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黄芪甲苷联合高压氧处理对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌梗死范围及心肌细胞凋亡的影响
编辑人员丨9小时前
目的:探讨黄芪甲苷(ASⅣ)联合高压氧(HBO)处理对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌梗死范围及心肌细胞凋亡的影响。方法:SPF级SD雄性大鼠40只,按照随机数字表法分为4组:对照组、模型组、ASⅣ组及ASⅣ+HBO组,每组10只。对照组不作任何处理;模型组通过结扎左冠状动脉前降支构建心肌缺血再灌注损伤大鼠模型;ASⅣ组为模型大鼠冠状动脉结扎后经十二指肠注射羧甲基纤维素钠,冠状动脉解除结扎后即刻十二指肠注射3 g/kg ASⅣ;ASⅣ+HBO组冠状动脉解除结扎后于十二指肠注射3 g/kg ASⅣ,并同时开始给予0.25 MPa(2.5 ATA)的HBO处理。测量并计算各组大鼠心肌缺血梗死范围,酶联免疫吸附实验检测各组大鼠血清中细胞色素C(Cyt-C)含量,TURNEL实验检测各组大鼠心肌细胞的凋亡情况,免疫组化(SP)法检测各组大鼠心肌细胞中凋亡蛋白的表达量。结果:与ASⅣ组比较,ASⅣ+HBO组大鼠心肌梗死面积和梗死面积占比均明显缩小或降低( P<0.05);血清Cyt-C水平明显降低( P<0.05);心肌凋亡细胞数量最少,细胞凋亡率明显降低( P<0.05);ASⅣ+HBO组心肌细胞内凋亡蛋白Bcl-2表达明显上调,Bax、caspase-3蛋白表达明显下调( P<0.05)。 结论:ASⅣ联合HBO处理能够有效地降低心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌梗死的范围,其主要作用机制是通过调控心肌细胞凋亡蛋白的表达水平,从而相应减少缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的数量来实现的。
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编辑人员丨9小时前
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重组人表皮生长因子对角膜交联术后上皮修复及泪膜稳定性促进作用的随机对照研究
编辑人员丨9小时前
目的:评估重组人表皮生长因子(rh-EGF)滴眼液对圆锥角膜患者接受强化的跨上皮角膜交联术后早期上皮修复及泪膜稳定性的影响。方法:采用随机对照临床试验,连续收集2016年10月至2017年1月于厦门大学附属厦门眼科中心住院治疗的原发性进展期圆锥角膜并拟进行强化的离子电渗法跨上皮角膜交联术的患者66例66眼,其中男37例,女29例,平均年龄(21.27±3.80)岁。采用随机数字表法将患者随机分为对照组和试验组,每组33例33眼,分别使用羧甲基纤维素钠滴眼液和rh-EGF滴眼液点眼。在术前和术后第1、3、5、7、14、28天时对2个组患者分别行眼表疾病指数(OSDI)问卷评估、裂隙灯生物显微镜检查、角膜荧光素钠染色评分、非接触式眼压测量、裸眼视力(UCVA)和最佳矫正视力(BCVA)检查、球结膜充血程度评估、泪液分泌试验、非接触式泪膜破裂时间(NIBUT)测定、泪河高度测定并进行比较。结果:术后第7天,2个组患眼OSDI值均较术前显著增加,试验组患眼OSDI值较对照组低,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。2个组角膜胶原交联手术前后不同时间点患眼角膜上皮染色评分值的总体比较差异均有统计学意义( F组别=16.701, P<0.01; F时间=454.418, P<0.01),其中术后第3天和第5天,试验组患眼角膜上皮染色评分分别为1.79±0.65和0.91±0.46,明显低于对照组的2.70±0.68和1.55±0.51,差异均有统计学意义(均 P<0.01)。术后第3天和第5天,试验组患眼球结膜充血程度分值明显低于对照组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。2个组手术前后不同时间点患眼NIBUT值比较差异均有统计学意义( F组别=13.084, P<0.01; F时间=34.383, P<0.01)。2个组术后第7、14和28天时NIBUT值均较术前有所下降,差异均有统计学意义(均 P<0.01),但随着术后时间的延长而逐渐回升;术后第7天和第14天,试验组患眼的NIBUT值分别为(8.18±2.26)s和(9.49±1.95)s,明显高于对照组的(5.93±2.33)s和(7.52±2.27)s,差异均有统计学意义(均 P<0.01)。2个组手术前后各时间点患眼的眼压、视力变化以及泪液分泌量、泪河高度比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。 结论:rh-EGF对圆锥角膜患者接受强化的跨上皮角膜交联术后上皮修复具有明显促进作用,可在一定程度上改善患眼角膜交联术后早期不适,促进泪膜稳定性的恢复。
