目的 制备不同浓度的兔软骨脱落细胞支架,并评估其理化性能和干细胞的相容性,为软骨修复提供实验依据.方法 Percoll密度分离法培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并进行流式细胞学鉴定和成骨、成软骨分化能力检测.从兔膝、股关节中切取软骨片,进行物理粉碎、反复冻融以及各种酶混合消化脱细胞.为比较并观察不同浓度脱细胞支架的理化性能差异,设计3组支架,浓度分别为100％(A组)、50％(B组)、30％(C组),每组3只.将第3代PKH26示踪的BMSCs接种于最适浓度支架上培养1周,观察细胞生长情况.结果 流式技术检测BMSCs表面抗原,CD44、CD90呈阳性表达,CD45阴性表达;成骨诱导茜素红染色可见红色钙结节;软骨诱导阿利新蓝染色见软骨结节呈蓝色;3组支架经苏木素-伊红(HE)、甲苯胺蓝染色后未观察到明显细胞形态.样本脱细胞后的DNA浓度与未脱支架的指标均值差异具有显著性(P＜0.05).糖胺聚糖含量较正常值稍偏低.3组支架两两比较孔径、吸水膨胀率、孔隙率、支架断裂强度、杨氏模量差异具有显著性(P＜0.05);干细胞与支架共培养后细胞附着良好.结论 Percoll密度分离法可获取高纯度的兔BMSCs;应用混合脱细胞方法脱细胞较彻底.B组支架可作为构建组织工程软骨修复的最适方案.体外培养的BMSCs在B组支架生长良好.

关节软骨损伤的治疗是临床医生面临的一个重要难题，也是骨科基础研究的热点之一。人工诱导间充质干细胞(MSCs)向指定方向分化，从而获得患者所需要的组织类型，例如透明软骨，已成为修复软骨缺损最有潜力的方法。然而MSCs的成软骨分化受多种因素的调节，例如培养基补充物、三维支架、机械刺激、氧浓度、共培养系统，充分了解各个因素如何影响干细胞命运，能让我们更有效且可预测地进行成软骨诱导。本文总结了近年来诸多学者发现的MSCs成软骨诱导的有利因素，为后续的研究提供参考。

关节软骨缺损是常见的一种关节损伤，但由于软骨组织的特殊性，修复能力受到限制，常常进展为较为严重的骨关节炎，给许多患者带来极大的痛苦和经济负担。软骨组织工程的发展为这些患者带来福音的同时，也面临着极大的挑战。间质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）因其自体来源、易扩增、具有软骨分化潜能的特点而受到广泛重视，常常被作为软骨组织工程的种子细胞。在常用的间充质细胞移植分化关节软骨的治疗策略中，体外的预培养与分化显示出较好的治疗效果，即从自体收集得到的间质干细胞经浓缩后在体外先进行培养和诱导分化，得到一定数量的分化软骨细胞后，再将细胞与培养基质一起共同移植到患者体内。但是，目前利用间质干细胞获得的组织工程软骨还不能完全满足临床治疗的要求。而且由于疾病类型、程度和个体化差异，间质干细胞源性的组织工程软骨移植治疗的可优化因素多样；针对同一类型疾病的治疗，优化体系仍无统一公认的标准。为了获得能更好适应人体及临床要求的关节软骨组织，所以主要针对间质干细胞在骨科疾病治疗的可优化因素研究现状进行归纳、总结及分析，从环境因素、支架选择和种子细胞三个方面总结间质干细胞在体外进行软骨诱导的可优化因素，为利用间质干细胞获得更优良的组织工程软骨以及建立更好的优化体系提供了研究思路。

目前，临床治疗骨关节炎(OA)的方法存在很大局限，组织工程(TE)为OA的治疗提供了新的思路。TE包括种子细胞、信号因子和支架，目的是诱导种子细胞向软骨方向分化，修复软骨损伤。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是目前使用最为广泛的种子细胞，但仍存在缺点，重编程的BMSCs具有效果好、不良反应少等优点。SRY相关人类转录因子9(SOX9)是软骨生成的主转录因子，将其作为重编程的目的基因是研究的热点。本综述讨论目前OA的治疗方法以及以SOX9重编程种子细胞的研究进展。

目的:探讨胶原-透明质酸-硫酸软骨素复合构建软骨组织工程三维纳米支架的可行性。方法:2012年12月至2014年6月，在川北医学院组织工程与干细胞研究所将胶原-透明质酸-硫酸软骨素溶于三氟乙醇和水混合溶剂中制成静电纺丝溶液，制备组织工程软骨纳米支架材料。扫描电镜观察其表面形貌，测定其纳米纤维直径、吸水率、表面接触角和降解率及生物学特性。兔软骨细胞种植于支架上，用细胞计数试剂盒评估细胞存活情况。结果:在静电纺丝浓度范围80～120 mg/ml，胶原-透明质酸-硫酸软骨素比例6.0∶0.5∶1.0条件下，可成功制备出组织工程软骨纳米支架，当电纺液浓度为10%时，纳米纤维直径相对均匀，无串珠形成，支架纤维直径(289.5±162.9)～(414.7±71.5) nm。经过理化检测显示：支架具有良好的亲水性，接触角最高达(34±15)°，30 d时降解比较稳定，降解率最高达68%，软骨细胞在支架上24 h存活率最高达70%。结论:以胶原-透明质酸-硫酸软骨素制备的组织工程软骨纳米支架材料有良好的物理和生物学性能，在组织工程软骨构建中有一定应用前景。

