目的:探讨负载银和重组人碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF）的甲基丙烯酸酐化明胶（GelMA）水凝胶对兔深Ⅱ度烧伤创面的影响。方法:采用实验研究方法。制备含不同浓度甲基丙烯酸酐（MA）的低浓度MA明胶（GelMA）材料、中浓度GelMA材料和高浓度GelMA材料，加入光引发剂后分别制得低浓度GelMA水凝胶、中浓度GelMA水凝胶和高浓度GelMA水凝胶。采用核磁共振波谱仪检测前述3种浓度GelMA材料的氢核磁共振谱并根据波谱图计算其取代度，采用场发射扫描电子显微镜（FESEM）检测前述3种浓度GelMA水凝胶的三维微观结构及孔径，样本数均为9。根据前述筛选出的MA浓度合成含10种浓度银的GelMA（含银GelMA）溶液，将每种浓度的含银GelMA溶液均分为3份，加入光引发剂后分别暴露于紫外光下持续20、25、35 s，制得相应的含银GelMA水凝胶。采用胶原酶降解法测定不同光交联时间含银GelMA水凝胶降解12、24、36、48 h的降解剩余率及彻底降解所需时长，样本数为5。测定前述筛选出光交联时间下含10种浓度银GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径反映其抑菌能力，样本数均为5。以与含最低浓度银（即不含银）GelMA水凝胶抑菌圈直径相比有统计学意义的含银GelMA水凝胶为有抑菌活性。选取具有抑菌活性的且载药浓度最低的含银GelMA水凝胶，采用FESEM检测其三维微观结构及孔径，采用能谱仪检测其内部银元素的存在情况，样本数均为9。将冻干单纯GelMA水凝胶和冻干含银GelMA水凝胶分别浸没于磷酸盐缓冲液中24 h，通过称重法计算并比较2种水凝胶的溶胀率，样本数为5。根据预实验及前述实验结果，制备含银和rh-bFGF的GelMA水凝胶（简称复合水凝胶）。大体观察复合水凝胶的外观，并采用FESEM检测其三维微观结构与孔径。取30只4~6个月龄、雌雄各半日本大耳兔，在其背部制作深Ⅱ度烧伤创面。以兔头侧为基准，将脊柱左侧创面作为复合水凝胶治疗组，右侧作为纱布对照组，2组创面分别作相应处理。观察伤后3、7、14、21、28 d创面愈合情况；记录伤后7、14、21、28 d创面愈合面积并计算其愈合率，样本数为30。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、独立样本 t检验。 结果:低浓度GelMA材料、中浓度GelMA材料及高浓度GelMA材料的取代度，差异明显（ F=1 628.00， P<0.01）。低浓度GelMA水凝胶存在疏松、不规则三维空间网状结构，孔径为（60±17）μm；中浓度GelMA水凝胶的三维空间网络、孔径大小均较均匀规则，孔径为（45±13）μm；高浓度GelMA水凝胶的三维空间网状结构致密、层次混乱，孔径为（25±15）μm。3种GelMA水凝胶孔径大小差异有统计学意义（ F=12.20， P<0.01），选取（MA）中浓度为后续材料制作浓度。相同光交联时间下的含不同浓度银GelMA水凝胶的降解性基本一致；20、25、35 s光交联时间下含银GelMA水凝胶降解12 h的降解剩余率分别为（74.2±1.7）%、（85.3±0.9）%、（93.2±1.2）%，降解24 h的降解剩余率分别为（58.3±2.1）%、（65.2±1.8）%、（81.4±2.6）%，降解36 h的降解剩余率分别为（22.4±1.9）%、（45.2±1.7）%、（68.1±1.4）%，降解48 h的降解剩余率分别为（8.2±1.7）%、（32.4±1.3）%、（54.3±2.2）%；20、25、30 s光交联时间下含银GelMA水凝胶彻底降解所需时间分别为（50.2±2.4）、（62.4±1.4）、（72.2±3.2）h，差异有统计学意义（ F=182.40， P<0.01），选取25 s作为后续光交联时间。低浓度至高浓度的10种含银GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径依次为（2.6±0.4）、（2.5±0.4）、（3.2±0.4）、（12.1±0.7）、（14.8±0.7）、（15.1±0.5）、（16.2±0.6）、（16.7±0.5）、（16.7±0.4）、（16.7±0.6）mm，基本呈浓度依赖性升高趋势，总体比较差异有统计学意义（ F=428.70， P<0.01），与含最低浓度银GelMA水凝胶相比，其他有抑菌活性的含低浓度至高浓度银GelMA水凝胶的抑菌圈直径均明显增大（ t值分别为26.35、33.84、43.65、42.17、49.24、55.74、43.72， P<0.01）。对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为（12.1±0.7）mm的含银GelMA水凝胶具有抑菌活性且载药浓度最低，选取该含银浓度为后续材料制作浓度。含银GelMA水凝胶的微观形貌为规律的趋于平行线性的条索状结构，孔径为（45±13）μm，且含有银元素。浸没24 h，含银GelMA水凝胶的溶胀率与单纯GelMA水凝胶相近（ P>0.05）。复合水凝胶呈无色清亮透明状；其三维结构为规则、均匀的网格状，内部存在细丝网状结构，孔径为（40±21）μm。伤后3 d，复合水凝胶组兔创面可见大量坏死组织及渗出物；纱布对照组兔创面可见散在结痂，亦可见少量坏死组织及渗出物。伤后7 d，复合水凝胶组兔创面已明显缩小，纱布对照组兔出现创面存在与纱布粘连情况。伤后14 d，复合水凝胶组兔创面红润、可见肉芽组织生长；纱布对照组兔创面基底呈苍白色、血运差。伤后21 d，复合水凝胶组兔创面完全愈合，纱布对照组兔创面出现愈合趋势。伤后28 d，复合水凝胶组兔创面部位可见新生毛发，纱布对照组兔仍残存椭圆形创面。伤后7、14、21、28 d，复合水凝胶组兔创面愈合率均明显大于纱布对照组（ t值分别为2.24、4.43、7.67、7.69， P<0.05或 P<0.01）。 结论:中浓度GelMA水凝胶在溶胀性、可降解性方面具有良好的理化特性，筛选出的含银GelMA水凝胶具有抑菌活性且载药浓度最低，制得的复合水凝胶可明显缩短兔深Ⅱ度烧伤创面愈合时间。

