目的:探讨细胞块石蜡包埋切片技术在血性胸腔积液中对肺腺癌的诊断价值。方法:回顾性分析西安交通大学第一附属医院2018年6月至2019年6月经血性胸腔积液诊断并经病理活组织检查确诊的60例肺腺癌患者资料。对血性胸腔积液分别行细胞学涂片、去红细胞离心沉淀法制成细胞块石蜡包埋切片并进行细胞学检查，采用免疫组织化学技术检测标本中癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白7（CK7）、NapsinA、甲状腺转录因子1（TTF-1）、细胞角蛋白5/6（CK5/6）、calretinin、P63、P40等的表达。以组织病理学检查结果为金标准，评估比较细胞块石蜡包埋切片及细胞涂片技术对血性胸腔积液中肺腺癌的诊断价值。结果:细胞块切片背景清晰，细胞形态清晰易辨，可做成永久性标本。60例肺腺癌患者血性胸腔积液细胞涂片结果显示，21例诊断为异型细胞，39例诊断为腺癌，与组织病理学检查结果诊断腺癌的符合率为65%（39/60）；血性胸腔积液细胞块石蜡包埋切片免疫组织化学结果显示，CK7、NapsinA、TTF-1、CEA均阳性，P40、P63、CK5/6、calretinin均阴性，依此均诊断为腺癌，与组织病理学检查结果诊断腺癌的符合率为100%（60/60），高于细胞学涂片（ χ2＝23.088， P<0.01）。 结论:去红细胞离心沉淀法制成细胞块石蜡包埋切片技术在血性胸腔积液中对肺腺癌的诊断率高，与组织病理学诊断符合率高，可提高经血性胸腔积液诊断肺腺癌的准确性，对细胞学分型亦有较好的参考价值。

目的:构建人唾液腺基底细胞腺瘤（basal cell adenoma，BCA）体外类器官模型。方法:纳入2021年10月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科确诊的唾液腺BCA患者1例（66岁女性），收集其手术切除新鲜肿瘤组织，在以基质胶固态液滴为基础的培养液中行体外类器官培养，倒置显微镜观察类器官生长情况；14 d后将类器官用4%中性多聚甲醛固定，琼脂预包埋石蜡包埋法制成石蜡块，切片、苏木精-伊红染色，组织学形态观察及p63、Ki67、细胞角蛋白14（cytokeratin14，CK14）、β-联蛋白（β-catenin）、S-100、钙调理蛋白（calponin）免疫组化染色进行类器官鉴定。结果:构建的BCA类器官光镜下局部呈分叶结节状，类器官细胞巢周围嗜伊红玻璃样物质沉积，与BCA组织形态学相似；免疫组化显示类器官细胞表达CK14、p63，β-联蛋白核阳性，提示类器官保留了BCA原肿瘤细胞的免疫表型。结论:初步建立了人唾液腺良性肿瘤BCA体外类器官模型。

目的 观察膜转运体Megalin、Cubilin在发生发育小鼠肾内的分布,从而揭示它们在肾发生发育中相应功能分化的时空规律.方法 C57BL/6小鼠按雌雄1:1合笼饲养,并于胚(胎)龄(Ed)E10、12、14、16、18 d,及生后日龄(Pd)P1、3、7、14、28、42 d,分离胎鼠、仔鼠或成鼠的肾脏.应用改良的块染技术对不同发育阶段的肾脏组织进行整体固定及染色,分别进行常规石蜡包埋,制成连续的石蜡切片(5μm).选取连续切片中目标切片,采用免疫组织化学技术和免疫荧光技术对不同发育阶段的小鼠肾脏膜转运体Megalin和Cubilin进行定位,观察其在不同发育阶段的表达情况.结果 Megalin和Cubilin在E10 d的中肾管上皮细胞开始有表达,E12 d时表达于肾脏输尿管芽上皮细胞的近腔面游离缘,二者主要以共表达模式存在.E14 d以后在发生发育小鼠肾脏的"逗号"小体、"S"型小体上皮细胞的游离缘呈弱表达,于肾脏近端小管的上皮细胞游离缘表达明显,偶尔可见在未发育成熟的血管球有弱表达.Megalin和Cubilin在细段、远端小管、集合管系统以及间质部分都未见表达.结论 膜转运体Megalin和Cubilin在中肾管、输尿管芽、"逗号"小体、"S"型小体,以及近端小管的依次表达规律提示小鼠肾脏在中肾形成时期就开始有蛋白或多肽的转运功能.此外,二者稳定地出现在较为成熟的近端小管,较弱地出现在未成熟近端小管,表明其重吸收蛋白质的功能与近端小管结构的成熟度有关.

