目的:探讨细胞图像DNA倍体分析（DNA-ICM）在恶性胸腔积液病理诊断中的应用价值。方法:回顾性病例系列研究。回顾性分析山西白求恩医院2021年10月至12月101例胸腔积液患者的临床资料，对胸腔积液标本进行液基细胞学检查（LBC）和DNA-ICM，结合患者的临床诊断、影像学检查、活组织检查和随访结果，比较两种方法的灵敏性和特异性。结果:101例患者的胸腔积液中，恶性胸腔积液39例，良性胸腔积液62例。LBC和DNA-ICM诊断胸腔积液中恶性肿瘤细胞的灵敏度分别为74.7%和94.9%，特异度分别为98.4%和83.9%；二者联合比单独LBC诊断阳性率提高[36.6%（37/101）比28.7%（29/101）]。对7例DNA-ICM阳性但LBC结果为阴性病例进行随访，其中1例诊断为小细胞肺癌。结论:DNA-ICM可有效提高胸腔积液细胞学阳性检出率，DNA-ICM和LBC联合检测可降低细胞学漏诊率，对恶性胸腔积液病理诊断具有重要的临床价值。

目的:探讨宫颈细胞DNA倍体分析联合负性共刺激分子B7同源物4（B7-H4）和蛋白激酶Cδ（PKCδ）对宫颈癌的诊断价值。方法:选取2018年1月到2022年1月在石家庄市人民医院诊治的宫颈癌患者160例作为宫颈癌组，同期在本院做宫颈癌前筛查的女性160例作为对照组，根据检查结果分为正常或炎症组（ n=52）、低级别宫颈上皮内瘤变（CIN）组（ n=68）、高级别CIN组（ n=40）。采用全自动细胞图像分析系统分析宫颈细胞DNA倍体情况。采用酶联免疫吸附法测定血清B7-H4、PKCδ水平。采用Pearson相关分析探讨血清B7-H4、PKCδ的相关性；采用受试者操作特征（ROC）曲线评估宫颈细胞DNA倍体分析联合血清B7-H4、PKCδ对宫颈癌的诊断价值；采用logistic多因素回归进行宫颈癌的危险因素分析。 结果:正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组DNA倍体阳性例数分别为16（30.8%）、27（39.7%）、26（65.0%）、127（79.4%），差异有统计学意义（ H=55.86， P<0.001）。进一步两两比较发现，与正常或炎症组比较，高级别CIN组、宫颈癌组DNA倍体阳性比例均高（均 P<0.05）；与低级别CIN组比较，宫颈癌组DNA倍体阳性比例高（ P<0.05）。正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组血清B7-H4水平分别为（57.21±10.21）、（79.17±11.34）、（92.73±15.36）、（126.56±20.25）ng/ml，差异有统计学意义（ F=285.45， P<0.001），血清PKCδ水平分别为（89.34±18.29）、（71.79±15.82）、（53.39±11.84）、（40.23±10.21）ng/ml，差异有统计学意义（ F=216.28， P<0.001），进一步两两比较发现，正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组血清B7-H4水平依次升高（均 P<0.05）；正常或炎症组、高级别CIN组、宫颈癌组血清PKCδ水平依次降低（均 P<0.05）。Pearson检验分析结果显示，宫颈癌患者血清B7-H4、PKCδ水平呈负相关（ r=-0.47， P<0.001）。ROC曲线分析显示，宫颈细胞DNA倍体诊断宫颈癌的曲线下面积（AUC）为0.82（95% CI为0.78~0.86），敏感性、特异性分别为83.9%、79.9%；血清B7-H4诊断宫颈癌的AUC为0.92（95% CI为0.89~0.95），敏感性、特异性分别为95.7%、76.1%，截断值为111.12 ng/ml；血清PKCδ诊断宫颈癌的AUC为0.92（95% CI为0.89~0.95），敏感性、特异性分别为85.6%、88.9%，截断值为54.83 ng/ml；三者联合诊断宫颈癌的AUC为0.99（95% CI为0.97~0.99），敏感性、特异性分别为98.3%、75.9%。三者联合诊断宫颈癌的AUC大于宫颈细胞DNA倍体（ Z=8.00， P<0.001）、血清B7-H4（ Z=4.34， P<0.001）、血清PKCδ（ Z=4.61， P<0.001）单独诊断的AUC。多因素logistic回归分析结果显示，血清B7-H4高水平（ OR=2.94，95% CI为1.78~4.84， P<0.001）、PKCδ低水平（ OR=4.33，95% CI为1.88~10.00， P=0.001）、宫颈细胞DNA倍体阳性（ OR=5.77，95% CI为2.38~13.99， P<0.001）均为影响宫颈癌发生的独立危险因素。 结论:宫颈癌患者宫颈细胞DNA倍体阳性比例升高，血清B7-H4水平升高、PKCδ水平降低，宫颈细胞DNA倍体分析联合血清B7-H4和PKCδ对宫颈癌具有较高的诊断价值。