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编辑人员丨9小时前
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姜黄素对大鼠皮肤创面愈合及血管新生的影响和作用机制
编辑人员丨9小时前
目的:探讨姜黄素对大鼠皮肤创面愈合和血管新生的影响及可能作用机制。方法:制备全层真皮缺损伤口大鼠,并随机分为模型组、姜黄素低、中、高剂量组,每组各10只,腹腔注射给药,姜黄素低、中、高剂量组分别给予5、15、45 mg/(kg·d)姜黄素,模型组大鼠每日腹腔注射等量0.5%羧甲基纤维素钠,连续14 d。测定各组大鼠创面愈合率;创面组织行HE、Masson及免疫组化染色;酶联免疫吸附(ELISA)试验检测各组大鼠创面组织血管生成素1(Ang-1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测创面组织血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮细胞生长因子受体-2(VEGFR-2)mRNA相对表达量;Western blot法检测创面组织VEGFA、VEGFR-2、Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达情况。结果:姜黄素低、中、高剂量组大鼠创面愈合率、血管密度,创面组织Ang-1和bFGF水平、VEGFA和VEGFR-2 mRNA及Notch1、Jagged1、Hes1、VEGFA及VEGFR-2蛋白相对表达量高于模型组(均 P<0.05)。组织学染色结果显示,模型组大鼠创面组织再上皮化不明显,炎症细胞严重浸润,胶原蛋白沉积较少,姜黄素低、中、高剂量组大鼠创面组织再上皮化逐渐明显,表皮逐渐增厚,炎性细胞浸润程度逐渐减轻,且胶原蛋白沉积逐渐增加;姜黄素对大鼠皮肤创面的作用效果呈剂量依赖性增强(均 P<0.05)。 结论:姜黄素可促进大鼠创面愈合及血管新生,其作用机制可能与激活Notch信号通路有关。
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编辑人员丨9小时前
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7.0 T MR T 2WI和DTI定量分析改良双环己酮草酰二腙小鼠脱髓鞘与髓鞘再生模型的研究
编辑人员丨9小时前
目的:探讨改良的双环己酮草酰二腙(CPZ)诱导小鼠多发性硬化(MS)脱髓鞘及髓鞘再生模型的建立方法,并分析小鼠MS模型脱髓鞘及髓鞘再生的影像标记。方法:收集30只C57BL/6雄性小鼠,并以羧甲基纤维素钠(CMCNa)适应灌胃1周后,随机分3组,分别造模成对照组( n=10)、脱髓鞘组( n=10)及髓鞘再生组( n=10)。对照组小鼠立即进行MR扫描及病理取材;脱髓鞘组小鼠每日1次使用CPZ-CMCNa悬浊液连续灌胃诱导急性脱髓鞘6周,然后进行MR扫描及病理取材;髓鞘再生组小鼠每日1次使用CPZ-CMCNa悬浊液连续灌胃6周,停止灌胃并恢复正常饮食4周,最后进行MR扫描及病理取材。以胼胝体喙部(rCC)、喙部两侧正常表现白质(NAWM)及双侧大脑皮层(Cx)作为ROI,采用单因素方差分析比较3组归一化T 2WI(T 2-normalized)、各向异性分数(FA)、平均扩散率(MD)、轴向扩散系数(AD)及径向扩散系数(RD)变化及差异。 结果:成功建立了小鼠MS模型脱髓鞘及髓鞘再生模型。对照组、脱髓鞘组和髓鞘再生组rCC的T 2-normalized值分别为0.47±0.03、0.72±0.04、0.54±0.04,差异具有统计学意义( F=90.511, P<0.05);组间两两比较差异具有统计学意义( P<0.05)。3组NAWM及Cx的T 2-normalized值差异均无统计学意义( P>0.05)。对照组、脱髓鞘组和髓鞘再生组rCC的FA值(分别为0.36±0.04、0.29±0.03、0.32±0.05),MD值[分别为(0.572±0.015)、(0.598±0.034)、(0.626±0.043)×10 -3 mm 2/s],AD值[(0.79±0.04)、(0.77±0.06)、(0.83±0.04)×10 -3 mm 2/s]及RD值[(0.46±0.02)、(0.51±0.03)、(0.53±0.05)×10 -3 mm 2/s]差异均有统计学意义( P<0.05),且两两比较发现脱髓鞘组与对照组FA值差异具有统计学意义( P<0.05);髓鞘再生组与对照组MD值差异有统计学意义( P<0.05);髓鞘再生组与脱髓鞘组AD值差异具有统计学意义( P<0.05),脱髓鞘组、髓鞘再生组与对照组RD值差异均有统计学意义( P<0.05)。