目的 定量研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝小叶内卵圆细胞(HOC)总体积和轮廓数密度的变化.方法 将11只雄性健康SD大鼠随机分为对照组(n=5)、肝纤维化组(n=6),每周2次皮下注射CCl4与橄榄油混悬液,每次3 mL/kg.在肝纤维化造模5周后取材,从每只大鼠肝脏随机抽选5个大小约1 mm3的肝组织块分别制作1张Epon812环氧树脂包埋超薄切片,运用体视学方法结合透射电子显微镜技术,对大鼠肝小叶内的HOC总体积和轮廓数密度进行定量研究,另从每只大鼠剩余肝脏等距随机抽选4个2 mm厚的肝组织块并分别制作2张石蜡包埋的Masson染色切片,按照肝纤维化Metavir分期标准定性评估每只大鼠的肝纤维化程度.计量资料两组间比较采用成组t检验.结果 体视学定量研究显示,对照组肝小叶内HOC总体积为(15.40±7.63)mm3,肝纤维化组肝小叶内HOC总体积为(146.80±114.00)mm3,与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内HOC总体积显著增加了8.53倍(t=-2.551,P=0.031);对照组肝小叶内HOC轮廓数密度为(56.20±40.40),肝纤维化组肝小叶内HOC轮廓数密度为(566.50±317.00),与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝小叶内轮廓数密度显著增加了9.08倍(t=-3.539,P=0.006);定性观察研究结果显示,肝纤维化大鼠肝纤维化分期按照Metavir评分标准达到Ⅱ～Ⅲ期,大鼠窦周隙内肝星状细胞增生部位周围伴随着HOC的大量增生.结论 CCl4诱导肝纤维化大鼠肝小叶内HOC显著增生.

细胞学标本处理技术目前主要分为细胞学制片技术和细胞蜡块制备技术.细胞蜡块制备技术是一项将脱落细胞样本通过离心浓缩形成沉淀物后再用石蜡包埋切片的细胞病理学技术,对细胞病理学诊断的意义重大,是一项比较实用的细胞病理学技术[1],于1999年被Kathleen等报道,目前已有多种细胞蜡块制备方法:玻片法、离心沉淀法、酒精(乙醇)凝固法、试管包埋法、浸蜡法、琼脂包埋法、蛋清包埋法等,但该领域还未形成明确的标准[2].

目的 评价子宫内膜取样器Pipelle获取两种子宫内膜标本筛查子宫内膜病变的临床应用价值.方法 采用前瞻性、自身对照的方法,选取2020年12月至2022年3月梧州市工人医院收治的316例存在明确手术指征需进行宫腔镜检查和子宫内膜活检的患者作为研究对象.采用子宫内膜取样器Pipelle获取子宫内膜标本,随后进行宫腔镜检查+常规诊刮术,Pipelle获取的子宫内膜标本同时进行液基细胞学制片及细胞模块石蜡包埋切片,以宫腔镜检查+常规刮宫术的组织学病理作为金标准进行比较.结果 (1)常规诊刮术行组织石蜡切片满意率为97.78％(309/316),Pipelle获取标本行液基细胞学制片满意率为93.99％(297/316),行细胞模块石蜡包埋切片满意率为98.40％(311/316),两种石蜡切片的取材满意率均高于液基细胞学制片的取材满意率,差异具有统计学意义(P＜0.05);两种石蜡切片的取材满意率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);Pipelle获取标本时无需麻醉和扩宫,患者无疼痛感.(2)Pipelle获取细胞模块组织病理学与液基细胞学筛查和诊断子宫内膜病变的灵敏度分别为68.75％、40.63％,特异度分别为99.27％、98.10％,阳性预测值分别为91.67％、72.22％,阴性预测值分别为96.45％、93.14％,符合率分别为96.08％、91.86％,Youden指数分别为0.61、0.39,Kappa值分别为0.76、0.47.结论 Pipelle获取子宫内膜标本满意率高,标本进行细胞模块包埋石蜡切片组织病理学检查的准确性高于液基细胞学,Pipelle取样操作简便,无需麻醉,无疼痛感,适用于基层医院筛查子宫内膜病变.

