组织工程通过干细胞、支架材料及生长因子三要素实现组织修复和再生。诱导间充质干细胞(MSCs)成脂分化并构建工程化脂肪组织，是整形外科领域修复软组织缺损的新思路。天然生物材料表现出类似细胞外基质的理化性质，能够促进干细胞的增殖及分化，是组织工程适宜的支架材料。该文总结了脱细胞基质、细胞外基质衍生物、有丝素蛋白、海藻酸盐、壳聚糖和细菌纤维素等天然生物材料的特性，对其诱导MSCs成脂分化的相关研究进行了综述，为后续研究的材料选择提供思路。

目的:对比猪膀胱脱细胞基质(UBM)和猪脱细胞真皮基质(ADM)对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面促愈合效果的差异。方法:将36只10周龄雄性2型糖尿病BKS db/db小鼠按照随机数字表法分为UBM组和ADM组，每组18只，术前非空腹血糖物质的量浓度大于16.6 mmol/L，于每只小鼠背部制作直径6 mm圆形全层皮肤缺损创面，相应植入猪UBM和猪ADM支架。术后即刻及7、14、28 d，行创面大体观察。术后7、14和28 d，每组各取小鼠6只计算创面上皮化率，计算后处死相应小鼠，取创面组织制作切片。收集2组小鼠术后7与14 d各6张切片行苏木精-伊红(HE)染色、术后7与28 d各6张切片行Masson染色，观察组织病理学变化及支架降解情况。收集2组小鼠术后7、14 d各24张切片，采用免疫组织化学法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CD31阳性表达量，以分别反映肌成纤维细胞(Fb)、新生血管生长情况；观察巨噬细胞的分布和活化。取2组小鼠术后7、14 d创面组织，采用实时荧光定量反转录PCR法检测成纤维细胞生长因子2(FGF-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、转化生长因子β 1(TGF-β 1)mRNA含量。上述指标每组各时间点样本数为6。对数据行析因设计方差分析、 t检验及Bonferroni校正。 结果:(1)大体观察显示，UBM组小鼠创面术后大部分时间点与UBM支架融合佳，ADM组小鼠创面术后大部分时间点与ADM支架融合差；术后28 d，ADM组小鼠创面支架表面部分区域仍未形成表皮，UBM组小鼠创面完全上皮化。术后7、14和28 d，UBM组小鼠创面上皮化率分别为(22.4±6.4)%、(68.6±12.4)%、100.0%，均明显高于ADM组[(4.5±2.2)%、(23.6±4.6)%、(64.2±13.2)%， t＝7.427、9.665、7.655， P<0.01]。(2)HE染色和Masson染色显示，术后7 d，UBM组小鼠创面支架出现大量细胞；术后14 d，细胞占据UBM支架的全部区域；术后28 d，创面形成与正常皮肤结构类似的真皮组织，并且UBM支架原有的纤维形态消失。术后7 d，ADM组小鼠创面支架内部仅出现少量细胞；术后14 d，细胞散布于ADM支架之中；术后28 d，ADM支架原有粗大的胶原纤维形态仍清晰可见。(3)术后7 d，UBM组小鼠创面支架底层出现大量聚集的肌Fb，出现新生血管；术后14 d，UBM支架上层出现均匀分布的肌Fb、新生血管，并且大部分血管实现灌注。术后7、14 d，ADM组小鼠创面支架中仅散在分布肌Fb，无或少量未明显灌注的新生管腔结构。术后7、14 d，UBM组小鼠创面支架中α-SMA阳性表达量明显高于ADM组( t＝25.340、6.651, P<0.01)，CD31阳性表达量也明显高于ADM组( t＝34.225、10.581, P<0.01)。(4)术后7 d，UBM组小鼠创面支架底层出现大量巨噬细胞；术后14 d，巨噬细胞迁入UBM支架内部，发生M2型极化、无M1型极化。术后7 d，ADM组小鼠创面支架底部出现少量巨噬细胞；术后14 d，ADM支架内部巨噬细胞稀少，未发生M2型或M1型极化。(5)术后7、14 d，UBM组小鼠创面组织中FGF-2、VEGF、PDGF和TGF-β 1的mRNA表达量均明显高于ADM组( t＝7.007、14.770、10.670、8.939，7.174、7.770、4.374、4.501, P<0.01)。 结论:猪UBM支架通过诱导肌Fb和巨噬细胞迁入、促血管新生与促愈合生长因子的表达，促进糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面的修复和真皮重建，效果优于猪ADM。