目的:探讨骨肌系统内源性再生修复的最新研究进展。方法:在美国国家生物技术信息中心、Web of Science、中国知网、万方数据等中英文数据库中，检索2023年9月之前公开发表的有关骨、软骨、椎间盘及肌肉（腱）等组织内源性再生修复研究的相关文献，共检索到文献348篇，按纳入和排除标准最终纳入49篇文献，对内源性再生修复在骨肌系统中的研究情况及其可能的机制进行总结。结果:在骨、软骨、椎间盘、肌肉、肌腱等组织中均存在内源性再生修复；内源性再生修复可通过组织工程支架材料引入相关生物学信号（如归巢信号等），或通过单纯生物工程支架系统来促进相关组织的再生修复；内源性再生修复的机制可能涉及受体和黏附分子的表达、与内皮细胞的作用以及免疫系统的诱导。结论:内源性再生修复在骨肌系统的研究取得了显著的进展。促进组织的内源性再生修复是再生医学中一种很有前途的治疗方式，未来临床应用前景广泛。

儿童骺板损伤非常常见，骨折、感染、恶性肿瘤或医源性损伤等原因均可导致，损伤后易引起生长阻滞、成角或旋转畸形，严重影响儿童的身心健康。目前临床骨桥切除术结合相应材料填充的治疗方法成功率低。采用软骨组织工程技术构建具有生物活性的骺板软骨成为治疗儿童骺板损伤新的研究方向。因此，现主要从组织工程三要素：种子细胞、生长因子、组织工程支架角度对目前骺板软骨的再生研究进行综述。

目的:应用新型生物墨水和聚己内酯（polycaprolactone，PCL）通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块，并评估其修复关节软骨缺损的效果。方法:实验分为三组：①丝素蛋白（silk fibroin, SF）-磷酸三钙冻干支架组（冻干组），应用冻干法制作的SF-TCP复合支架修复软骨缺损，作为对照；②3D生物打印组（3D打印组），以PCL为原料通过3D生物打印机打印一个中空的多层圆柱体框架，后以软骨细胞外基质、SF和骨髓间充质干细胞为原料配置新型生物墨水，并在PCL框架上方继续3D生物打印含有活细胞的软骨层，最后于底层的PCL框架中充填自体松质骨，以此构建骨-软骨复合组织块修复关节软骨缺损；③自体骨软骨移植组（马赛克组），通过自体骨软骨移植术修复软骨缺损，作为对照。术后3个月通过国际软骨修复协会（International Cartilage Repair Society，ICRS）软骨修复组织学评分系统对修复组织进行评分。通过测定硫化糖胺聚糖（sulfated glycosaminoglycan，sGAG）和胶原蛋白含量可分析软骨细胞外基质分泌的程度。通过测定缺损修复区域组织的压缩模量评价修复组织的性状。结果:3D打印组新生软骨的压缩模量（2.56±0.30）MPa和马赛克组（2.51±0.13）MPa相接近（ P>0.05），明显高于冻干组（1.37±0.14）MPa且差异具有统计学意义（ F=11.058， P<0.05）。3D打印组中sGAG的含量（14.49±0.7）μg/mg和马赛克组（14.98±0.81）μg/mg接近（ P>0.05），明显高于冻干组（8.72±0.73）μg/mg且差异有统计学意义（ F=20.973， P<0.05）。三组的胶原含量并无明显统计学差异（ P>0.05）。ICRS软骨修复组织学评分结果表明，在基质、细胞分布、细胞群活力和软骨下骨4项评分中，3D打印组与马赛克组的得分接近（ P>0.05），明显高于冻干组且差异有统计学意义（ F=19.544， P<0.05）；在表面和软骨矿化2项评分中，组间差异无统计学意义。 结论:应用新型生物墨水和聚己内酯通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块能够简化组织工程骨-软骨复合组织块的体外构建，并且可以在体内较好的修复软骨缺损。

近年来，基于组织工程技术修复节段性气管缺损领域出现了大量新的支架材料、制备技术和构建理念，丰富了组织工程气管的临床转化前景。脱细胞、三维打印、静电纺丝和细胞膜片等技术使组织工程气管软骨化日趋稳定成熟，上皮细胞种植或上皮细胞膜片移植加速了组织工程气管的上皮化进程，血供丰富的肌肉筋膜等组织的包裹联合带血管蒂移植修复策略的可靠性也获得了证实。如何整合上述方案，同时实现组织工程气管软骨、上皮及血管组织再生，以期最终实现节段性气管功能重建，尚需进一步研究。

气管外伤、狭窄、肿瘤以及部分先天性疾病可严重损伤正常通气功能，引起组织缺氧，危及患者的生命。气管病变切除重建是治疗这些疾病最为有效的方法。目前在临床中仍无长期安全可靠的方法能够实现长段气管损伤后的重建，组织工程化气管可能是目前这种情况的解决方案。软骨作为组织工程气管结构中最重要的部分之一，起到提供力学支撑并维持气管整体性的关键作用。组织工程气管软骨再生过程中的几个重要组成部分包括软骨细胞的来源、组织工程支架的构建策略和水凝胶材料复合支架的制备、生物活性因子的研究和应用等，本文通过对这几个部分进行探讨，综述了组织工程气管软骨再生的新策略以及所存在的障碍，以期为临床提供参考。