3组的NAWM及Cx各项扩散张量成像(DTI)参数差异均无统计学意义( P>0.05)。劳克坚牢蓝-伊红染色显示脱髓鞘组胼胝体喙部髓鞘丢失,髓鞘再生组胼胝体喙部部分再生修复。 结论:改良CPZ-CMCNa模型能够选择性诱导rCC脱髓鞘及髓鞘再生;利用T 2WI联合DTI可以定量检测改良CPZ-CMCNa模型rCC脱髓鞘和髓鞘再生变化,为研究MS病灶变化提供理论依据。
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编辑人员丨9小时前
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基于实时剪切波弹性成像评价毛蕊异黄酮预防失重性肌萎缩的效果
编辑人员丨9小时前
目的:采用实时剪切波弹性成像(real-time shear wave elastography,RT-SWE)探究毛蕊异黄酮抗失重性肌萎缩的防护效果。方法:通过系统药理学方法筛选出黄芪中抗肌萎缩的潜在关键活性化合物毛蕊异黄酮。18只健康雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为对照组[0.5%羧甲基纤维素钠(carboxymethyl cellulose-Na,CMC-Na)灌胃]、尾悬吊(hind limb unloading,HLU)+CMC-Na组(HLU+0.5%CMC-Na灌胃)和HLU+毛蕊异黄酮组(HLU+毛蕊异黄酮灌胃),每组6只。连续灌胃28 d后,分别检测大鼠脏器指数、肝肾毒性、比目鱼肌组织湿重及肌重体重比。采用非侵入式的RT-SWE评价各组大鼠股直肌的厚度和弹性模量;组间差异比较采用单因素方差分析。结果:不同组间大鼠脏器指数和肝肾毒性差异无统计学意义( P均>0.05)。不同组间大鼠比目鱼肌重量及肌重体重比差异有统计学意义( F=60.66、56.44, P均<0.001);与HLU+CMC-Na组相比,HLU+毛蕊异黄酮组大鼠的比目鱼肌重量及肌重体重比均升高,差异有统计学意义( P均<0.01)。不同组间大鼠股直肌厚度及肌弹性模量差异有统计学意义( F=35.47、14.68, P均<0.001);与HLU+CMC-Na组相比,HLU+毛蕊异黄酮组大鼠的肌肉厚度和弹性模量均增加,差异有统计学意义( P均<0.01)。 结论:毛蕊异黄酮对大鼠无毒副作用,可改善大鼠股直肌的厚度和弹性模量,有效预防失重性肌萎缩,可能为航天员的肌萎缩提供新的候选药物。
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编辑人员丨9小时前
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应用新型生物墨水和聚己内酯3D生物打印骨-软骨复合组织块修复关节软骨缺损
编辑人员丨9小时前
目的:应用新型生物墨水和聚己内酯(polycaprolactone,PCL)通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块,并评估其修复关节软骨缺损的效果。方法:实验分为三组:①丝素蛋白(silk fibroin, SF)-磷酸三钙冻干支架组(冻干组),应用冻干法制作的SF-TCP复合支架修复软骨缺损,作为对照;②3D生物打印组(3D打印组),以PCL为原料通过3D生物打印机打印一个中空的多层圆柱体框架,后以软骨细胞外基质、SF和骨髓间充质干细胞为原料配置新型生物墨水,并在PCL框架上方继续3D生物打印含有活细胞的软骨层,最后于底层的PCL框架中充填自体松质骨,以此构建骨-软骨复合组织块修复关节软骨缺损;③自体骨软骨移植组(马赛克组),通过自体骨软骨移植术修复软骨缺损,作为对照。术后3个月通过国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)软骨修复组织学评分系统对修复组织进行评分。通过测定硫化糖胺聚糖(sulfated glycosaminoglycan,sGAG)和胶原蛋白含量可分析软骨细胞外基质分泌的程度。通过测定缺损修复区域组织的压缩模量评价修复组织的性状。结果:3D打印组新生软骨的压缩模量(2.56±0.30)MPa和马赛克组(2.51±0.13)MPa相接近( P>0.05),明显高于冻干组(1.37±0.14)MPa且差异具有统计学意义( F=11.058, P<0.05)。