目的:探讨不同类型脱细胞基质材料生物补片在青少年腹股沟疝修补术中的应用价值。方法:采用回顾性队列研究方法。收集2013年1月至2018年6月首都医科大学附属北京朝阳医院收治的159例青少年腹股沟疝患者的临床资料；男155例，女4例；中位年龄为15.0岁，年龄范围为13.0～18.0岁。159例患者中，42例行传统疝囊高位结扎术设为传统手术组；61例采用国产交联脱细胞基质材料生物补片行开放Lichtenstein手术设为国产生物补片组；56例采用进口非交联脱细胞基质材料生物补片行开放Lichtenstein手术设为进口生物补片组。观察指标：(1)手术情况。(2)术后恢复情况。(3)随访情况。采用门诊和电话方式进行随访，了解患者术后恢复情况及并发症发生情况。随访时间截至2019年6月。偏态分布的计量资料以 M(范围)表示，多组间比较采用Kruskal－Wallis H检验，两两比较采用Nemenyi检验。计数资料以绝对数表示，多组间比较采用 χ2检验或Fisher确切概率法，两两比较采用 χ2检验或Fisher确切概率法。两两比较采用Bonferroni法进行校正。 结果:(1)手术情况：3组患者均顺利完成腹股沟疝修补术。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者手术时间分别为20 min(10～25 min)、35 min(30～40 min)、35 min(30～40 min)，3组患者手术时间比较，差异有统计学意义( χ2＝91.640， P<0.05)。进一步两两比较，传统手术组患者手术时间分别与国产生物补片组和进口生物补片组比较，差异均有统计学意义( P<0.016 7)。国产生物补片组患者手术时间与进口生物补片组比较，差异无统计学意义( P>0.05) 。(2)术后恢复情况：传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者术后疝复发率分别为7.1%(3/42)、0、0，3组比较，差异有统计学意义( χ2＝8.150， P<0.05)。进一步两两比较，传统手术组患者术后疝复发率分别与国产生物补片组和进口生物补片组比较，差异均有统计学意义( P<0.016 7)。国产生物补片组患者术后疝复发率与进口生物补片组比较，差异无统计学意义( P>0.05) 。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者血清肿发生率分别为0、3.3%(2/61)、17.9%(10/56)，3组比较，差异有统计学意义( χ2＝14.929， P<0.05)。进一步两两比较，进口生物补片组患者血清肿发生率分别与传统手术组和国产生物补片组比较，差异均有统计学意义( χ2＝6.517，6.741， P<0.016 7)。传统手术组患者血清肿发生率与国产生物补片组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者伤口脂肪液化发生率分别为0、3.3%(2/61)、1.8%(1/56)，3组比较，差异无统计学意义( P>0.05)。伤口脂肪液化患者经换药后愈合。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者住院时间分别为3.0 d(2.0～5.0 d)、3.0 d(1.0～5.0 d)、2.5 d(1.0～5.0 d)，3组比较，差异无统计学意义( χ2＝0.907， P>0.05)。(3)随访情况：159例患者均获得随访，随访时间为12～77个月，中位随访时间为41个月。随访期间3组患者均无慢性疼痛、异物感及感染发生。 结论:生物补片修补治疗青少年腹股沟疝安全、有效。两种不同类型的脱细胞基质材料生物补片临床疗效比较，差异无统计学意义，均可用于青少年腹股沟疝修补术。