目的:探讨体内噬菌体展示技术筛选的人髓样乳腺癌Bcap-37细胞特异性结合肽的性质和结合效果，为乳腺癌早期诊断提供分子靶向探针。方法:制备人髓样乳腺癌Bcap-37细胞荷瘤裸鼠模型，采用噬菌体环七肽库进行3轮体内筛选。免疫组织化学法检测筛选的噬菌体在肿瘤及正常组织中的分布情况。酶联免疫吸附试验（ELISA）鉴定单克隆噬菌体对Bcap-37细胞的亲合力。提取阳性单克隆噬菌体DNA并测序，选取重复率高的序列合成多肽，制备光学分子探针，应用荧光分子成像验证合成的多肽在荷瘤小鼠体内对乳腺移植瘤的特异性和靶向性。结果:第3轮体内筛选的噬菌体回收率为第1轮的107.2倍。免疫组织化学结果显示，随筛选轮次增加，肿瘤组织中结合的噬菌体依次增加；肿瘤组织结合的噬菌体多于正常组织（肺脏、骨骼肌、肝脏、肾脏），肿瘤组织切片扫描图像的吸光度（ A）值均较正常组织高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。ELISA结果显示，随机选取的50个单克隆噬菌体中，22个为阳性（亲合力≥2）。阳性单克隆噬菌体DNA测序分析后，得到4条有重复的氨基酸序列，选择重复率最高的氨基酸序列CSPLNTRFC，化学合成异硫氰酸荧光素（FITC）标记的CSPLNTRFC多肽。Bcap-37细胞荷瘤裸鼠模型体内验证实验显示，FITC-CSPLNTRFC多肽能明显富集在乳腺移植瘤组织。 结论:利用体内噬菌体展示技术能够筛选出可与人髓样乳腺癌Bcap-37细胞特异性结合的多肽CSPLNTRFC，有助于进行乳腺癌早期诊断的体外研究。

目的 通过对DNA图像分析(DNA image cytometry,DNA-ICM)技术在胸科恶性肿瘤病变诊断应用的研究,寻找该技术在相关病变诊断方面潜在的优势.方法 选取安徽省胸科医院2015年5月～2017年5月间送检的4 402例胸科疾病患者,选取其中701例符合要求的标本进行DNA-ICM计算机扫描与自动分析,根据分析结果区分阳性、可疑、阴性诊断,与活检结果及临床基线数据进行对比分析.结果 明确恶性肿瘤病变患者的细胞倍体出现异常者可达65％,未明确诊断恶性肿瘤但提示有恶性可能的患者细胞倍体异常率为64％,而在非恶性肿瘤病变患者中则仅为8％.综合评估显示,细胞DNA倍体诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为73％,93％、71％,94％.OR分析发现恶性肿瘤病变比非恶性肿瘤病变引起倍体异常的风险比是23.236.结论 DNA-ICM技术对于胸科常见恶性肿瘤诊断有重要的临床应用价值.