目的:聚乳酸（PLA）静电纺丝纤维与真皮脱细胞基质（ADM）结合制备适宜伤口愈合的敷料。方法:利用静电纺丝工艺制备不同质量浓度（10%、12%、14%）的聚乳酸（PLA）纤维膜，筛选出最佳浓度后测定一系列生物学性能。采用4%过氧化氢-6%氢氧化钠溶液浸泡法制备兔ADM，评价脱细胞程度。将纤维膜在质量浓度为5%的ADM溶液中孵育24 h，经干燥、辐照灭菌制成负载ADM的PLA纤维膜，评价生物相容性。动物实验：在新西兰兔背部皮肤制造急性创面研究纤维膜促进创面愈合的效果。结果:12%浓度PLA纤维膜性能最佳，平均孔隙率79.37%，纤维直径分布主要范围为0.4～1.0 μm，平均吸水率为550.484%，最大拉伸强度可达5.74 MPa，完全培养基孵育12周失重率为12.47%。制备的ADM无细胞残留，DNA残留量（47.528±0.419） ng/mg，与未脱细胞真皮比较，DNA去除率高达96.01%，脱细胞效果良好，差异有统计学意义（ t＝47.750， P<0.01）。细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测脂肪干细胞增殖能力，48 h复合纤维膜浸提液培养吸光度值（1.121±0.013）与完全培养基培养吸光度值（0.934±0.043）比较，差异有统计学意义（ t＝7.181， P<0.01），说明复合纤维膜生物相容性良好。且动物实验复合纤维膜覆盖创面收缩速度最快，14 d时复合纤维膜组相对伤口面积分别与PLA组、ADM组、纱布对照组比较，差异有统计学意义（ t＝5.908、15.540、23.640， P<0.01）。 结论:本研究制备负载ADM的PLA纤维膜性能良好，可促进兔表皮急性创面修复。