目的:探讨舌黏膜耦合颊黏膜与舌黏膜耦合异种脱细胞基质生物膜(ADM)一期尿道成形术治疗男性尿道下裂多次修复失败患者的临床疗效。方法:回顾性分析2017年2月至2019年2月收治的26例成年男性尿道下裂修复失败患者的病例资料，其中上海交通大学附属第六人民医院18例，山西医科大学第二医院3例，郑州大学第一附属医院3例，哈尔滨医科大学附属第二医院2例。根据尿道替代材料不同将患者分为两组，A组为舌黏膜耦合颊黏膜组(14例)，平均年龄(29.5±1.2)(18～41)岁；既往手术次数平均(3.6±0.7)(2～5)次；既往取口腔黏膜次数平均(1.0±0.5)(0～2)次；尿道缺损长度(6.4±0.6)cm。B组为舌黏膜耦合ADM组(12例)，平均年龄(26.5±0.8)(20～38)岁；既往手术次数平均(4.6±0.8)(3～5)次；既往取口腔黏膜次数平均(1.0±0.5)(0～2)次；尿道缺损长度(6.7±0.4)cm。两组上述指标比较差异均无统计学意义( P>0.05)。手术方式：将阴茎伸直，切除纤维组织或瘢痕，测量尿道缺损长度。A组采用舌黏膜铺尿道板，加盖颊黏膜；B组采用舌黏膜铺尿道板，加盖ADM[异种(牛)脱细胞基质敷料，规格5 cm×5 cm]。A组取舌黏膜的长度平均(5.0±0.2)(4.0～6.0)cm，宽度平均(1.2±0.2)(1.0～1.5)cm；取颊黏膜的长度平均(4.1±0.2)(3.5～5.5)cm，宽度平均(1.2±0.2)(1.0～1.5)cm。B组取舌黏膜的长度平均(5.0±0.2)(5.0～6.0)cm，宽度平均(1.2±0.2)(1.0～1.5)cm。两组术中取口腔黏膜长度差异有统计学意义( P<0.05)。尿道下裂修复成功标准：①阴茎外观接近正常；②矫正阴茎下曲；③尿道正位开口；④尿流尿线正常，排尿通畅，成人最大尿流率>15 ml/s。比较两组的疗效和并发症发生率。 结果:术后平均随访(16.3±1.6)(8～24)个月。A、B组口腔区域并发症发生比例分别为：口腔供区疼痛7/14例和1/12例，张口紧绷感8/14例和1/12例，口腔供区麻木感8/14例和1/12例，差异有统计学意义( P<0.05)。A、B组尿道并发症发生比例分别为：尿道瘘1/14例和4/12例，尿道狭窄2/14例和6/12例，差异有统计学意义( P<0.05)；阴茎弯曲2/14例和1/12例，差异无统计学意义( P>0.05)。A、B组手术成功比例分别为12/14例和5/12例，差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:对于尿道下裂多次修复失败后皮源缺少的患者，建议采用舌黏膜耦合颊黏膜一期尿道成形术修复尿道。舌黏膜耦合ADM尽管具有口腔黏膜取材少、术后口腔并发症低等优点，为多次手术失败阴茎局部皮源缺损患者提供了一种新途径，但存在术后并发症多、手术成功率低等风险，应谨慎使用，不推荐一线使用。

目的:采用目前文献报道的3种制备小肠黏膜下层（SIS）的方法制备SIS，并比较3种制备方法对SIS的脱细胞程度、结构、活性成分和生物相容性的影响。方法:采用Badylak法、Abraham法和Luo法制备SIS。使用苏木精-伊红（HE）和4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色及DNA含量检测其脱细胞是否完全、残余DNA量；蛋白组学检测其组成成分；扫描电镜检测其结构变化；并将3种SIS与骨髓间充质干细胞（BMSCs）共培养检测其细胞相容性。采用方差分析比较组间差异。结果:3种方法制备的SIS的HE和DAPI染色均未无肉眼可见的细胞核；Badylak法、Abraham法和Luo法制备的SIS中DNA含量检测分别为43.25、21.01 ng/mg和15.69 ng/mg ECM干重。蛋白组学分析结果：SIS-1、SIS-2和SIS-3中检测出的蛋白种类分别为644、717和135种。胶原蛋白的种类最多，共有21个亚型，Ⅰ型胶原含量最大，还含有纤维粘连蛋白（fibronectin）、蛋白多糖、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子-β（TGF-β）和骨形态发生蛋白-2（BMP-2）。扫描电子显微镜显示3种SIS微观结构均有一定程度破坏，表现为胶原纤维连续性中断与胶原纤维排列紊乱；与BMSCs共培养，细胞能保持良好的形态和增殖活性。结论:3种脱细胞方法制备的SIS均达到标准，具有良好的生物相容性，并保留大部分活性成分。微观结构和生物活性成分都会受到不同程度的损伤。