3D打印组中sGAG的含量(14.49±0.7)μg/mg和马赛克组(14.98±0.81)μg/mg接近( P>0.05),明显高于冻干组(8.72±0.73)μg/mg且差异有统计学意义( F=20.973, P<0.05)。三组的胶原含量并无明显统计学差异( P>0.05)。ICRS软骨修复组织学评分结果表明,在基质、细胞分布、细胞群活力和软骨下骨4项评分中,3D打印组与马赛克组的得分接近( P>0.05),明显高于冻干组且差异有统计学意义( F=19.544, P<0.05);在表面和软骨矿化2项评分中,组间差异无统计学意义。 结论:应用新型生物墨水和聚己内酯通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块能够简化组织工程骨-软骨复合组织块的体外构建,并且可以在体内较好的修复软骨缺损。
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编辑人员丨9小时前
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食品添加剂乳化剂与心血管疾病发生的风险
编辑人员丨9小时前
食品添加剂乳化剂是工业食品中最常用的添加剂之一,具有乳化和增稠特性,可以改善食品质地并延长保质期。对健康个体的研究表明,食品添加剂乳化剂对肠道微生物群和代谢组产生有害影响,这种影响可能导致慢性肠道炎症,增加致癌的可能性,并可能导致心血管疾病(CVD)的发生。NutriNet-Santé为法国的大型流行病队列,收集了超过100 000名法国成年人单独接触食品添加剂(包括乳化剂)的相关信息。近期有法国学者通过NutriNet-Santé前瞻性队列进行了一项研究,旨在评估法国成年人食品添加剂乳化剂摄入量与CVD风险之间的关联。研究者使用多变量比例风险Cox模型计算乳化剂摄入量每个附加标准差( SD)的风险比( HR),以及95%可信区间(95% CI)。结果显示:研究共纳入95 442名成人,平均年龄为(43.1±14.5)岁,79.0%(75 390名)为女性。在随访期间(中位7.4年),诊断出1 995起CVD事件、1 044起冠心病事件和974起脑血管疾病事件。摄入较多的纤维素(E460和E468)与CVD(增加1个SD的 HR=1.05,95% CI为1.02~1.09, P=0.003)和冠心病( HR=1.07,95% CI为1.02~1.12, P=0.004)发生风险呈正相关,摄入较多的纤维素(E460)和羧甲基纤维素(E466)与发生CVD(E460: HR=1.05,95% CI为1.01~1.09, P=0.00;E466: HR=1.03,95% CI为1.01~1.05, P=0.004)和冠心病(E460: HR=1.07,95% CI为1.02~1.12, P=0.005;E466: HR=1.04,95% CI为1.02~1.06, P=0.001)风险增加有关。此外,脂肪酸单甘油酯和甘油二酯(E471和E472)的摄入量越高,所有结局的发生风险越高。摄入较高的脂肪酸单甘油酯和脂肪酸甘油二酯(E472b)与发生CVD( HR=1.06,95% CI为1.02~1.10, P=0.002)和脑血管疾病( HR=1.11,95% CI为1.06~1.16, P<0.001)的风险增加相关;柠檬酸单甘油酯和脂肪酸甘油二酯(E472c)与发生CVD( HR=1.04,95% CI为1.02~1.07, P=0.004)和冠心病( HR=1.06,95% CI为1.03~1.09, P<0.001)的风险增加有关。大量摄入磷酸三钠(E339)与发生CVD风险增加相关( HR=1.06,95% CI为1.00~1.12, P=0.03)。敏感性分析显示出一致的关联。研究人员据此得出结论:两种乳化剂(总纤维素、总脂肪酸单甘油酯和甘油二酯),特别是4种乳化剂(E460、E466、E472b、E472c)的较高摄入量与CVD发生风险独立相关且成正相关。这些结果表明食品添加剂乳化剂与人类CVD发生风险增加有关。鉴于这些食品添加剂广泛用于数千种超加工食品中,这些发现对公共卫生具有重要意义。
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编辑人员丨9小时前
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栀子提取物GJ-4急性毒性和长期毒性研究
编辑人员丨9小时前