目的:测试连续电纺纳米纤维材料所生产的医用纱布的组织相容性和可降解性。方法:分别将纳米纤维纱布与普通医疗纱布种植于Sprague-Dawley（SD）大鼠的背部皮下组织及腹膜下，以观察SD大鼠创面的痊愈时间、创面痊愈状况，以及组织中炎症反应状况和有机纤维的降解状况。结果:植入了纳米纤维纱布和普通纱布填塞物大鼠的创面痊愈程度分别为甲级和乙级。在术后的第3天，对皮下取材和组织进行苏木精-伊红染色，结果表明：普通纱布的皮下组织结构已开始与黏膜、脂肪进行结合，其与组织并没有很好地结合；而纳米纤维纱布则是轮廓上清晰可见，一整片纱布单独存在，并不能与其他黏膜结合，且以纱布为核心的结构中出现了很密的细胞。同样，在HE染色结果中，普通纱布组表明玻璃纤维比较粗大，结构较稀疏，生物相容性不良，而纳米玻璃纤维的纱布组表明玻璃纤维和组织之间已成为比较紧密的结构。免疫组化结果表明在普通纱布的纤维组织中巨噬细胞染料为明显阳性，仍然有慢性炎症反应，而在纳米纤维纱布中巨噬细胞染料阳性但不明显，组织依然生长致密。结论:与传统的医用纱布比较，纳米纤维纱布具有较好的相容性和可降解性。

目的:探讨纳米静电纺丝纤维对糖尿病小鼠模型创面愈合的影响.方法:构建糖尿病小鼠创面模型,观察组使用电纺纳米纤维包扎创面,对照组使用涂药纱布包扎创面,自愈组不做处理.比较 3 组小鼠创面愈合情况并计算创面愈合率;qRT-PCR法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6 和肿瘤坏死因子α水平;Western blotting法检测小鼠创面组织表皮生长因子、表皮生长因子受体、缺氧诱导因子-1α、增殖细胞核抗原蛋白表达水平.CCK-8 和划痕实验明确静电纺丝对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响.结果:与对照组和自愈组比较,观察组小鼠创面愈合率提高,炎症细胞因子表达降低,表皮生长因子及受体水平升高(P＜0.05～P＜0.01).采用纳米静电纺丝纤维处理后,人脐静脉内皮细胞迁移和增殖能力增强(P＜0.05 和P＜0.01),凋亡率降低(P＜0.05).结论:纳米静电纺丝纤维可改善糖尿病创面愈合情况,具有潜在的临床应用价值.

目的 评价头花蓼纳米纤维功能敷料(P-PVP-PCL)的药效.方法 利用静电纺丝技术制备P-PVP-PCL,观察其微观形貌;考察P-PVP-PCL的抑菌活性、抗氧化活性和对小鼠成纤维L929细胞存活率、黏附性及迁移率的影响.通过建立大鼠背部皮肤伤口模型,考察医用纱布敷料、空白纳米纤维敷料(PVP-PCL)和P-PVP-PCL对创面愈合率的影响,观察创面组织病变和胶原纤维沉积情况,以及创面组织中血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)阳性血管数量和转化生长因子β(TGF-β)蛋白表达.结果 制得的P-PVP-PCL表面光滑,断面处可见双层结构,对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑制率分别为(98.88±0.66)%、(94.75±1.41)%,抗氧化活性为(83.69±1.56)%,且P-PVP-PCL组的细胞活性均显著高于对照组和PVP-PCL组(P＜0.05).与医用纱布敷料相比,P-PVP-PCL更有利于L929细胞黏附;在48 h时,该组的细胞划痕已基本愈合.与医用纱布敷料组比较,PVP-PCL组和P-PVP-PCL组的大鼠创面愈合率均显著升高(P＜0.05).干预第14天时,P-PVP-PCL组创面已基本愈合,创面组织中胶原纤维排列相对整齐、密度相对均匀;CD31阳性血管数量和TGF-β蛋白表达与干预第7天比较有下降趋势,其中CD31阳性血管数量显著低于医用纱布敷料组和PVP-PCL组(P＜0.05),TGF-β蛋白表达显著高于医用纱布敷料组和PVP-PCL组(P＜0.05).结论 P-PVP-PCL在体外具有良好的抗菌和抗氧化活性,能够促进L929细胞的增殖、黏附和迁移;在体内能够促进大鼠伤口愈合.