目的:研究膀胱平滑肌细胞与膀胱脱细胞基质(BAM)的生物相容性。方法:分离培养兔膀胱平滑肌细胞，采用α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体进行鉴定。将以1×10 5个/mL的单细胞悬液均匀接种于制备BAM支架上，通过与单独培养的膀胱平滑肌细胞作对照，绘制两组细胞生长曲线图，对比观察两条生长曲线的差异性。 结果:第4代兔膀胱平滑肌细胞形态为典型的"长梭样"，免疫荧光显示α-SAM表达阳性。膀胱平滑肌细胞能够在BAM上很好地黏附生长，两组细胞生长曲线基本相似。结论:膀胱平滑肌细胞与BAM生物相容性好，可用膀胱平滑肌细胞作为种子细胞，以BAM作为支架材料构建组织工程化尿路移植物。

目的:探讨输尿管脱细胞基质(UDM)涂层对脂肪干细胞分化的影响。方法:2018年1月至2019年10月利用灌注法制备犬UDM，为UDM组，以正常犬输尿管为正常输尿管组。采用HE染色、DAPI染色和DNA定量检测评估UDM组和正常输尿管组中细胞成分的残留情况；Masson三色染色和胶原定量检测评估UDM组和正常输尿管组中胶原的保留情况；阿尔新蓝染色和糖胺聚糖定量检测评估UDM组和正常输尿管组中糖胺聚糖的分布及含量。分离培养犬脂肪间充质干细胞(cADMSCs)并用流式细胞仪鉴定。用胃蛋白酶消化法制备UDM涂层作为实验组，Ⅰ型鼠尾胶原涂层作为对照组，将cADMSCs种植在不同涂层上，免疫荧光染色和蛋白质印迹法检测cADMSCs的分化情况。结果:HE和DAPI染色结果显示UDM组未见明显的细胞核残留；DNA定量检测结果显示UDM组中DNA含量[(38.87 ± 3.40) ng/mg]明显低于正常输尿管组[(1 694.63 ± 169.83) ng/mg， P<0.05]。Masson三色染色和胶原定量检测结果显示UDM组中胶原含量[(265.89 ± 16.40) μg/mg]与正常输尿管组[(288.73 ± 16.32) μg/mg]的差异无统计学意义( P>0.05)。阿尔新蓝染色结果显示UDM组中有糖胺聚糖分布；糖胺聚糖定量检测结果显示UDM组中糖胺聚糖含量[(1.57±0.19) μg/mg]低于正常输尿管组[(3.43±0.12) μg/mg] ( P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示，实验组培养3、7、10 d的α-SMA的表达量(2.51 ± 0.27、3.68 ± 0.33、4.91 ± 0.45)均高于相应对照组(0.97 ± 0.09、1.02 ± 0.10、1.00 ± 0.11)，差异均有统计学意义( P < 0.05)；随着培养时间增加，实验组α-SMA的表达量逐渐增加，差异均有统计学意义( P<0.05)，而对照组随着培养时间增加，α-SMA的表达量差异均无统计学意义( P > 0.05)。免疫荧光染色检测结果示实验组和对照组α-SMA的表达趋势与蛋白质印迹法检测结果一致。 结论:制备的UDM去除了细胞成分，且很好地保留了胶原结构和生物活性成分；UDM涂层可促进cADMSCs向平滑肌细胞分化。