目的 细胞学检查是判断肿瘤良恶性的经济、方便检查方法,但是受取材、制片方式及诊断者主观性因素影响较大.本研究拟评价液基联合全自动DNA图像分析(DNA image cytometry,ICM-DNA)检测在乳腺及甲状腺肿瘤细胞学诊断中的应用价值.方法 收集单县中心医院2012-01-01-2014-01-01行术中快速冷冻检查的乳腺肿块100例和甲状腺肿块158例,分别刮取新鲜肿瘤细胞行普通细胞涂片和液基配合ICM-DNA检测,以术后常规病理诊断结果为对照,比较2种细胞学检查方法的诊断符合率和阳性检出率,同时对细胞核DNA含量及倍体情况进行分析.结果 在乳腺常见良恶性肿瘤中,液基配合ICM-DNA扫描定量分析方法诊断符合率为99.0％(99/100),阳性检出率为98.6％(73/74),明显高于普通细胞涂片的85.0％(85/100)和79.7％(59/74),x2值分别为13.315和10.562,均P＜0.001.在乳腺浸润性导管癌病变中,分级越高,DNA含量越高,超二倍体细胞越多,F=11.26,P＜0.05.甲状腺常见良恶性肿瘤中,液基配合ICM-DNA扫描定量分析法的诊断符合率为91.1％(144/158),阳性检出率为83.1％(69/83),明显高于普通细胞涂片的69.6％(110/158)和42.2％(35/83),x2值分别为21.066和11.042,均P＜0.001.甲状腺恶性肿瘤间DNA含量差异无统计学意义,P＞0.05.结论 液基配合ICM-DNA检测方法能显著提高乳腺及甲状腺肿瘤的诊断符合率和阳性检出率,有助于良恶性肿瘤的鉴别,为临床诊断提供有价值的参考指标.DNA含量和DNA倍体特征与乳腺癌的分化程度有关.

目的 在子宫内膜癌转移阴性淋巴结中检测DNA倍体和上皮细胞标志物广谱细胞角蛋白[CK(AE1/AE3)],分析淋巴结微转移与上述指标的关系,探讨上述指标检测子宫内膜癌淋巴结微转移的可行性及临床价值.方法 收集2013年1月至2016年12月接受手术治疗的子宫内膜癌患者35例,共收集427枚转移阴性淋巴结,分别用全自动细胞DNA图像分析系统检测DNA倍体及免疫组织化学法检测AE1/AE3.结果 ①在427枚转移阴性淋巴结中,手术-病理分期、组织学分级、病理类型、肌层浸润深度等组内进行比较,上述指标阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05).②通过比较无转移组淋巴结与转移组阴性淋巴结发现,2组阴性淋巴结中DNA异倍体表达率、AE1/AE3阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05).③在427枚转移阴性淋巴结中,43枚(10.1％)DNA异倍体表达阳性,39枚(9.1％)AE1/AE3表达阳性,DNA倍体与AE1/AE3在转移阴性淋巴结中的表达差异无统计学意义(P＞0.05),两者联合检测较单一指标检测,可显著提高淋巴结的微转移检出率(P＜0.05).结论 在转移组阴性淋巴结较无转移组淋巴结中,可能更容易找到早期发生的微转移灶.在转移阴性淋巴结中,DNA异倍体与AE1/AE3的阳性表达差异无统计学意义,两者联合检测有助于检测子宫内膜癌淋巴结微转移.

目的 :研究脱落细胞涂片、DNA图像倍体分析、细胞块及其联合检测对恶性胸腔积液的诊断价值,为恶性胸腔积液的诊断及后续治疗提供依据.方法 :对300例胸腔积液标本进行DNA图像倍体分析判定胸腔积液的良恶性,离心细胞沉淀进行涂片,并制作细胞块,采用免疫组织化学法判定恶性胸水的来源部位,比较3种方法单独和联合应用诊断胸腔积液的敏感度和特异度.结果 :脱落细胞涂片、DNA图像倍体分析和细胞块诊断恶性胸腔积液的敏感度分别为83.13％ 、84.44％ 和79.52％,特异度分别为82.95％ 、86.64％ 和83.87％;采用平行试验诊断恶性胸腔积液的敏感度为98.79％;系列试验诊断恶性胸腔积液的特异度为99.54％.结论 :3种方法联合应用较单独应用可以明显提高恶性胸腔积液的临床诊断效果.

以往对Paget病的研究多采用一般组织形态学的定性观察方法,很少从量的概念上认识本病,对其生物学特性尚缺乏深入了解.我们应用组化技术及先进的图像分析技术直接对10例Paget病细胞核DNA含量及其形态特征进行了原位定量研究,试图探讨Paget病生物学特性与DNA倍体水平及形态特征之间的关系.

对54例宫颈鳞状上皮不典型增生、原位癌、鳞癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级进行核仁组成区相关嗜银蛋白（Ag-NOR）计数研究，同时利用图像分析技术对其中的25例进行DNA含量的原位定量及核浆比测定。结果：随病理分级细胞DNA含量依次增高，影响DNA含量变化的主要因素是多倍体细胞群的出现，它的出现率是判断肿瘤恶性程度的重要指标。Ag-NOR计数及核浆比与细胞DNA含量变化呈正相关，也随病理分级逐级增高，并在判断肿瘤恶性程度上有一定意义。