目的:在纱布表面通过原位还原法制备槲皮素-纳米银复合抗菌涂层,并探究其抗菌效率及生物相容性.方法:利用槲皮素易溶于碱难溶于酸的特性,通过碱酸重析出的方法在纱布表面形成均匀的非晶包裹层,将其浸入硝酸银溶液中,制备出槲皮素-纳米银复合抗菌纱布.扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM)观察样品表面形貌、X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectroscopy,XPS)分析表面元素组成、能量散布分析仪(Energy Dispersive Spectrometer,EDS)分析样品表面元素分布情况,琼脂平面扩散法试验、吸收法实验评价抗菌性能;通过CCK-8法评价(Cell Counting Kit-8)细胞毒性;利用结晶紫染色法在显微镜下观察细胞的数目形态.结果:SEM显示槲皮素-纳米银复合抗菌纱布组(Cotton gauze-quercetin/Ag group,CG-Q/Ag组)纱布表面形成光滑槲皮素包裹层,在槲皮素包裹层表面通过原位还原反应成功搭载了纳米银颗粒,EDS检测显示CG-Q/Ag组纳米银成功搭载在纱布纤维表面并且均匀分布;抗菌结果显示琼脂平面扩散法试验中CG-Q/Ag0.s、CG-Q/Ag0.1组周围有透亮的抑菌环,吸收法实验中CG-Q/Ag0.5、CG-Q/Ag0.1抑菌率＞95％优于其余各组,且差异具有统计学意义(P＜0.05);CCK-8实验中显示CG-Q/Ag0.5具有良好的生物相容性;结论:槲皮素-纳米银复合抗菌纱布在实现有效抑菌能力时还具备良好的生物相容性,碱酸重析出法构建槲皮素非晶包裹层并且原位还原生成银纳米颗粒的策略为纱布载银改性提供了 一种新的技术路线.

背景:目前市场上医用伤口敷料种类繁多,不同伤口敷料也各有优劣.有大量研究已证实细菌纤维素作为伤口敷料的可行性,但未见其与其他敷料在促进伤口愈合中的对比研究报道.目的:通过与干性纱布敷料和水胶体辅料的对比,研究细菌纤维素敷料(BC-HEC-1)在促进大鼠伤口愈合中的优势.方法:采用木葡糖酸醋杆菌浅盘发酵得到细菌纤维素膜,对该纤维素膜进行一系列的后处理步骤得到无菌的BC-HEC-1,对其细胞毒性、含水量及pH值进行检测,红外图谱和扫描电子显微镜进行鉴定.采用SD大鼠进行动物实验,手术制造2 cmx2 cm皮肤伤口,随机分为3组:①纱布组采用传统的无菌纱布进行包扎,并用黏性无纺布固定;②水胶体敷料组采用市售的水胶体敷料包扎;③BC-HEC-1敷料组采用自制细菌纤维素敷料进行包扎,并用黏性无纺布进行固定.术后每日更换敷料,隔日测量1次伤口长度和宽度,计算伤口面积和伤口愈合率,并于术后第4,7,14,21天分别取动物的伤口皮肤制作病理切片,检测血清中转化生长因子β1和血小板源性生长因子水平.结果与结论:①制备的细菌纤维素无细胞毒性,含水量95％-98％,pH值=6.5,红外扫描图谱与标准细菌纤维素一致,扫描电镜图谱显示BC-HEC-1为纳米级细菌纤维素材料;②动物实验中,水胶体敷料组和BC-HEC-1敷料组动物伤口保湿和防粘连效果要明显均优于传统的干性无菌纱布敷料,伤口面积较小;BC-HEC-1敷料组在术后第4-14天的伤口愈合率均明显高于纱布组与水胶体敷料组(P＜0.05);在术后第7天伤口愈合初期,BC-HEC-1敷料组血清中血小板源性生长因子水平高于纱布组和水胶体敷料组(P＜0.05);③病理切片观察,各组在第14天时均可见明显的肉芽组织,其中纱布组和水胶体敷料组肉芽组织相对较薄,且结构疏松,排列无规则,BC-HEC-1敷料组肉芽组织厚且致密,排列规则.④以上实验结果表明,BC-HEC-1具有明显优于传统敷料的保湿效果和促进伤口愈合效果.