目的:评价中药栀子提取物GJ-4的急性毒性和长期毒性,为其开发成为治疗老年痴呆的新药提供安全依据。方法:在急性毒性实验中,将30只ICR小鼠按随机数字表法分为对照组、栀子提取物2.5 g/kg组和栀子提取物5.0 g/kg组,每组10只。栀子提取物2.5 g/kg组和栀子提取物5.0 g/kg组小鼠分别灌胃2.5、5.0 g/kg栀子提取物GJ-4混悬液。对照组灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethyl cellulose, CMC-Na)。连续灌胃7 d。记录小鼠死亡率、体重和一般状况。计算小鼠的心脏指数、肝脏指数、肾脏指数,采用全自动生化检测仪检测血清中ALT、ALP、BUN、SCr水平。长期毒性实验中,将75只ICR小鼠按随机数字表法分为对照组及栀子提取物100、250、500、1 000 mg/kg组,每组15只。栀子提取物100、250、500、1 000 mg/kg组分别灌胃100、250、500、1 000 mg/kg栀子提取物GJ-4混悬液,对照组灌胃等体积的0.5% CMC-Na,1次/d,连续给药30 d。记录小鼠的死亡率、体重、精神状态。计算小鼠的脏器指数,检测血清中ALT、ALP、BUN水平。结果:急性毒性实验中,各组小鼠精神状态和饮食情况良好,观察7 d内小鼠未出现死亡。与对照组比较,给药组小鼠体重、心脏指数、肝脏指数、肾脏指数比较差异无统计学意义( P>0.05),栀子提取物2.5 g/kg组小鼠血清BUN[(10.17±0.82)mmol/L比(11.25±0.47)mmol/L]水平降低( P<0.05),栀子提取物5.0 g/kg组小鼠ALP[(116.0±10.75)U/L比(148.0±25.73)U/L]水平降低( P<0.05)。长期毒性实验中,各给药小鼠精神状态和饮食情况良好,均未出现死亡。与对照组比较,栀子提取物各剂量组小鼠体重、心脏指数、肾脏指数、脾脏指数及血清ALT、ALP、BUN水平比较差异无统计学意义( P>0.05),栀子提取物250 mg/kg组肝脏指数[(4.90±0.56)比(4.38±0.49)]升高( P<0.01),胸腺指数[(0.09±0.02)比(0.14±0.04)]降低( P<0.05)。 结论:栀子提取物GJ-4在小鼠急性毒性和长期毒性实验中未表现出明显毒性,安全性较好。
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编辑人员丨9小时前
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黄杞叶提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用
编辑人员丨9小时前
目的:研究黄杞叶提取物对一次性全身4 Gy 137Cs γ射线照射导致的小鼠造血系统辐射损伤的防护作用。 方法:(1)体外实验。采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)和2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)自由基体外清除实验检测黄杞叶提取物的体外抗氧化能力。(2)体内实验。①存活实验。将40只无特定病原体(SPF)级雄性C57BL/6小鼠按照区组随机法平均分为4组:照射组、照射+黄杞叶提取物低剂量(20 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物中剂量(40 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物高剂量(80 mg/kg)组,4组均进行全身一次性7.2 Gy(致死剂量) 137Cs γ射线照射,记录照射后30 d小鼠的存活情况。②造血系统辐射损伤防护实验。将60只SPF级雄性C57BL/6小鼠按照区组随机法平均分为6组:对照组、照射组、黄杞叶提取物高剂量组(80 mg/kg)、照射+黄杞叶提取物低剂量(20 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物中剂量(40 mg/kg)组、照射+黄杞叶提取物高剂量(80 mg/kg)组,其中对照组和黄杞叶提取物高剂量组不照射,其余4组均进行一次性全身4 Gy 137Cs γ射线照射。照射后第7天处死小鼠,取外周血进行血常规检测,取单侧股骨骨髓细胞进行骨髓有核细胞计数,取另一侧股骨骨髓细胞进行骨髓DNA含量检测,取胸腺和脾脏计算脏器指数,取肝脏检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量。体内实验中各组小鼠均于照射前7 d和照射后6 d连续灌胃给药,其中对照组和照射组给予0.5%羧甲基纤维素钠,其余各组给予相应剂量的黄杞叶提取物。组间两两比较采用Student t检验,存活率采用Kaplan-Meier生存分析。 