目的 研究诱导多能干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)体外对膝骨关节炎(KOA)患者软骨基质的保护作用及其部分机制.方法 收集KOA患者关节置换手术切除的软骨组织,分别进行组织和细胞实验.软骨组织剪成小块,随机分为对照组、白介素-1β(IL-1β)诱导组和iPSC-MSCs组.除对照组外,各组软骨组织予以IL-1β(10 ng/ml)刺激96 h,再与不同数量 iPSC-MSCs(1 ×104,1 × 105,1 × 106)细胞共培养72 h后取出软骨组织进行石蜡包埋切片,免疫组化法检测组织中带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚蛋白样金属蛋白酶家族(ADAMTS-4、ADAMTS-5)及Ⅱ型胶原(COL2)表达,ELISA法检测共培养上清中基质金属蛋白酶13(MMP13)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平,苏木素伊红(HE)染色检测离体软骨组织的病理改变.分离KOA患者软骨组织中软骨细胞,经IL-1β(10 ng/ml)刺激48 h后,将软骨细胞与不同数量iPSC-MSCs(1 ×104,1 × 105,1 × 106)共培养72 h.免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测软骨细胞中矮小相关转录因子2(RUNX2)、ADAMTS-4、AD-AMTS-5的表达.结果 与对照组比较,IL-1β可诱导软骨组织 RUNX2、ADAMTS-4、ADAMTS-5 水平升高、COL2 水平降低,培养上清中MMP-13、IL-6水平升高(P＜0.05),IL-10水平减少(P＜0.05);与IL-1β诱导组比较,不同数量iPSC-MSCs 共培养可降低上清中MMP-13、IL-6水平,降低RUNX2、ADAMTS-4、ADAMTS-5 的表达,促进 COL2 表达,并升高IL-10水平.结论 iPSC-MSCs体外可抑制ADAMTS-4、ADAMTS-5表达,减少软骨细胞外基质降解,起到关节软骨保护作用.

目的 探讨趋化因子巨噬细胞炎性蛋白(MIP-1)α、MIP-1β在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用.方法 收集2014年1月至2016年10月于我院就诊的甲状腺疾病患者120例,其中甲状腺乳头状癌60例(实验组),良性甲状腺疾病60例(对照组).利用ELISA法检测患者血清MIP-1α、MIP-1β的表达水平.手术切除标本常规制作石蜡包埋切片,分析MIP-1α、MIP-1β的表达特点.结果 MIP-1α、MIP-1β蛋白定位于甲状腺上皮细胞质,在癌组织中的表达阳性率显著高于良性甲状腺肿块组织.实验组血清中MIP-1α、MIP-1β的表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MIP-1α、MIP-1β可能参与了甲状腺乳头状癌的发生发展,有可能作为甲状腺乳头状癌监测和治疗的新靶点.

目的 探讨干细胞更新因子Bmi-1、干细胞表面标志物巢蛋白Nestin在皮肤黑素瘤中表达的临床与病理意义.方法 收集武汉市妇女儿童医疗保健中心、荆州市中心医院2010-2015年40例经手术切除经组织病理加免疫组化诊断为黑素瘤的石蜡包埋切片为研究对象(实验组),选择40例组织病理诊断为良性色素痣标本作为阴性对照(对照组).SP免疫组化法分别检测实验组与对照组Bmi-1、Nes-tin的表达与患者性别、年龄、发病部位、肿块大小、病理分级、临床分期等因素是否具有差异;并对Bmi-1及Nestin行相关性统计分析.结果 黑素瘤组中Bmi-1、Nestin高表达,且Bmi-1、Nestin的高表达与肿瘤大小、病理分级、临床分期密切相关;Bmi-1与Nestin的表达呈正相关.结论 Bmi-1和Nestin在肿瘤的发生、发展中可能存在相关性,可能是一个新的皮肤黑素瘤辅助诊断组织学标记.

目的 观察胎牛血清和大鼠血清对体外构建大鼠软骨组织的效应,为组织工程软骨筛选出合适的培养方法.方法 取大鼠原代软骨细胞,离心后,培养箱中放置48 h,细胞团块会自发形成软骨小结.分为胎牛血清组和大鼠血清组.每隔一天换一次液,连续培养2周.取出软骨组织,称量重量,固定于4％多聚甲醛,经过脱水、石蜡包埋、切片后,经HE(苏木素-伊红)染色,甲苯胺蓝和藏红-固绿染色及细胞免疫荧光检测Ⅱ型胶原(Col2a1)、Ⅰ型胶原(Col1a1)的表达.结果 胎牛血清组的软骨组织重量比大鼠血清组的软骨组织明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).HE染色结果表明:大鼠血清组的组织形态呈纤维样结构,而胎牛血清组组织形态呈典型的软骨结构.胎牛血清组的组织甲苯胺蓝和藏红染色明显,而大鼠血清组的组织甲苯胺蓝淡染,固绿深染,提示软骨组织退变或非软骨组织.进一步免疫荧光检测软骨标志基因Ⅱ型胶原和Ⅰ型胶原,胎牛血清组Ⅱ型胶原高表达,而大鼠血清组低表达,Ⅰ型胶原在两组的表达和Ⅱ型的表达呈相反的结果,即在大鼠血清组高表达,在胎牛血清组低表达.结论 胎牛血清可促进体外软骨组织的形成,而大鼠血清抑制了软骨组织形成.胎牛血清适合体外构建大鼠软骨组织.