膜的理化性能及生物相容性.结果与结论:①扫描电镜下可见5组纤维表面光滑、连续且均匀,无串珠样结构,丝纤维之间无明显粘连,均表现出随机排布的无序多孔结构,添加生物活性玻璃后纤维膜的纤维直径减小.傅里叶红外光谱与X射线衍射检测显示,纤维膜中丝素蛋白与生物活性玻璃的化学结构稳定.SF、SF/1BG、SF/3BG、SF/5BG、SF/8BG纤维膜表面的水接触角分别为105.02°,72.58°,78.13°,79.35°,72.50°.②将骨髓间充质干细胞分别接种于5组纤维膜上,CCK-8检测显示相较于SF、SF/8BG纤维膜,SF/1BG、SF/3BG、SF/5BG纤维膜可促进骨髓间充质干细胞的增殖;活/死细胞染色显示5组纤维膜表面的细胞活力较好,其中SF/5BG纤维膜表面的细胞数量更多、分布更均匀;罗丹明-鬼笔环肽染色与扫描电镜观察显示相较于SF纤维膜,SF/5BG纤维膜更有利于骨髓间充质干细胞的黏附.将骨髓间充质干细胞分别接种于5组纤维膜上进行成骨诱导分化,SF/3BG、SF/5BG组碱性磷酸酶活性高于其他3组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);茜素红染色显示,添加生物活性玻璃后纤维膜的钙结节形成增加,并且以SF/5BG组钙结节形成最多.③结果表明,丝素蛋白/生物活性玻璃复合纤维膜具有良好的生物安全性和生物相容性.

目的 研制一种综合性能优异的仿生鱼胶原复合膜,探讨其作为引导牙周/骨组织再生(GTR/GBR)膜的生物学潜能.方法 制备一种新型仿生静电纺鱼胶原/生物玻璃/壳聚糖(Col/BG/CS)复合纳米纤维膜,分别研究复合膜的结构、性能、抗菌性及其诱导人牙周膜韧带细胞(HPDLCs)的生物学效应.结果 复合膜具有仿生结构和一定的力学强度.相比单纯的鱼胶原膜,复合膜对变形链球菌显示出一定的抑菌效果.复合膜被证明能明显促进HPDLCs的粘附、增殖成骨分化以及RUNX-2,OPN蛋白的表达.结论 本研究首次开发一种具有主动诱导牙周组织再生能力并兼有一定抗菌性的多功能仿生鱼Col/BG/CS复合纳米纤维膜,为其作为GTR/GBR膜的应用提供可能.

背景:由于金银双金属纳米粒子较强的催化活性及选择性催化氧化的特性,在生物医学、药物传递、电化学分析等方面存在潜在的广泛应用.目的:以动物细胞中线粒体为模板,制备金银合金纳米粒子.方法:从鱼肝中分离线粒体;在1 mL偏碱性HAuCl4溶液(10 mmol/L)中加入1 mL线粒体母液,摇匀,加入1 mL AgNO3溶液(10 mmol/L),室温条件下在电磁搅拌器上反应20-30 h,观察反应液颜色从无色逐渐变为紫色,即得金银合金纳米粒子,对其进行表征.①细胞毒性实验:将不同质量浓度(0,25,50,75, 100,125,150 mg/L)的金银合金纳米粒子加入到胃癌细胞中,培养48 h后,MTT法检测细胞增殖A值;②安全稳定性实验:将1 mL不同质量浓度(0,25,50,75,100,125,150 mg/L)的金银合金纳米粒子溶液置于玻璃反应瓶中,将0.2 mL超纯水分次加入到纳米粒子溶液中,左右震荡摇匀;当加入超纯水后,使用紫外-可见光谱对溶液进行表征.结果与结论:①金银合金纳米粒子为合金结构,平均粒径20-30 nm,基本为球形分布,粒度较均一,结晶度较好,结构单一,表面存在羟基、羰基等活性基团;②MTT实验表明在150 mg/L质量浓度范围内,金银纳米粒子无明显的细胞毒性;③随着金银合金纳米粒子质量浓度的变化,强度最大的特征吸收峰与金银合金纳米颗粒的含量基本呈正相关;④结果表明,金银合金纳米粒子具有良好的细胞相容性及体外稳定性.

目的 将纳米级生物活性玻璃脱敏剂用于漂白治疗前的离体牙,观察比较未使用脱敏剂和分别用涂抹法和透明托盘法使用生物活性玻璃脱敏剂后牙髓腔内过氧化氢渗透量的多少.方法 48颗离体第一前磨牙分成6组,A组不做脱敏处理,牙冠倒置,冠部分浸泡于去离子水中30 min,B组表面不做脱敏处理,牙冠倒置于30%过氧化氢溶液中30 min,C组生物活性玻璃涂抹2 min,2次/d,浸没于人工唾液24 h后,牙冠倒置于30%过氧化氢溶液中,D组使用透明托盘+生物活性玻璃1 h,浸没于人工唾液24 h后,牙冠倒置于30%过氧化氢溶液30 min,E组生物活性玻璃涂抹2 min,2次/d,浸没于人工唾液24 h后,牙冠倒置于去离子水中30 min,F组使用透明托盘+生物活性玻璃1 h,浸没于人工唾液24 h后,牙冠倒置浸泡于去离子水中30 min,提取各组髓腔内液体,检测各组的吸光度,并换算成过氧化氢的总量.结果 6组髓腔内液过氧化氢含量分别为A组0 μg,B组21.149 μg±0.489 μg,C组9.813 μg±0.426 μg,D组4.065 μg±0.268 μg,E组0 μg,F组0 μg,单因素方差分析表明,B、C、D组髓腔内的过氧化氢含量有差异,差异有统计学意义(F=459.748,P<0.05),B组>C组>D组.结论 生物活性玻璃脱敏剂结合透明托盘的使用可以有效减少过氧化氢渗透进牙髓腔的量,降低过氧化氢对牙髓组织产生的有害影响.