结果:(1)在体外实验中,当浓度分别为100 μg/ml和200 μg/ml时,与Trolox相比,黄杞叶提取物对DPPH自由基的清除率更高(89.83%对69.37%,90.94%对68.53%);对ABTS自由基的清除率也更高(94.81%对71.35%,94.46%对71.93%),且差异均有统计学意义( t=19.58~33.26,均 P<0.001)。(2)在体内实验中,与照射组相比,照射+黄杞叶提取物低、中、高剂量组小鼠30 d存活率均明显升高,且差异均有统计学意义(Kaplan-Meier生存分析,均 P<0.05),存活天数亦均明显增加[(19.40±7.70)d对(12.50±3.59)d、(20.20±8.48)d对(12.50±3.59)d、(20.90±7.96)d对(12.50±3.59)d ],且差异均有统计学意义( t=2.57、2.79、3.04,均 P<0.05);照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠脾脏和胸腺的脏器指数明显升高[(2.13±0.43)mg/g对(1.67±0.20)mg/g、(1.87±0.39)mg/g对(1.39±0.31)mg/g] ,且差异均有统计学意义( t=3.00、3.03,均 P<0.05);照射+黄杞叶中剂量组小鼠红细胞数量增加最为明显[(10.12± 1.71)×10 12/L对(8.26±0.87)×10 12/L],且差异有统计学意义( t=2.89, P<0.05);照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠白细胞、红细胞数量明显增加[(1.76±0.45)×10 9/L对(1.17±0.23)×10 9/L、(9.59±0.85)×10 12/L对(8.26±0.87)×10 12/L],血红蛋白含量亦明显升高[(144.40±14.61)g/L对(126.20±13.16)g/L] ,且差异均有统计学意义( t= 3.62、3.23、2.93,均 P<0.05);此外,照射+黄杞叶提取物高剂量组小鼠骨髓有核细胞数量、骨髓DNA含量和肝脏还原型GSH含量均明显升高,且差异均有统计学意义( t=3.28、3.93、3.07,均 P<0.05)。 结论:黄杞叶提取物对小鼠造血系统辐射损伤有一定的防护作用。
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编辑人员丨9小时前
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黄连素合用环孢素A对小鼠皮肤移植排斥反应的影响
编辑人员丨9小时前
目的:观察黄连素合用环孢素A抗同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响,探讨其作用机制。方法:以BALB/c小鼠为供体,以C57BL/6小鼠为受体,采用背-背皮肤移植手术法制备模型。将受体小鼠按随机数字表法分为模型组、黄连素组、环孢素A组、联合组,每组20只;另取20只健康C57BL/6小鼠作为假手术组。造模后黄连素组小鼠腹腔注射黄连素100 mg/kg,环孢素A组小鼠腹腔注射环孢素A注射液10 mg/kg,联合组腹腔注射黄连素100 mg/kg及环孢素A注射液5 mg/kg,假手术组和模型组小鼠腹腔注射等体积0.5%羧甲基纤维素钠。1次/d,连续10 d。记录受体小鼠移植皮片的存活时间;采用ELISA法检测血浆Th1类细胞因子[IL-2、γ-干扰素(interferon-γ, IFN-γ)]和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)水平;采用流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞亚群CD4 +CD25 +比例。 结果:与模型组比较,各给药组受体小鼠移植皮片的存活时间延长( P<0.01);联合组移植皮片存活时间较黄连素组或环孢素A组延长( P<0.01)。与模型组比较,联合组血浆IL-2[(11.55±3.14)pg/ml比(19.85±2.42)pg/ml]、IFN-γ[(26.41± 6.20)pg/ml比(57.23±10.15)pg/ml]水平降低,IL-4[(192.45±70.12)pg/ml比(61.09±21.61)pg/ml]、IL-10[(106.79±27.83)pg/ml比(40.08± 11.23)pg/ml]水平升高( P<0.05),脾脏CD4 +CD25 +调节性T细胞比例[(7.65±2.42)%比(3.69±0.83)%]升高( P<0.01)。 结论:黄连素合用环孢素A通过促使Thl向Th2细胞的偏移、诱导免疫耐受、刺激CD4 +CD25 +调节性T细胞的表达等途径,抑制同种异体小鼠的皮肤移植排斥反应。
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