随着组织工程学的发展，脱细胞基质材料越来越多地被应用于组织创伤及器官病变的修复中，其在泌尿外科中的应用也越来越广泛，在尿道狭窄、尿道损伤以及先天性尿道缺损中的应用也逐渐增加，且临床效果显著。本文通过复习以往文献及相关图书，归纳了尿道缺损疾病的类型、病因及目前临床上的相关治疗方法，并阐述了脱细胞基质材料的特点及其在尿道缺损疾病中的研究和应用进展。

目的:探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)对食管癌细胞侵袭能力的影响及其机制。方法:选取2017年6月至2021年6月河南省人民医院收集的54例食管癌和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析食管癌和癌旁组织G6PD表达水平；在人食管癌细胞株EC109细胞采用慢病毒感染建立对照组和G6PD组，采用划痕实验分析细胞迁移能力；采用Transwell分析细胞侵袭能力；采用蛋白质免疫印迹分析细胞上皮-间充质转化能力；组间计量数据比较采用 t检验。 结果:G6PD主要表达于细胞质中，呈黄棕色。旁组织中G6PD表达水平(63.87±12.89)明显低于食管癌组织G6PD表达水平(146.56±24.38)，差异有统计学意义( t＝22.030， P<0.05)．对照组细胞划痕愈合率[(67.62±4.99)%]明显低于G6PD组划痕愈合率[(91.21±3.57)%]，差异有统计学意义( t＝9.420， P<0.05)。对照组细胞黏着斑激酶(FAK)蛋白表达水平(1.01±0.08)明显低于G6PD组(2.01±0.011)，差异有统计学意义( t＝17.510， P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(115.67±10.52)个]明显低于G6PD组划痕愈合率[(187.00±12.26)个]，差异有统计学意义( t＝10.810， P<0.05)。对照组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达水平(0.70±0.10)明显低于G6PD组(1.36±0.17)，差异有统计学意义( t＝17.510， P<0.05)。对照组细胞上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平(1.06±0.05)明显高于G6PD组细胞(0.72±0.08)，差异有统计学意义( t＝8.724， P<0.05)。对照组细胞间质标志物波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.09±0.09、0.83±0.05)明显低于G6PD组细胞(1.96±0.21、1.50±0.12)，差异有统计学意义( t＝9.274、13.170， P<0.05)。 结论:G6PD在食管癌组织呈高表达，并参与食管癌细胞的迁移、侵袭和上皮-间充质转化等过程。

目的:采用改良灌注法制备猪全胰腺脱细胞基质支架(APB)，并评价其生物学特征。方法:选取10只新鲜的来自健康4~6月龄体重(20.0±2.5)kg猪的胰腺组织，采用本实验室自行设计的简易灌流装置制备猪APB，观察APB的形态结构，检测其细胞外基质(ECM)的成分以及DNA含量；随后采用移植实验评估APB生物相容性，最后将APB再细胞化观察其促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖分化状况。结果:脱细胞过程结束后APB颜色透明，原有组织轮廓保留完整；形态学检测表明APB保留原有的三维结构，ECM结构及成分保存较好，未见残留的细胞结构及成分；与正常猪胰腺组织相比，APB的ECM含量[胶原：(846.1±280.0)ng/mg干重比(754.7±249.6) ng/mg干重；葡萄糖胺聚糖(433.6±142.6) ng/mg干重比(397.2±98.7) ng/mg干重]，差异无统计学意义(均 P>0.05)；但APB的DNA含量较正常猪胰腺组织降低[(83 464.2±27 813.4) ng/mg干重比(298.9±96.8) ng/mg干重， t＝11.56， P<0.001]，差异有统计学意义；APB在皮下埋植后随着时间延长，重塑评分升高，引起有益的重塑反应；再细胞化的APB可促进BMSCs的增殖及分化。 结论:本研究所制备的APB符合脱细胞标准，维持原有的三维结构，具有良好的生物相容性，有利于种植细胞的增殖分化。