背景:传统静电纺丝纳米纤维制造过程相对复杂,制造条件要求高,无法适应创伤、烧/烫伤等组织缺损的应急事件中快速组织修复的需求.目的:观察手持式静电纺丝聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜对小鼠皮肤缺损原位修复的效果.方法:①采用自制3D打印的手持式静电纺丝设备制备聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜,检测其接触角、水蒸气透过率;②以浓度100％,50％,20％的聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜浸提液培养胎鼠成纤维细胞,采用CCK-8细胞毒实验评估材料残留溶剂毒性;将胎鼠成纤维细胞与聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜共培养(实验组),设置单独细胞培养为对照,Alamar blue法检测细胞增殖,活/死染色观察细胞存活率,扫描电镜观察细胞形态;③在18只Balb/c小鼠背部制作直径2 cm皮肤全层缺损,实验组进行手持静电纺丝原位聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜修复后纱布包扎,对照组进行纱布包扎,术后8周进行缺损部位苏木精-伊红和Masson染色,观察缺损皮肤修复效果.结果与结论:①聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜的接触角为(32.68±5.68)°,属亲水材料,适宜细胞黏附;24 h水蒸气透过率为(4.21±0.11)×103 g/m2,可满足皮肤外敷料的要求;不同浓度的聚乳酸/明胶可降解纳米纤维膜浸提液无明显的细胞毒性;②实验组胎鼠成纤维细胞具有与对照组细胞等同的细胞活性,但具有更快的增殖速度与更长的增殖时间;③苏木精-伊红和Masson染色显示,实验组小鼠皮肤伤口全层愈合,材料降解完全,毛囊再生;对照组小鼠皮肤未全层愈合;④结果表明,手持式静电纺丝聚乳酸/明胶可降解纳米纤维实现小鼠皮肤全层缺损的原位修复.

目的:总结纳米银联合火针治疗老年褥疮的临床疗效.方法:选取2019年1月至12月广东江南医院收治的120例无法行皮瓣修复的老年Ⅲ期以上褥疮住院患者作为研究对象,随机分为4组,每组各30例.对照组采用无菌纱布覆盖包扎,纳米银组采用纳米银敷料,火针组采用火针治疗,联合组采用纳米银敷料联合火针治疗.比较治疗21 d后4组临床疗效,炎症因子指标[白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)]水平,治疗第14 d肉芽组织微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平.结果:治疗21 d后,联合组总有效率高于对照组,治愈率高于其他3组,WBC、CRP、PCT水平低于其他3组(均P<0.05);治疗14 d后,联合组MVD、VEGF、bFGF高于其他3组(P<0.05).结论:纳米银联合火针治疗老年褥疮,可改善机体炎症反应,预防或减轻细菌感染的发生,促进创面愈合,其机制可能与上调MVD、VEGF、bFGF有关.

目的:探究同种(人皮)脱细胞基质、异种(牛皮)脱细胞基质、纳米纤维丝素蛋白三种材料修复大鼠口腔黏膜缺损创面的效果.方法:选择80只3月龄雄性Wister清洁级大鼠,随机分为A(纳米纤维丝素组,n=20)、B(牛皮脱细胞基质组,n=20)、C(人皮脱细胞基质组,n=20)、D组(空白对照组,n=20),各组大鼠均切除直径10mm的全层口腔颊黏膜,A、B、C组大鼠分别取同一直径、经辐照灭菌的纳米纤维丝素蛋白、异种(牛皮)脱细胞基质、同种(人皮)脱细胞基质覆盖于创面,D组大鼠用凡士林纱布覆盖,比较各组大鼠术后1、2、3、4周时创面面积,采用HE染色及免疫组化分析大鼠各时间点成纤维细胞、新生血管内皮、炎性细胞数量及内皮细胞生长情况.结果:①各组大鼠术后创面无感染,术后1周A、B、C组受植区可见透明膜状物,D组创缘稍红肿,术后1、2、3周时D组大鼠创面直径显著大于A、B、C组(P<0.05);A、B、C组大鼠各时间点创面大小组间比较差异无统计学意义(P>0.05).②HE染色显示,A、B、C组大鼠不同时间点成纤维细胞数、炎性细胞数均显著低于D组(P<0.05),A、B、C组大鼠各时间点组间比较差异无统计学意义(P>0.05).③免疫组化示,A、B、C组术后1、2、3、4周时大鼠CK阳性细胞表达数显著高于D组(P<0.05);术后1、2、3周时CD34阳性细胞表达数显著高于D组(P<0.05),A、B、C组各时间点组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:纳米纤维丝素蛋白、自体、异体细胞基质对大鼠口腔黏膜损伤具有相似的修复效果,有较高的临床应用价值.